Tárgy mikrobiológiai diagnózis bakteriális vérhas
TÉMA: mikrobiológiai diagnózis bakteriális vérhas.
Cél. megvizsgálja etiológiai szerkezete bakteriális dizentéria, biológiai tulajdonságait kórokozók. Ismerje meg az alapelveit diagnózis és képes elvégezni azonosítása izolált kultúrák.
Shigellosis - polietiologic anthroponotic betegség által okozott több faj Shigella és főleg érintő vastagbél. Közös jellemzői minden Shigella - hiányzik csilló, kevésbé kifejezett, mint a többi enterobaktériumok enzimaktivitása, a jelenléte csak az O-antigén.
Biokémiai aktivitás és antigén struktúrájának összes Shigella 4 csoportba osztjuk: az A, B, C, D. Mindegyik csoport tartalmaz egy fajta különböző szerotípusok.
Nemzetközi Osztályozása Shigella
A - Shigella dysenteriae
B - A Shigella flexneri
C - Shigella bovdii
D - Shigella sonnei
Shigella virulenciafaktorok jelenléte határozza meg az adhéziós és kolonizációja Shigella, amelyek behatolnak a hám a vastagbél és szaporodnak ott. Később kifejlesztett késleltetett típusú hiperszenzitivitás (DTH), vagy fertőző allergia kialakulásához vezet a fekélyes vastagbélgyulladás.
Toxicitást Shigella kialakulásával kapcsolatos endotoxin (LPS) és exotoxinok 2 típus: enterotoxin és citotoxin. Citotoxin előállított Shigella dysenteriae (Shiga Grigoreva-).
A jellemzője a epidemiológiája dizentéria eltűnése a 40-es Shigella dysenteriae, majd visszaküldi azt 60-80h, ill.
Laboratóriumi diagnózis bakteriális vérhas végzett három fő módszerek: bakteriológiai, szerológiai és allergiás. Az alapvető eljárás diagnostiki- bakteriologicheskiy- beoltott széklet a választható diagnosztikai és differenciál táptalajok (selenitovaya dúsítási táptalajt, Ploskireva környezetben, Endo és Levine). Vegye figyelembe, hogy extrahálhatósága antibiotikozavisimyh növeli Shigella törzsek, amikor szélesztjük széklet média klóramfenikolt tartalmazó és tetraciklin (25mkg / l).
Annak érdekében, hogy a reakció szerodiagnosztizálására közvetett hemagglutinációs (IHA).
Allergodiagnostika- véget intradermális tesztet dizenterinom együtt 3 - 5 - napján a betegség (Tsuverkalova teszt).Önálló munka a diákok
Szét és felvázolni egy notebook áramkör mikrobiológiai diagnózis bacilus okozta dizentéria.
Magot termelni beteg ürülék gyanús bakteriális dizentéria a differenciál-diagnosztikai adathordozókat Ploskireva vagy Endo.
Ahhoz, hogy tanulmányozza a mintát a növekedés a közegben Ploskireva (a tanulmány a kulturális tulajdonságok).
Része S- alakú színtelen telepeket (kolónia L- hibás) szerdán Ploskireva készíteni kenet, foltot Gram és promikroskopirovat (a tanulmány a morfológiai és a színező tulajdonságok).
Formálási orientálása agglutinációs reakciót üveg keverékével vérhas szérumok (flexneri, sonnei) és monoretseptornoy szérum.
Izolálni tiszta tenyészete a többi kolónia laktozodefektivnoy (Ld-telepek) oltjuk Russell környezetben.
Mikroszkópos vizsgálata során kiválasztott kulturális tisztaság.
A tanulmány az enzimatikus tulajdonságait a kiválasztott kultury- reseeding differenciál diagnosztikai közegben Hiss.
Meghatározása a kiválasztott kulturális érzékenység antibiotikumok disco diffúziós módszerrel (papír lemezek) és fagolizabelnosti.
Rendszer 3. Mikrobiológiai vizsgálat vérhas
agglutinációs teszt (Widal típusú reakció) dizentiriynymi diagnosticums, a TPHA
Vetés differenciális közepes (Ploskireva et al.)
