Cheat Sheet - mikrobiológia
Száma 20Iskusstvennye táptalaj, azok besorolását. Követelmények a közegben.
A tápközeg a mikrobiológia úgynevezett közepes tartalmaz különböző vegyületek-tartalmú komplex vagy egyszerű összetételű, amelyeket a baktériumok vagy más mikroorganizmusok egy laboratóriumi vagy ipari környezetben.
A tápközeg készül állati termékek vagy DIS-titelnogo eredetű. Nagy jelentősége van a jelenléte a tápközegben növekedési faktorok, amelyek katalizálják a metabolikus folyamatok a bakteriális sejt (nN-vitaminok B, nikotinsav, stb).
Mesterséges közegben szerint előállított bizonyos receptek különböző infúziók vagy főzetek állati vagy növényi eredetű pro-a szervetlen sók adagolása és a szén-vodov nitrogéntartalmú anyagok.
A bakteriológiai gyakorlat leggyakrabban használt száraz táptalajok, amelyek alapján az eredmények a modern biotechnológia. Ezek előállításához használt, gazdaságilag életképes, nem élelmiszer-nyersanyagok: a veszteség eltarthatósága vérkészítmények (gidrolizina-sav hidrolizátum, az állati vérből, aminopeptid - enzimes hidrolizátuma vérkészítmények biotechnológia (takarmány Takarmányélesztők lizin, szőlő por, belkolizin) Száraz táptalajon lehet tárolni hosszú ideig. időben, könnyen szállítható és viszonylag szabványos készítmény.
A konzisztenciája a táptalaj lehet egy zsidó-Kimi, félig folyékony, vastag. Szilárd táptalaj elkészítéséhez előre bavleniya folyékony közegben, hogy 1,5-2% agar, félig - 0.3- 0,7% agar. Agar egy olyan termék a Isten CCA-típusú tengeri algák, on olvad 80-86 ° C-on megszilárdul, körülbelül 40 ° C-on, és fagyasztott állapotban Shem tulajdonít sűrűségű közegben. Néhány esetben, a zselatin (10-15%) használtuk szilárd táptalaj. Számos természetes táptalaj (sy-hengerelt forgatógomb vér, hengerelt tojásfehérje) maguk sűrű.
A szándékolt célt a közeg van osztva mag, elektív és differenciál-ügyi diagnosztikai.
A fő szempont a közeg termesztésére használt számos baktérium. Ez a triptikus emésztéssel hús, hal termékek, kazein vagy állati vér előállítására használt folyékony közegben - sűrű és táplevesben - tápanyag agar. Az ilyen közeg alapját prigotov-ment komplex táptalajon - cukor, vér stb kielégítő táplálkozási igényeinek patogén tartály THEURILLAT ..
Szabadon választható használt táptalaj megválasztásának Tel'nykh-izolálás és mikroorganizmusok felhalmozódását definiált-láb formában (vagy egy adott csoport) származó anyagokból-nek különböző idegen mikroflóra. Létrehozásakor választható táptalajon alapulnak biológiai egyed-ség, amelyek megkülönböztetik a mikroorganizmusok a többségi-CIÓ mások. Például, a szelektív növekedési A staphylococcusok-megfigyelt emelt nátrium-klorid-koncentráció, Ho lerne Vibrio - alkalikus körülmények között, stb ...
Differenciál-diagnosztikai tápközegben-változott differenciálódása bizonyos típusú (vagy csoport) a mikroorganizmusok, amelyben az MD. Az elv építkezés ezen környezetek a tényen alapul, hogy a különböző típusú baktériumok különböznek Biochim-dasági aktivitás miatt egyenlőtlen set Fermi-ing.
Egy speciális csoportját szintetikus és polusintetiche-paraméter táptalajon. A készítmény a szintetikus táptalajok kémiailag tiszta anyag: aminosavak, ásványi sók, szénhidrátok és vitaminok. A félszintetikus közepes továbbá tartalmaznak peptont, élesztőkivonatot és más tápanyagokat. Ezek a környezetek gyakran használják a tudományos tanulmányok-sumer munka és mikrobiológiai ipar a termelés az antibiotikumok, vakcinák és más drogok.
Az utóbbi években, annak érdekében, hogy mentse a táptalaj és expressz bejelentkezési rennoy azonosítása bizonyos mikroorganizmusok (enterobaktériumokban, Staphylococcus, Streptococcus és mások.) Használnak, mint a létesítő mikrotesztálcákba rendszer (MTS). Ezek egy polisztirol lemez mérőhelyekbe, amelyek-ste-steril differenciáldiagnosztikai közegben. Sterilizálás MTS által végzett UV besugárzással. Microtest rendszerek különösen alkalmasak tömeges bakteriológiai vizsgálatok gyakorlati Labs.
Követelmények a közegben.
Bármilyen táptalajt kell felelnie az alábbi tre-Ments: tartalmazza az összes szükséges anyagot reprodukciója mikroorganizmusok könnyen emészthető formában; van optimális páratartalmat, viszkozitás, a pH és izotóniás helyezése-Možnosti átlátszó. Minden táptalaj sterilizált egy bizonyos módon összetételétől függően.
