Az agglutináció - studopediya
DIRECT - közvetlenül anélkül, hogy bármi, minden további nélkül linkeket.
Közvetve - más sejtek, nem közvetlenül.
CSÖKKENTÉSÉRE ≠ INCREASE (sejt aktivitás).
Levágták - nem fogadja el, elutasítja. A test szakadt az átültetett szervet.
Immunválasz - válaszul a specifikus kölcsönhatás (kötődés) egy antigén és egy antitest vagy antigén, és az érzékenyített T-limfociták.
Ezek a reakciók zajlanak in vitro (in vitro) és in vivo (in vivo).
szérumot (szérum) részt vesz ezekben a reakciókban, így az úgynevezett szerológiai.
Immunválaszok használt diagnosztizálására fertőző betegségek. Ebben az esetben az ismeretlen komponenst határozzuk meg az ismert komponens, amely alapul a sajátosságait az antigén-antitest kölcsönhatás. Ha tudja, hogy az ellenanyag. lehet felismerni (megtalálni), az ismeretlen antigén. Ha egy ismert antigént. akkor lehet kimutatni az ismeretlen antitest.
Így, az immunválasz használjuk:
1) a szerológiai diagnózis (szerodiagnosztizálására) betegségek - a betegek szérumában antitestek detektálására specifikus humán patogén fertőzés (ismert antigén); , Pontosan ez a kórokozó és okozta ezt a fertőzést, ha a vérszérumban a humán páciens antitestek vannak jelen, hogy olyan kórokozó;
2) a szerológiai azonosítás (seroidentifikatsii) mikrobák - létrehozni a faj a kórokozót útján diagnosztikai immunszérumok (ismert antitestek); ha az antitestek kötődnek a kórokozó izolálható egy beteg, ez a mikroba megegyezik előállítására immunizált állatok diagnosztikai immun szérumot.
Immunreakciók fordulnak elő két fázisban:
1) specifikus fázis - hatóanyag kötőhelyet a antigénnel determináns csoportot alkotnak antigén-antitest komplexek; Ez a fázis gyorsan bekövetkezik, de nincs látható hatása;
2) a nem-specifikus fázis - megjelenése látható hatása kölcsönhatását antigén és antitest - csapadék (agglutináció) vagy zavarosság (csapadék), amely lehetővé teszi, hogy az antigén-antitest komplexek és a következtetés, hogy az antigén és az ellenanyag egymás.
Immunreakciók által közé agglutinációs (PA), a reakció a csapadék (RP), komplement fixációs (RSK).
Az agglutináció - egy ragasztás, és a kicsapást a mikrobiális vagy más sejteket (RBC) antitestek által az egy elektrolit jelenlétében. A látható hatása a reakció (agglutináció jelenség) - a csapadék képződik, amely az úgynevezett agglutinálódnak.
Ezt a reakciót alkalmazzuk a szerodiagnosztizálására és seroidentifikatsii. RA használják szerodiagnosztizálására (ellenanyagok kimutatására a betegek szérumában) tífusz és paratífusz (Widal reakció), brucellózis (Wright reakció), nyúlpestis és leptospirosis. RA használják seroidentifikatsii (típusának meghatározását a kórokozó izolálhatjuk egy beteg) a bélfertőzések, pertussis, kolera és mások.
1. Az antigén (agglutinogén) - ez az egész (nem elpusztult) mikrobiális vagy más sejtek (korpuszkuláris oldhatatlan antigén.). Agglyutinogeny - egy felfüggesztése élő vagy elölt mikroorganizmus sejteket vagy más bármilyen sejtek. Az antigének lehetnek ismert és ismeretlen. Ismeretlen agglutinogénjével - mikrobiális tenyészetből izoláltak a páciens testében, amely a meghatározandó. Ismert antigént - diagnosztikum - Diagnosztikai készítmény - szuszpenzió elölt mikrobiális fajok ismert sóoldatban. Ezt a zagyot zavaros (opálos), mint mikrobiális sejtek nem oldódnak, és sértetlen marad. Ismert agglutinogénjével fogják használni az érzékelés szérum antitestek ismeretlen betegeknél.
2. Az antitest (agglutinin) - van a vérszérumban. Az antitestek is mind ismeretlen és ismert. Ismeretlen antitestet kell meghatározni, a vér szérum egy humán beteg. Ismert ellenanyagok diagnosztikai immunszérumok. úgynevezett agglutináló sera. Hozzá vannak szokva a seroidentifikatsii, azaz annak meghatározására, ismeretlen antigén - típusú mikroorganizmus tenyészetből.
3. Elektrolit - 0,9% -os nátrium-klorid-oldattal.
Termesztenek a ferde agaron növesztett a kórokozó tiszta formában fajok (például, kórokozója tífusz) mosás 4,3 ml izotóniás oldatban, egy steril injekciós bármilyen módon mikrobák elpusztítására (például forró, és vastagságának meghatározásához (hogy 3 milliárd. A mikroorganizmus sejteket 1 ml). amikor a mikrobiális sejteket elpusztítják hőt, olvadó O-diagnosztikum (O-antigén), ha kezelik formalinnal, a kapott N-diagnosztikum (H-antigén).