A természet és a kolóniák színét
Kenet, Gram-festés
agglutinációs teszt üveg keverékével vérhas szérumok
Russell telepeket szerdán vagy szerdán trehsaharnuyu
Kenet, Gram-festés
Vetés a „színes” sorozat
agglutinációs reakciót üveg egy keveréket dizentiriynyh szérumokat, majd fajtájú és típusú
Irányelvek az önálló munkavégzésre
1. nap: A széklet a beteg oltottuk differenciál-diagnosztikai adathordozókat Ploskireva vagy Endo. A jelenlétében a vizsgálati széklet vagy nyálkahártya-gennyes véres csomók vannak kiválasztva és bakteriológiai kacs, mossuk egy izotóniás oldatban a nátrium-klorid és az alkalmazott, hogy a felület a közepes vagy Ploskireva Endo majd eldörzsöljük egy spatula segítségével. Növények inkubáljuk egy inkubátorban t - 37 ° C-on 24 órán át.
2. nap: a) átlátszó, színtelen telepeket újra szélesztjük Russell közegben izolálására a tiszta tenyészet;
b) a fennmaradó az izolált telepek beállítására használjuk az orientációs agglutinációs reakciót üveg keverékével vérhas szérumok és a sera keverékével anti-Salmonella (tífusz, hogy elkerüljék és Salmonella).
3. nap: a) 24 órán át, közegként Russell - agar oszlop kék színűvé válik.
b) egy izolált tenyészetet átoltjuk differenciál diagnosztikai adathordozókat Hiss vagy MTS - 5U;
c) meghatározzuk az érzékenységet a kiválasztott tenyészetek antibiotikum disco diffúziós módszer és fagolizabelnost.
4. nap: A végső véleményt meghatározására biokémiai tulajdonságai, érzékenység antibiotikumok és fagolizabelnosti.
Megjegyzés: a székelés által közvetlenül az ágy mellett a bizonytalanság Shigella a külső környezet.
Kérdések az önuralmat:
Adj egy modern nemzetközi osztályozása Shigella.
Milyen tulajdonságokkal alapját képezik az osztályozás Shigella?
Mi a különbség a különböző típusú baktériumok vérhas biokémiai tulajdonságok?
Milyen típusú vérhas pálca termel exotoxin?
Sorolja fő diagnosztikai mikrobiológiai módszerekkel bakteriális vérhas.
Melyek a leggyakoribb oka a Shigella baktérium vérhas megadva.
Ennek anyaga vesz egy tanulmány izoláltunk egy tiszta kultúra és a táptalaj, amelyen beoltott?
Kábítószer konkrét megelőzésére és kezelésére bakteriális vérhas.
6. lecke
TÉMA: mikrobiológiai diagnózis a kolera.
Célkitűzés: A tanulmány a módszerek mikrobiológiai diagnózis a kolera. Ismeri a módszereket konkrét megelőzésére és kezelésére a kolera.
Kolera - akut anthroponotic különösen veszélyes karantén fertőző betegség jellemző klinikai tünetei gastroenteritis kiszáradás éles és súlyos mérgezést.
Típusú Vibrio cholerae biotípusú 4: cholerae ELTOR, Proteus (Metchnikoff cholerae), Albensis (világító Vibrio). Kolera okozza biotípusú 2: cholerae és ELTOR. Vibrio cholerae monotrih nagyon mozgékony, igényes PH, növekszik lúgos közegben, magas biokémiai aktivitását. Ami a három uglevodam- szacharóz, mannóz és arabinóz minden Vibrio vannak osztva 8 csoportban (Heiberg). Cholerae ELTOR biovars és én csoportba tartozik Heiberg: elhasítjuk, hogy a savas gáz szacharóz nélküli és a mannóz és arabinóz hasítjuk.
A virulencia V. cholerae köszönhető két toxin: endotoxinok és exotoxinokat. Vezető szerepet a betegség patogenezisében játszik exotoxin-toxin géneket. Ez okozza citotoxikus hatás -poteryu testnedvek és sók a nátrium, kálium, amely a fő halálok a beteg és a Algida.
Diagnózis a kolera végzett bakteriológiai módszerrel. Az anyag a tanulmány széklet, hányadék, élelmiszert stb hullamerevség anyag.
Tápközeg termesztésére Vibrio cholerae: 1% pepton víz lúgos, lúgos agar TTSBS szerdán.
Önálló munka a diákok.
Felvázolni egy notebook áramkör kolera mikrobiológiai diagnosztikai.
Az első lépésben a tanuló a vizsgált anyag festett keneteken a Gram módszerrel és a „összenyomva” és a „lógó” csepp, majd beoltjuk 1% lúgos pepton víz és szilárd táptalajon.
