agglutináció
Az agglutináció - egy ragasztás, és a kicsapást mikrobák vagy más sejtek hatására antitestek jelenlétében egy elektrolit (nátrium-klorid izotóniás oldat). Csoportok ragasztott baktériumok (sejtek) nevezzük agglutinálódnak. A következő összetevők szükségesek agglutinációs reakció:
1. Antitestek (agglutinin), amely található a beteg szérumában vagy az immun állat.
2. Az antigén - felfüggesztése élő vagy elölt baktériumok, vörösvértestek vagy más sejtek.
3. Egy izotóniás (0,9%) nátrium-klorid oldattal.
Az agglutinációs reakciót alkalmazzuk szerodiagnosztizálására a tífusz és paratífusz (Widal reakció) brucellózis (Heddlsona Wright reakció), nyúlpestis, stb Antitest ebben az esetben a beteg szérum és az antigén ismert mikroba. Amikor azonosítására mikrobák vagy más sejt-antigént szolgál annak felfüggesztése és antitest - ismert immun szérum. Ez a reakció széles körben használják diagnosztizálására bélfertőzések, pertussis, stb ..
Módszerek RA beállítás
Becsült RA üveg
Kiterített üvegen RA (seroidentifikatsiya)
Agglutinációs teszt üvegen. A fölözött tárgylemez alkalmazott két csepp specifikus (adszorbeált) szérum és egy csepp izotóniás nátrium-klorid oldat. A nem adszorbeált szérum pre-hígítottunk 1: 5 - 1: 100. Csepp a pohár úgy kell alkalmazni, hogy van egy bizonyos távolság közöttük. A tenyészetet pipettázzuk vagy hurkos eldörzsöljük az üvegen, majd bevezetjük egy csepp izotóniás nátrium-klorid-oldattal, és egy csepp szérumot, minden keverjük, amíg homogén szuszpenziót. Egy csepp szérumot, amely nem került a kultúra szérum kontroll.
Figyelem! Ne végezzen a kultúra egy csepp szérumot izotóniás nátrium-klorid-oldat, amely az antigén kontroll. A reakció szobahőmérsékleten 1-3 percig. Amennyiben a szérum kontroll transzparens marad a kontroll antigénnel egységes turbiditás figyelhető meg, és a cseppek, ahol a tenyészetet a szérumalbuminnal kevert agglutinálja pelyhek jelennek meg a háttérben egy átlátszó folyadék, az eredmény tekinthetők pozitív reakciót.
szérum tenyésztő oldatot + + Culture
agglutinációs (volumetrikus módszer) Kiterített reakciót. Készítsünk egymást követő, gyakran két-szeres hígított szérummal. A módszer az úgynevezett térhatású. Ahhoz, hogy meghatározzuk a titerét szérum antitestek csövek 6 megteszi. Az első öntsünk csövet 1 ml 1:50 hígítású szérum és mind a 6 csövek töltse beosztott pipetta 1 ml fiziológiás sóoldatban. Az első csövet kapjunk szérum 1: 100 hígításban 2 ml térfogatú. Től 1 ml az első csövet a második cső betét, ahol hígítási válik 1: 200. Tehát nem a számát sorozathígításaival szérumok az első 5 csövek (1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1600). Az ötödik cső 1ml öntsük fertőtlenítő oldat. Minden 6 csövekben adjunk 2 csepp diagnosztikai kit. A hatodik ampulla szabályozása kultúra, mert tartalmaz csak sóoldatot és diagnosztikai kit.
Az ilyen szabályozás szükséges annak érdekében, hogy elkerüljük a spontán agglutináció kultúra. A csöveket összeráztuk, és helyezzük termosztátban 37 ° C-on 2 órán át, majd hagyjuk szobahőmérsékleten állni egy éjszakán át, majd számviteli eredményeket agglutinációs reakció. Beállításakor agglutinációs szérumával gyermekek az első hónapban az élet miatt funkcionális hiánya antitest azonosításához szükséges alacsonyabb antitest titereket kaptunk, amely tartalmazza a hígított szérummal. A kezdeti szérum hígítási vesz 01:25. Az első csövet készítünk 1:50 hígításban, majd 1: 100 stb
Ha a pozitív eredményt a kémcsőbe látható skleevshiesya sejtek formájában szemcsék vagy pelyhek a háttérben egy átlátszó folyadék. Agglutinálja fokozatosan lerakódik a fenékre „ernyő”, és a felülúszót átlátszóvá válik. Ellenőrző antigén egyenletesen zavaros.
A természet az üledék megkülönböztetni finom és durva (pehely) agglutináció. Finom szemcséjű agglutinációt használatakor kapott O-szérumok. Durva - reagáltatva ostoros motilis baktériumok H szérumok. Ez gyorsabb, finomszemcsés, kapott csapadékot nagyon laza és könnyen törik.
Az intenzitás a reakció a következőképpen fejezhető ki:
++++ minden sejtet állandó, a folyadék a cső teljesen átlátszó. Az eredmény élesen pozitív reakció;
+++ ülepedni kevesebb, nincs teljes megvilágosodás folyadék. Eredmény pozitív reakciót;
++ kicsapódni még kevésbé zavaros folyadék. Eredmény reakció megkérdőjelezhető;
alján a cső egy csekély üledék, zavaros folyadék. Kétes eredmény a reakció;
- nincs üledék, zavaros folyadék egyenletesen, mind a kontroll antigénnel. A negatív reakciók eredményeképpen