agglutináció, a fajta, amelyben módszerek alkalmazása
Az agglutináció (PA) - és kötést úgy, hogy kicsapjuk a mikrobiális vagy más sejtek hatására antitestek jelenlétében egy elektrolit. A kapott csapadékot nevezett agglutinációk.
1. Az ellenanyagok kimutatásához a szérumban a beteg (szerodiagnosztizálására).
2. Annak megállapítására, hogy milyen szerovariáns és izolált egy betegtől tiszta tenyészetét patogének (szerotipizálás).
Agglutinációs reakciót a használt antitestek detektálására a betegek szérumában, mint például a tífusz és paratífusz (Widal reakció), brucellózis (reakció Wright Heddlsona), tularemia, leptospirosis, és más fertőző betegségek, valamint meghatározásának kibocsátott a beteg gerjesztő (bél fertőzés , pertusszisz és mtsai.). RA használják meghatározzuk a vér csoportok, Rh - Factor et al.
A reakciót az alábbi összetevők szükségesek:
1. Az antigén (agglutinogén) kell lennie korpuszkuláris, hogy egy szuszpenzió élő vagy elölt mikroorganizmus (diagnosztika m), vörösvértestek vagy más sejtek. Tipikusan használt egy éjszakán át tenyésztett mikroorganizmusok növesztett ferde agaron. A tenyészetet öblítettük 3-4 ml izotóniás oldatban, átvisszük egy steril csőbe, a sűrűség meghatározására. A szuszpenziót le kell homogén, és tartalmazhat legfeljebb 3 milliárd. A mikroorganizmus sejteket per 1 ml. Használata megölt felfüggesztések mikrobák - diagnosztika - könnyebb dolgozni (felkészülés a munkahelyen).
2. Antitestek (agglutinin) vannak a beteg szérumában (az szerodiagnosztizálására) vagy agglutináló szérum (szerotipizálásához). Agglutináló szérumot kapott nyulak immunizálása elölt baktériumok.
Agglutináló szérum titer a legnagyobb annak tenyésztési amelyben reagálni a megfelelő antigénnel bizonyos kísérleti körülmények között.
Az agglutináció sera lehet natív (nem adszorbeált) és az adszorbeált. Natív szérumhígításokat kis Interact nemcsak a fajta mikroorganizmusok, amelyek immunizált állat szerezni szérumot, de rokon faj mikroorganizmusok, azaz. K. csoport antitest (antitestek mikroorganizmusok, amelyeknek egy közös antigének) jelen abban. Natív használt savó a kihajtott agglutinációs (a szerodiagnosztizálására), amely figyelembe veszi nem csak a jelenléte a reakciót, hanem a dinamikája antitest-titer megnövekedését.
Ha a natív tejsavó kivonat (adszorbanciájával) csoport reakciójával antitesteket rokon baktériumok csoport, amely antigének adszorbeált szérum kapunk. Az adszorbeált tejsavó lehet monoretseptornymi (vagy típus-specifikus) antitest, amely csak egy antigén receptor polivalens szérummal keverékeiből állnak több adszorbeált vagy nem adszorbeált szérumokban. Az adszorbeált alkalmazott szérumot a agglutinációs reakciót az üveg.
Az állatok immunizálását baktériumok mozgó H antigén kapott H-agglutináló tartalmazó szérum antitest H (például H-salmonelloznaya monoretseptornaya agglutináló szérum). O-immunizálás antigén előállított O-szérum agglutinációs tartalmazó O antitesteket (pl, adszorbeált salmonelloznaya csoport O-agglutináló szérum Kolera O-agglutináló szérum). Immunizálása H és O-antigének termelt szérum H és O bispecifikus antitestek.
És az O-agtlyutininy így finom agglutinálják és H agglutinineket - krupnohlopchaty üledék.
3. Elektrolit - izotóniás nátrium-klorid (0,9%, elő desztillált vízben nátrium-klorid oldattal).
Két alapvető módszer beállítására agglutinációs reakció: ebben a reakcióban az üveg (néha nevezik becsült vagy lemez), és telepített reakciót (kémcsövekben)
Formálási agglutinációs reakciót az üveg. A fölözött tárgylemez alkalmazott két csepp szérumot és egy csepp izotóniás nátrium-klorid oldat. Diagnosztikai agglutináló vett vérszérum egy hígítási, amely attól függően, a titer 1:10, 1:25, 1:50 vagy 1: 100. Egy csepp szérumot és egy csepp a hurok készült izotóniás oldat kultúra a teszt-mikroorganizmus és alaposan összekeverjük. Egy csepp nátrium-klorid mikroorganizmusokkal - kontroll antigénnel, egy csepp mikroorganizmusok szérum nélkül - szérum kontroll. Ne végezzen a tenyészetet szérum csepp egy csepp nátrium-klorid. A reakció szobahőmérsékleten 1-3 percig. Amennyiben a szérum kontroll átlátszó marad az antigén kontroll megfigyelt egységes opacitású, és dobja, ahol a kultúra a szérumalbuminnal kevert agglutinálja pelyhek jelennek meg, az eredményt pozitívnak tekintik. Ha egy csepp szérumot és antigén A egységes turbiditás, az negatív. A reakció jól látható a sötét háttér előtt.
1. antigén kontroll
2. A szérum kontroll