Felhalmozódni kultúra passzáltuk, hogy egy új anyagot pepton víz, és még egyszer a lemez táptalajra. Osztja a tiszta tenyészet.
A kinyert tenyészetet azonosítottuk morfológiai és színező (mikroszkópos festett keneteken által Gram-festés), tenyésztési, biokémiai és antigén tulajdonságait.
Szerotípusokat Vibrio cholerae meghatározva agglutinációs reakciót üveg agglutináló sera Inaba, Ogawa, Gikoshima.
Biokémiai tulajdonságok határozzák meg szénhidrát: szacharóz, mannóz, arabinóz.
A gyógyszerek tanulmányozására megelőzésére és kezelésére a kolera.
Végrehajtása a vizsgálati protokoll.
Rendszer 4. Mikrobiológiai kutatások kolera
A széklet, hányadék, epe, anatomopathological anyagot, vizet és másokat.
Így, azonosítása kultúrák végezzük 3 szakaszból áll: 1) alakíthatják ki nemzetségbe tartozó Vibrio; 2) megkülönböztessék őket a Vibrio cholera RA O- szérum érzékenység specifikus fág és egyéb vizsgálatok; 3) a tulajdonságait meghatározzuk haszonnövény fajok.
A végső válasz izolálása és azonosítása izolált kultúrák adnak 36-48 órán át.
III. Expressz - diagnosztikai eljárások.
Immobilizálása Vibrio cholerae kolera szérumok.
Módszertan: A forgalomba V. cholerae immun szérumot (amely antitestek elleni V.cholerae), elvesztik a mobilitás (meghatározott „lógó” és „összenyomódott” csepp).
IFA (immunfluoreszcens reakció).
Módszertan: A készítmények a vizsgálati anyagot kezeljük fluoreszcens kolera szérummal és alatt vizsgáltuk a fluoreszcens mikroszkóp.
Pozitív result- detektálás még egy előkészítő egységben vibriók fényes zöld-sárga lumineszcencia formájában ragyogó RIM perifériásán sejtek.
DNS - diagnosztika - a molekuláris genetikai módszerek - PCR - polimeráz láncreakció.
IV. szerológiai módszerekkel
Ezek a másodlagos eljárás és használt retrospektív diagnózis kolera, valamint azonosítani és értékelni a feszültség vibrionositeley fertőzés és vakcinálás utáni immunitás. Szerodiagnosztizálására végzett stádium RA vagy IHA (közvetett hemagglutinációs reakciót) eritrocita diagnosztikum.
A reakcióelegyet behelyezzük egy plexiüveg panelt, amelyben Lüne elkészített szérumhígításokat majd az oldathoz 0,5 ml 3% -os szuszpenzió az eritrocita Diagnosticum.
A pozitív eredmény - a vörös vérsejtek kicsapódnak formájában „esernyő”.
A negatív eredmény - a vörös vérsejtek kicsapódnak formájában „gombok”.
11. táblázat
Drugs megelőzésére és kezelésére a kolera
Kérdések az önuralmat:
Adjon taxonómia (család, nemzetség, faj) kolera.
Melyek a morfológiai, színező és kulturális tulajdonságait Vibrio cholerae?
Biokémiai tulajdonságai kolera. Mi az a „hármas Heiberg”?
Hogy mi alapján szétválasztása V.cholerae szerovariánst?
Vizsgálatok különbségek biovars V.cholerae.
Mi toxinok képezik Vibrio cholerae?
Források és módszerek a kolera fertőzés.
Milyen szabályokat kell betartani, ha figyelembe, küldésére és vizsgálati anyag a feltételezett kolera?
Lehetséges, hogy végezzen kutatásokat a kolera a szokásos laboratóriumokban. Ha nem, miért nem?
Eltérések a Vibrio cholera, Vibrio cholera.
Mik az alkalmazott gyógyszerek különleges megelőzésére és kezelésére a kolera.
7. lecke
Utolsó ülésén a szakaszon: a „mikrobiológiai diagnózis bélfertőzés”
Cél: az irányítást diákok ismereteire a teszt kidolgozása a részleg szintű osztályok 1-2.
8. lecke
Tárgy: mikrobiológiai diagnózis staphylococcus fertőzések. Bakteriológiai kutatás genny (Tanulmány 1. nap)
Célkitűzés: 1.Izuchit módszerek mikrobiológiai diagnózis staphylococcus fertőzések.
