Módszerek bakteriológiai vizsgálat
Lehetőségei a bakteriológiai vizsgálatok szembetegségek korlátozott külső hozzáférést a kóros hangsúly. Amikor elhelyezzük azt a hátsó szegmensében a szem anyagot kapjunk kutatási gyakran nagyon nehéz, és a lehetőséget, bakteriológiai diagnózis ilyen esetekben természetesen kizárt. A fő alkalmazási bakteriológiai diagnosztika szemészeti gyakorlatban - a külső kártya szembetegség, és átható sérülések, amelyben egy anyag vizsgálat során nyerhetjük debridement vagy eltávolítása egy idegen test. Általában meg kell jegyezni, hogy a műtét során a változatos lehetőségeket megszerzésének bakteriológiai anyag kitágul jelentősen.
Beszerzése anyag kutatási
Az anyag a kötőhártyazsákjába platina hurok (ennek hiányában lehet használni egy hurkot készült fonal spirális elektromos vagy más eszközzel (üvegbottal, spatulával, és a hasonlók. P.), amelyet előzőleg sterilizált kalcinálással alkoholban láng. Húzása az alsó szemhéj , lehűtjük hurok Capture dudor conjunctiva kisülési aljáról az alsó Arch. szükség van, hogy ne érjen a hurok a bőrt és a széleit a szemhéj, hogy ne hozza anyag idegen mikroflóra y. Vegyük az anyagot előnyösen a kezelés előtt, és a reggel, ha a kisülés sokkal nagyobb. hiányában a nyálka és genny (például, a tanulmány az egészséges kötőhártya előtt műveletek) kell használni könnyfolyadékkal, vagy kissé kaparja a felület a kapcsolási héj (Lindner). De jobb ilyen esetekben alkalmazzák a technikát Elynniga: hagyja a kötőhártyazsákba egy Pasteur-pipettával, egy csepp steril sóoldatot vagy húsleves, és kiszívja a csepp néhány másodperc.
Ugyanazzal az általános szabályokat kapott anyagot a lacrimal SAC, kiszorítása annak tartalmát, és a szélén a század fekélyes blepharitis, hogy először eltávolítjuk a kéreg fekélyek.
Nagy gondot kell fordítani a befogása anyagot a szaruhártyát, különösen akkor, ha kúszik szaruhártya fekélyek. Hurok (vagy más tompa eszköz) kell irányítani, ferdén a fekély felületét, és megteszi anyag halad a szélei. Ebben a szükségességét érzéstelenítés (3 csepp 1% tetrakain) és rögzítő a szemgolyó.
Mint anyag a tanulmányok áthatoló sebek a szem lehet használni sérülést kisülési (ha van ilyen), elfog gézzel vagy egy hurok, punctata elülső kamrába, vagy a kivont idegen test van elhelyezve egy steril kémcsőbe 1-2 ml sóoldattal. Összerázás után a kémcsövet oldatot alkalmazzuk a vizsgálatban.
Az elülső kamra anyag vizsgálat nyerhető vágószerszám során paracentézis vagy punkció. Miután érzéstelenítés a szaruhártya (3 csepp 1% tetrakain oldat) és rögzítő szemgolyó limbus injektált ferdén a fecskendő tű van, akkor beadható az elülső kamrába (vigyázva, hogy ne sértse a szivárványhártya és a szemlencse kapszulában!) És 0,3 ml leszívtuk tartalmát az elülső csarnokban.
Amikor endophthalmitis lehet szedni kell egy üvegszerű anyagból készült. Needling szemgolyó végzett érzéstelenítés után (1 ml 2% novocain oldathoz a kötőhártyán) akut és kellően széles lument tűszúrás közelebb az egyenlítő. Szívatással 0,3-0,5 ml intraokuláris tartalmát.
Az így kapott anyagot ezután vizsgáltuk, hogy azonosítsa a mikroba, és hogy meghatározza annak típusát (mikrobiológiai diagnózis). Az anyag lehet tanulmányozni:
- a dián (bacterioscopic módszer);
- a növények (megfelelő bakteriológiai módszer);
- Állatkísérletekben (biológiai módszer).
bacterioscopic módszer
Ezt fel lehet használni bármilyen körülmények között a szem kórház jelenlétében egy egyszerű laboratóriumi berendezések és bizonyos vegyi anyagok.
Ehhez meg kell adnunk a következő:
- fém hurok;
- Tiszta üveg tárgylemezeket (üveg tiszta víz cseppecske szétterjed, és nem veszi gömb alakú);
- egy tálcát tartókkal csúszdák (üveg rudak vagy vastag rézdrót);
- desztillált vízzel;
- alkohol;
- csipesszel
- szűrőpapíron
- Lugol-oldat (1 g jódot, 2 g kálium-jodid, 300 ml desztillált vízben);
- oldatok színezékek (előnyösen lombikokban, gumidugóval pipetták patron).