№ 21Printsipy és izolálására szolgáló eljárások tiszta tenyészeteket Bacto ry.
Pure kultúra nevű baktérium populáció od-láb típusú vagy egy faj, termesztett tápoldatban. Sok fajta baktérium elosztjuk az egyik jellemzője a biológiai variációk - biovars. Biovars, megkülönböztetve Xia biokémiai tulajdonságait, az úgynevezett utalvány mintákban. anti-gén tulajdonságai - serovarami. érzékenység fág - fagovarami. Mikroorganizmus kultúra az ugyanazon fajhoz, biotípust, vagy izolált különböző forrásokból származó vagy különböző időpontokban az azonos forrásból származó, az úgynevezett törzsek. általában kijelölt számokat vagy bármilyen SIM ökrök. Tiszta tenyészeteit baktériumok a diagnosztikai laboratóriumok logikai kapott baktériumok izolált telepekből származó, az átoltások a hurok a csövek, szilárd vagy, ritkábban, folyékony tápközegben.
A telepet különítünk Osprey-látható Leniye azonos mikroorganizmus-fajok szorzatából származó egyik baktérium sejteket szilárd táptalajon (a felszínen, vagy a mélysége azt). A kolóniák baktériumok különböző fajok különböznek egymástól a tengeri fologii, szín és egyéb jellemzőit.
Tiszta kultúra baktérium kapott Diagna - terrorista Studies - azonosítás, ami úgy érhető el kimutatására alaktani, biokémiai-nek és egyéb mikroorganizmus.
Morfológiai jelek és színező baktériumok által tanulmányozott mikroszkópos vizsgálata festett keneteken különböző módszerekkel, és a natív készítmények.
Tenyésztési tulajdonságokkal jellemezhető feeder-TION követelmények, feltételek és a típus a baktériumok növekedését a raft, és folyékony táptalajon. Ők vannak telepítve a tengeri fologii telepeket és jellemzői kultúra növekedés.
Biokémiai tulajdonságok meghatározása a baktérium-bór konstitutív és indukálható enzimek specifikus egy bizonyos nemzetség elme kiviteli alakban. A bakteriológiai Prac-tick taxonómiai szempontból gyakran szacharolitikus baktériumok és proteolitikus enzimeket, amelyek meghatározása in-differenciál-diagnosztikai táptalajon.
Amikor azonosító baktériumok nemzetségét és faját, lefelé bekapcsolását Manie pigmentek, színező a kolónia és a tápközeg a különböző színekben. Például, egy vörös pigment-Obra alkotnak Serratia marcescens, Staphylococcus pigment - Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), kék-zöld pigment - Pseudomonas-domonas aeruginosa.
Annak megállapítására, biovar (utalvány mintákban, szerovar, fág típus) végezzük további tanulmányokat vyyalvenib megfelelő marker - meghatározzuk enzim antigén érzékenységét ventilátorok.
Izolálására szolgáló eljárások a tiszta tenyészeteket Bacto ry.
Sokoldalú eszköz gyártására növények etsya bakteriális hurok. Különben ő is, vetésre stab változó, speciális antibakteriális tű és növények Petri-csészében - üvegből vagy fém spatula. Olyan növények folyékony anyagok, valamint egy hurkot használunk, és a paszta-Rovsky beosztott pipetta. Az első a pre-olvasztható gotovlyayut steril üvegcsövekbe, hogy felhúzzák a láng, mint hajszálerek. Vége ka-kapilláris azonnal lezárjuk a sterilitás fenntartására. A pasztörpipettával végzett széles végét túlzott kryvayut gyapjú, ami után elhelyezett speciális doboz, vagy csomagolja papírba és sterilizálni.
Való átoltással A baktériumtenyészet csövet hozott a bal oldali és a jobb clasping pamut dugón IV és V ujjak, eltávolítjuk azt, hordozó fölött az égő lángja. Tartsa Dru-gimi ujjai ugyanaz a kéz hurok, egyre azt a magot ma Therians, majd zárja le a fiolát dugóval. Ezután egy cső, egy ferde agar készítés hurok egy maganyagból, csökkenti azt, amíg a kondenzátum az alsó Cha-sti közegben, és cikcakkos mozgás megosztjuk társ rial a kúpos agar-agar felületére. Eltávolítása a hurok, égett a szélén a csövet és zárja azt egy biztosítékot. Hurok sterilizált láng és hozott egy állványt. Kémcsövek növények nadg jóvá mutató vetésidő és a természet a mag mat-rial (tanulmány számát vagy nevét a kultúra).
Crops „gyep” termelnek egy spatulával egy agar táptalaj egy Petri-csészébe. Erre a célra, megnyitva a bal oldali fedél kisállat-Leu vagy pipettázott inokulumot viszünk felületére tápanyag agar. Spatula azután elvégeztük a megég-ki, hűtsük le a belsejében a fedelet, és eldörzsöljük anyagot az egész felületén a közeg. Az inkubálás után, beoltás tűnik egyenletes, folytonos baktériumok növekedését.