2.Oznakomitsya specifikus módszerek a megelőzés és a staphylococcus-fertőzések kezelésére.
Között számos gömb baktériumok széles körben elterjedt a természetben, csak néhány emberi kórokozók. Gyulladásos folyamatok által okozott ezek a mikroorganizmusok általában együtt képződése genny, miáltal ezek az úgynevezett gennyes vagy gennyes coccusok.
Staphylococcusok (Staphylococcus) - kerek coccusok, található a tenyészet formájában halmok emlékeztető szőlőfürtök, és patológiai anyagot - a formájában a kis klaszterek néhány coccusok; mozdulatlanul spórák nem, nem képeznek kapszulák, Gram-pozitív.
Közül nem képező spórák baktériumok, Staphylococcus leginkább ellenáll a különböző fizikai és kémiai faktorok. Ezek fakultatív anaerob, de jobban kidolgozott aerob körülmények között. Vegyületek jelentős kémiai aktivitást, több lebomlott szénhidrátok folyósítja el a zselatint. Diagnosztikai értéket képes fermentálni glukóz és mannitol, anaerob körülmények között. A felszínen a szilárd tápközegek formájában körkörös, konvex, pigmentált (aranysárga, halványsárga, citromsárga, fehér) telepek sima élek; folyékony közegben, így egységes turbiditás. A laboratóriumok staphylococcusok képesség szaporodásra tartalmazó tápközegben nagy mennyiségű (6-10%) nátrium-klorid. Ilyen környezetben, más baktériumok nem nőnek, ami a sós környezetben vannak választható a staphylococcusok. A nemzetség Staphylococcus tartalmazza a 19 faj, amelyek közül csak három környezetileg társított az emberi test: S-aureus - Staphylococcus aureus, S. epidermidis - Staphylococcus epidermidis és S. saprophyticus - Staphylococcus saprophyticus. Betegség jellemző különféle klinikai megnyilvánulásai, okozhat arany, epidermális kevesebb, és még ritkábban szaprofita staphylococcusok.
A káros hatást a sejtekre, és humán szöveti nyújtanak staphylococcus toxinok és enzimek.
Staphylococcus aureus egy számot a toxinok, különösen Leukocidin, amely egy pusztító hatású a leukocitákra. Hemolizinrésze oldódási hatása a vörös vérsejtek.
Előfordulása staphylococcus ételmérgezés kapcsolódó tevékenység jellege az enterotoxinok. Staphylococcus aureus által termelt. Patogenézisében staphylococcus fertőzések fontos szerepet játszanak exoenzymes:
- plazmokoogulaza végez alvadási plazmában;
- hialuronidáz elősegíti sztafilokokkuszok szövetekben;
- Lecitináz elpusztítja lecitin, egy része a sejtmembrán, okoz leukopenia;
- fibrinolizin feloldja a fibrin korlátozó helyi gyulladásos fókusz, hozzájárulva ezzel a általánosítása a kóros folyamatot.
Staphylococcus elterjedt a környezetben - a levegő. a port és hasonlókat. d. Az emberben, ezek mindig a bőrön, valamint kommunikál a külső üregeket (orális és nazális) ártalmatlannak lakos. Amennyiben bármilyen szabálytalanság a teljes organizmus vagy sérülés a bőr és a nyálkahártyák staphylococcus hatással lehet bármely szerv és minden szövetet.
önálló munka
Legyen a szöveg irányát genny bakteriológiai laboratóriumban.
Ábra mikrobiológiai vizsgálata gennyes váladék, vér.
1 napos vizsgálat genny krónikus gyulladásos betegségek:
a) elkészíti a kenet Gram-festés, promikroskopirovat;
b) hogy a kultúra a VSA környezetben vagy vér agar módszer a stroke;
c) UIRS „meghatározása staphylococcus kocsi a diákok.” Vegyük az anyagot a nyálkahártya az orr és a torok egymástól egy steril gyapot tamponnal, és növénytermesztésére egy Petri-csészébe a VSA vagy vér agar lemezeken.
g) rögzíteni a jegyzőkönyvben a tanulmány (1. nap)
5. reakcióvázlat A mikrobiológiai vizsgálat staphylococcus
vér szepszis
genny, váladék, köpet, nyálka a száj, az orr, és mások.
Kenet, festés kristálymagokkal
Gram a VSA véresagar vetés cukor húsleves
1. lépés válasz
A természet és a hemolízis