Példák diagnosztikai készleteket. Salmonella diagnosztikai készlet, diagnosztikai készlet brucellózis, tularemia diagnosztikai készlet.
Előállítása szérumok összeragadt.
Az állatokat (általában nyúl) 5-7 alkalommal időközönként parenterálisan növekvő dózisokban mikrobiális diagnosticums (hiperimmunizálás végezzük). majd vitték vérszérum, amely antitestek a mikrobák, amely előállítható egy diagnosztikum. Ha a immunizálás hajtjuk O-diagnosztikum, a készített O-szérum agglutinációs (tartalmazó O antitest), ha H diagnosztikum - H-agglutináló szérummal.
Az agglutináció sera lehet natív vagy nem adszorbeált és az adszorbeált.
A nem adszorbeált szérumok tartalmaznak olyan antitesteket csoportosítható több közeli rokon mikrobák.
Az adszorbeált szérumot tartalmaz antitesteket egy vagy több antigént az egyik típusú mikroba. Ha a szérum antitesteket tartalmaz, hogy egyetlen antigén, ezek az úgynevezett monoretseptornymi vagy egyértékű, ha több antigén - csoport adszorbeált szérumokban.
Példák agglutináció szérumok: Salmonella monoretseptornaya H-agglutináló szérum adszorbeált Salmonella-csoport O-agglutináló szérum Kolera O-agglutináló szérumot és mások.
Agglutináló szérum titer - a legnagyobb szérum hígítás, melyen agglutináció észlelte az antigén (titer függ antitestek mennyiségét a vérben: a több ellenanyag, a magasabb szérum titer).
Módszerek RA beállítást.
1. Becsült (lemez) PA - végzett az üvegen. Alkalmazott tárgylemezre 2 csepp szérumot és 1 csepp oldat izotóniás. Az egyik a szérum és beesik a csepp hurok izotóniássá tesszük, mikrobiális tenyészetekben és összekeverjük. Egy csepp izotóniás mikrobák - antigén kontroll. egy csepp szérumot csíra - antitest kontroll. egy csepp szérumot mikrobák - tapasztalat. Ha a szérum antitesteket tartalmaz a mikrobiális antigének összekeverjük vele, az antitestek és antigének specifikusan kötődnek egymáshoz, majd 1 - 3 perc A kísérleti cseppecske agglutinálódnak pelyhek. antigén kontroll kell legyen zavaros és antitest kontroll - átlátszó. Számviteli reakciót eredmények által végzett megjelenése agglutinátum pelyhek. Ha a pelyhek esik - a reakció pozitív, vagyis az, Antitest és antigén megfelel az antigén-antitest lehet meghatározni, vagy fordítva. Ha elmosódott - negatív reakciót.
2. Expanded agglutinációs teszt - végzett kémcsövekben. Kezdetben készítsen 2-hkratnye tenyésztés beteg humán szérum 1:50 és 1: 1600. A 6 cső öntjük 1 ml izotóniás nátrium-klorid oldat. Az első cső készült 1 ml beteg szérum hígításban 1:50 keverjük, így 1: 100 hígításban, majd 1 ml-es hígítás 1: 100 átvisszük egy második kémcsőbe, és előkészített hígítás 1: 200, stb Két cső maradt a kontroll antigénnel és a szérum. A szérum kontrollok adunk csak szérummal 1:50 hígítást a antigénnel kontroll - csak az antigént. Során az összes többi vizsgálati csöveket hozzáadunk 0,1 ml antigén - diagnosztikum (O- vagy H) és tegye az összes csövek termosztátban 37 ° C-on 18-20 órán át. Elszámolása a reakciót eredményeket a jellege, mennyisége, a keletkezett csapadékot (agglutinálódnak) és a zavarosságot. Számviteli végezzük csak az alábbi eredmények a kontroll: kontroll szérum - átlátszó, antigén kontroll - sáros. Mintegy antitestek így finomszemcsés üledék. H-antitest - durva. A legfrissebb kémcsőbe, amely még mindig látható agglutináció, állítsa diagnosztikai titer.
Amikor szerodiagnosztizálására betegségek fontos, hogy ne csak érzékeli specifikus antitestek egy adott kórokozó, hanem, hogy felfedje a szám, azaz a létre titer antitestek tyúk, akkor lehet beszélni a betegség jelenlétét a kórokozó által kiváltott. Ezt nevezik a diagnosztikai titer és titer. Például, a diagnózis a tífusz kell antitestek azonosítására titer - 1: 400, de nem kevesebb. Pontosabb eredményeket kapunk, feltárva a növekvő antitestek párosított szérum mintákban. A szérumot a beteg vett kezdete és után 3 - 5 vagy több napon keresztül. Ha az antitest titer emelkedése nem kevesebb, mint 4-szer, így beszélhetünk az aktuális betegség.
Ha agglutinációs reakció telepített tenni seroidentifikatsii, használja agglutinációs diagnosztikai titer vagy hígított, hogy a fele a cím. RA pozitívnak tekintjük, ha agglutináció érzékel hígításban közelében-diagnosztikai szérum titer.