Tisztítás céljából az új ablak forraljuk egy 1% -os nátrium-bikarbonát-oldattal (hamu is használható), majd vízzel mossuk, híg sósavval, majd ismét vízzel. A szemüveg voltak használatban, helyezzük 1-2 órán át kénsav, majd melegítjük a nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel mossuk, és merítjük 96 ° alkohol. üveg boltban vagy az alkohol, vagy alkoholos törlő, száraz, a bankok lezárjuk.
A leggyakrabban használt festék: Ziehl-oldatban (1 g bázikus fukszin, kristály 5 g karbolsavat, alkoholt 96 ° 10 ml glicerint - néhány csepp desztillált vizet, 100 ml). Egy bíbor színező Tsilya általában desztillált vízzel hígítjuk 10-szer (hígított, vizes vagy bíbor). Metilénkék (10 g metilén-kék, az alkohol 96 ° 100 ml). Ezt alkalmazzák a lúgos kékre futtatás Leffler (alkohol előállítása 30 ml metilén-kék, 1% kálium-vagy nátrium-hidroxid-oldat 1 ml, desztillált vizet 100 ml). Karbololaj genciániboíyával (előállított ugyanaz, mint a Ziehl-oldat).
A mikrobák tanulmányozott akár in vivo formában (módszerek „összenyomódott” és a „lógó” csepp) vagy elpusztult (foltos előkészületben). A tanulmány formájában élő elsősorban azonosítja mikrobák képesek aktívan mozog, míg a festett gyógyszerek megismerjék morfológiai.
Vannak egyszerű módja festés, ha egy festék általánosan használt és bonyolult festési eljárások, amelyek azonosítják az egyes jellemzői a fizikai és kémiai szerkezete mikrobiális sejtek, és így differenciális diagnosztikai értékét.
Élelmiszer készítmények festett technika a következő. Az anyagot felvisszük egy tiszta üveg tárgylemezre, és egyenletesen oszlik meg a felületen a formájában a kör vagy ovális. Kenet legyen elég vékony. Jelenlétében sűrű genny először hozott egy üveg tárgylemezre egy csepp desztillált vizet, és keverjük az anyagot a cseppben. Kenet levegőn szárítjuk. Üveg szárított hatóanyag által hozott élek hüvelyk- és mutatóujja között, és rögzített felfelé mozduló ütemben hordozó révén tripla alkoholt égő lángja (határán a világos és sötét részei). Megfelelő rögzítés úgy érezte, egy enyhe égő érzés az ujjak. Fix kenet festék. Készítsünk több hatóanyagot, legalább két, melyek közül az egyik festett egyszerű módon (Leffler metilénkék, fuchsin hígítjuk Tsilya), egy másik - a Gram módszerrel.
A festést Leffler:
- egy kenetben helyezzük egy darab szűrőpapírra, és az oldatot öntöttünk Leffler metilénkék 3-5 percig;
- preparátumot desztillált vízzel mossuk és szárítjuk.
Gram-festés:
- egy kenetben elhelyezett egy darab szűrőpapírra, amely öntött genciániboíyával oldatot 1-2 percig;
- kondenzált festék, távolítsa el a papírt, és anélkül, hogy vízzel való mosás, öntött Ra lyugolevsky hatóanyag oldatot 1 percig; így blackens kenet;
- lyugolevsky dekantált oldatot, és a kenet színtelenítjük alkohollal (előnyösen merítjük a készítmény főzőpohárban egy alkohollal, amíg egy kisülési terminációs ibolya folyamok);
- vízzel alaposan mossuk;
- öntsük kenet hígítjuk fukszin 1-2 percig;
- kondenzált festék készítményt vízzel mossuk és szárítjuk.
Egy kényelmes módja a Gram Sineva módosításokat, amelyek felhasználását javasolták előfőzött darab szűrőpapírt tartalmazó oldatban áztatjuk a genciániboíyával és szárítjuk. Előre bevont a kenet 2-3 csepp vizet, majd tegye ezeket a darabokat a papír. Ezután a fent leírt eljárást.
Kenet mikroszkópos előállított merülő objektív. Abban színezés Leffler összes mikrobák festett kék; A Gram-festés - vagy kék-lila (Gram-pozitív baktériumok) vagy a piros (Gram-negatív baktériumok).
A korlátozott számú mikrobák bevont betegségek, a külső szem, és jellemző morfológiai jellemzői gyakran lehetővé teszik, hogy a helyes mikrobiológiai diagnózis már csupán egyetlen mikroszkópos vizsgálat.
bakteriológiai módszerrel
szükségessé válik olyan esetekben, amikor a tanulmány a kenet nem elegendő annak megállapításához, hogy milyen típusú mikroba vagy szükség van, hogy meghatározzuk az érzékenység izolált kórokozók antibiotikumokkal.