№ 22Fermenty baktériumok. A baktériumok azonosítása fer-mentativnoy aktivitást.
Középpontjában az összes metabolikus reakciók a baktériumsejtben az enzimek aktivitását, hogy tartoznak az osztály-6 önmagában: oxidoreduktázok, transzferázok, hidrolázok, ligáz, liáz, izomeráz. Enzimek, a kép-emye baktériumsejt locale-hívás a sejtek belsejében - endofermenty és a környezetbe - exoenzymes. Exoenzymes fontos szerepet játszanak abban, hogy a bakteriális sejt áll rendelkezésre penetráció-szén- és energia. A legtöbb hidroláz exoenzymes, amely áll a környezet-hasítható peptidek nagyobb molekulák, polisaha-Reed, lipidek a monomerek és dimerek, amelyek behatolnak a sejtbe. Számos exoenzymes, mint például hialuronidáz, kollagenáz és egyéb enzimek agresszió. Egyes enzimek lokalizált-Vanir a periplazmatikus térben és a baktérium elpusztul. Részt vesznek a pro-átengedése anyagok szállítására a bakteriális sejt. Enzimatikus spektrum egy taxonómiai jellegű, jellemző a család, nemzetség és - egyes SLE-teák - a fajra. Ezért Paul által határozott spektruma enzimatikus aktivitás meghatározásához a taxonómiai helyzetét a baktériumok. A jelenléte ekzofermen-Ing is meghatározható differenciál diagnosztikai környezetben, ezért a megkülönböztetés baktérium kifejlesztett egy speciális vizsgálati rendszer, amely egy sor megkülönböztető diagnosztikai környezetben.
A baktériumok azonosítása fer-mentativnoy aktivitást.
A legtöbb cha száz enzimek meghatározza az osztály hidrolázok és oxidoreduktázok, különleges módszerekkel és a média.
Annak megállapításához, a proteolitikus aktivitása a mikroorganizmusok, amelyek mikro-leoltottuk oszlopon zselatin szúrt. Che vágott 3-5 nap vetés böngészést és tudomásul jellemezve ter folyósítja el a zselatint. Amikor a protein lebomlása egyes baktériumok lehet felosztani specifikus termékek - indol, hidrogén-szulfid, ammónia. A meghatározásuk-MENT speciális indikátor papír, CO-torye helyezzük a nyak és a dugó egy vattacsomót vagy egy BCH (i) pepton-víz, bevetett vizsgált mikroorganizmusok. Indol (a termék bomlás zheniya-triptofán) megfesti a rózsaszín szalag impregnált papír telített oxálsav-oldattal. Impregnált papír ólom-acetát-oldattal, jelenlétében a hidrogén-szulfid blackens. Az ammónia mennyiségi meghatározása egy piros lakmuszpapírt.
Sok mikroorganizmus taxonómiai at-jel képes bontani egy bizonyos szénhidrátok savakat képezni és gáznemű produk-Ing. Ahhoz, hogy érzékeli ezt használatra Hiss közepes gazdaság különböző szénhidrátok (glükóz, szacharóz, mal-tozu, laktóz, stb). Kimutatására a savat a közegben hozzáadott Andred reagens, amely megváltoztatja a színét, a halvány sárga, piros pH 7,2-6,5, így a közeg készletet a mikroorganizmusok növekedésének Hiss úgynevezett „közelében tarka”.
Detektálásához gazoobra-képződést a folyékony közegben lesüllyed úszók vagy alkalmazási forma egy félig-közeg 0,5% agar.
OP-vékonyított intenzív-termelés. jellemző a kevert típusú fermentált közegben 1% glükózzal és 0,5% pepton (Clark-féle tápközeg) adunk, metilvörös indikátor, amely sárga pH = 4,5 és a fenti, és a vörös -A alacsonyabb pH-értékeken.
A karbamid hidrolízisét határozzuk kiosztani am Miaka (lakmuszpapír) és a lúgozott közegben.
Azonosításához sok mikroorganizmus ispol'uet alkotnak reakció-Voges - Proskauer acetoinná - Promo diate kapcsolat kialakulását piroszőlősav butándiol. A pozitív reakciót találkozunk-Ments a jelenlétét butandiolovogo erjedés.
A kataláz képes észlelni buborékok az oxigén, hogy vált kiemelkedő összekeverése után azonnal a betétek a mikrobiális sejtek 1% -os oldat peroxid vodoro da.
Ahhoz, hogy meghatározzuk a újrafelhasználását citokróm eszközök: 1) 1% -os alkoholos oldat SS-naftol-1; 2) 1% -os vizes oldatban N-dimetil-p-fenilén-dihidro-klorid. A jelenléte citokróm oxidáz bírálják el a kék szín, amely megjelent, azokat, amelyeket 2-5 perc alatt.
Annak megállapításához, a nitritek rea-TIV Griess: Abban esetben a piros szín jelzi a Nali chii-nitrit.