Hivatkozva részleteket a bakteriológiai módszer speciális mikrobiológiai, középpontjában itt csak az elvek ezt a módszert. Az első szakasz a munka csökken az elosztása bizonyos típusú mikrobák, t. E. tiszta tenyészetek kinyerése. Erre a célra, igénybe mechanikai szétkapcsoiást a szemcseképző anyag és a használata a média, a leginkább alkalmas a fejlesztési feltételezett patogének (szelekciós táptalajon). Való átoltással egyedi telepeket a tápközegen nőtt, a tiszta tenyészet kapunk, amelyet mikroszkóp alatt vizsgálnak (előkészíti kenetek), és újra szélesztettük egy differenciálisán diagnosztikai környezet biokémiai tulajdonságainak a vizsgálatára a kórokozó.
Nagy igény szemében a legtöbb patogén baktérium a tenyésztés körülményei között vezetett azok preferenciális alkalmazása választható táptalajon tartalmazó natív fehérje. Példák Elshniga közegben (egy része lószérummal vagy aszcitesz folyadékot, és a két rész a húsleves), hengerelt szérum Leffler (három rész savó és az egyik része a táptalaj 1% peptont, 0,5% nátrium-kloridot és 1% szőlőcukor) a vér agar Leventhal- (agar és 5-10% defibrinált vérben).
Ami érzékenységének meghatározására baktériumok antibiotikumokkal, a legegyszerűbb módszer az ilyen meghatározás a használata speciálisan gyártott kereskedelemben lemezek szűrőpapír, oldataival impregnált antibiotikumok és vákuumban szárítjuk. Anyaga a tanulmány (genny. Punctata extraháljuk idegen test) helyezünk egy steril csőbe sóoldattal (1,5-2 ml). Összerázás után a folyadékot kiöntik egy Petri-csészébe, hogy a legjobb két - az egyik a cukorbetegség, más véres agar - és ringató egyenletesen oszlik meg az a táptalaj felületén. Ezután, az agar-agar felületén egymásra helyezett lemezek különböző antibiotikumok a parttól 2 cm-re egymástól, és a szélén a csészéket. A lemezeket termosztátba helyezzük (37 °), és a következő nap legnagyobb növekedési gátlási zóna a lemez körül ítélik a fogékonyságot mutat a mikroba vizsgálandó antibiotikumokat. A növekedés hiánya gátlási zóna jelzi a mikroba érzéketlenség az antibiotikum.
A biológiai módszerrel
a szemészeti gyakorlatban alkalmazható csak azokban az esetekben, amikor diagnózis toxikus korlátozott tulajdonság lehet meghatározó a típusú mikroba (például, a differenciál diagnosztikájában diftéria Bacillus Bacillus és xerosis).
Laboratóriumi diagnosztikája vírusos betegségek szemek
Jelenleg egy speciális tanulmányt vírus, többek között a vírus trachoma (ábra. 77), végzi tenyésztve szövettenyészetekben (csirke embrionális ascites carcinoma egerekben és mások.) És elektronmikroszkópos.
Ábra. 77. A sejt kapcsolás trachoma.
A klinikai gyakorlatban a diagnózis a trachoma, a módszer a citológiai tanulmányozása kötőhártya kaparékok a jelenléte vagy hiánya a sejtek (befogadás) prowazeki-Galbershtedtera. Erre a célra a tompa szélén egy szikével vagy a dia kaparni kötőhártya epiteliális fedelet (vér nélkül), amelyet alkalmazni egy vékony réteg a tárgylemezre 5 percig, levegőn megszárítottuk, és rögzített bemártással 15-20 percig egy főzőpohárban metil-alkohollal vagy egy keverék Nikiforov ( etil-éter és abszolút alkohol egyenlő mennyiségben). Színező termék több mint 3-4 óra oldatot frissen készített festék Romanowsky-Giemsa (az arány egy csepp tinta per 1 ml desztillált víz). A készítményt ezután mossuk folyó víz, levegőn megszárítottuk, és mikroszkóp alatt vizsgáltuk. Ugyanakkor a mag a hámsejtek festett rózsaszín, a protoplazma - világoskék, a befogadás - kék, kék-ibolya színű (77. ábra). Legutóbbi képviseletében a coccoid szervezetek között található finomszemcsés tömeg, és elismerték trachomatous vírushordozó. Ezek gyakran a friss, kezeletlen esetekben trachoma, de azt is megtalálható paratrahomnyh kötőhártya-gyulladás.
Tanulmányok az utóbbi években azonosítottak egy új formája fertőző vírusos betegség a szem - egy járvány szaru- és citológiai vizsgálat a kötőhártya kaparékok e betegség kiderült, a hámsejtek az eredeti felvétele egészen más Prsvacheka sejtek (BL Polyák NV Ploshinskaya).