A gyógyszerkészítmény általános módszerei
A gyógyszerkészítmény általános módszerei
Paraffin szakaszok, zsírban oldódó festékekkel festve. A dehidratálás, fehérítés, öntés, viaszmentesítés és a vízbe történő átjuttatás során a szövetekből nem kimerült lipidek azonosítása érdekében a darabokat olyan környezetben kell elhelyezni, amelyben a zsírok és színezékek nem oldódnak fel. Ehhez elegendő a feleslegben lévő jód eltávolítása és a szakaszok gumi-szirupban, glikogélben, glicerin-zselatinban és így tovább.
Következtetés a gyantában.
A xilol megvilágosodása után a szokásos módszerekkel festett szeleteket rendszerint gyantákba zárják. Korábban a kanadai balsam vagy dammarovoi gyanta, a kondenzált cédrusolaj, euparale stb. Oldatát xilolban és kloroformban alkalmazták a szüléshez. A kanadai balzsamban a metszeteket hematoxilinnel vagy eozinnal történő festés után zárják le.
Anilin kék és savas fchsinnel festett szakaszok lezárására Curtis azt javasolta, hogy a szalicilsav balzsamot megsavanyítjuk. A xilol balsam-oldatának egy részét a szalicilsavval telített folyékony szirup konzisztenciájára hígítjuk, szűrőpapíron átszűrjük, és a törzsoldat azonos térfogatával összekeverjük. Ha az oldat túltelített, szalicilsav-kristályok gyakran előfordulnak a készítményekben.
Az összes fenti gyanta nem alkalmas a Romanovskii módszer szerint festett szakaszok lezárására, mivel a festék kék komponense fokozatosan elhalványul ebben a közegben.
A gyantákban és szirupokban a következtetést a következőképpen végezzük. Válasszon megfelelő méretű fedőlapokat fedett részekre, Oroszországban a méretek 18X18, 20X20, 24X24, 24X36, 24X76 mm stb.
A fedőüvegen egy cseppet helyezünk központilag, vagy ha az üveg hosszú, két csepp gyantaoldati oldat xilolban. A fedőlapot cseppenként fel kell helyezni a szűrőpapírra. Ha szakaszok következtetésre gyanta oldat xilol, bár lehetséges, hogy készítsen egy fedél üveg 6, de lép fagyasztott metszeteken, hogy jobban felkészüljenek szirup egy üveg. Az üveglapot eltávolítjuk a festett metszeteket xilol vagy víz (attól függően, hogy a vezetékek) mossuk, és tartsa lenyomva az ferdén vágott fedél üveg, hogy az egyik a hosszú vége érintett szűrőpapír közel a fedőlemez. Ezután a csúszógyertya finoman leereszkedik, amíg a nyírás egy csepp gyantaoldatot vagy szirupot nem érint a fedőlapon. A csepp terjed a fedőlap széleire. Ha egy fedőlemezzel esnek légbuborékok, azok eltávolíthatók óvatos megnyomásával a fedőlemez hegyével preparáló tűt vagy enyhén emelve egyik széle; néha könnyű hozzáadni a kátrányt vagy a szirupot. Ezután a felesleges gyantát lecsepegtetett, lenyomva tartja az üveglapon vágott szögben körülbelül 30 °, és a préselt hozzá fedőlemez, obsushivayut a széleit a szűrőpapír. Ezt követően a gyógyszereket egy lemezre helyezzük, és meleg helyen helyezzük el a szárítást.
Az élek a fedőlemez nem kell törölni pamut- vagy gézzel áztatott xilollal, mivel ez a rész a gyanta szét lehet osztani a tiszta felületre a fedőlemez. Szárítás, olyan szabálytalanságokat képez, amelyek zavarják a megfigyelést mikroszkóp alatt, és amelyekből nagyon nehéz megszabadulni.
Ha a metszeteket trikaprát-cellulózba helyezzük, akkor a felesleget a fedőüveg szélei körül kis kemény labdák formájában szándékoznak elszakítani, amelyek könnyen levághatók egy kis késsel vagy egy körmével eltávolíthatók.
A topográfiai tanulmányok, például az emlőmirigy, az agy agyféltekék, az emberi csontok stb., A vágás és a fedőüveg közötti nagy szakaszok lezárásakor a levegő a következtetés után gyakran felhalmozódik. Ennek elkerülése érdekében ajánlott koncentrált gyantatartalmú oldatokat használni, amelyeket a viszkozitás csökkentésére melegítenek. A polisztirolok nem alkalmasak erre a célra, mivel az oldatok viszonylag alacsony viszkozitásúak, viszonylag alacsony koncentrációban.
Kényelmesebbek a kanadai balsam, semleges észtergyanták és néhány ciklo-paraffin és terpén gyanta; szekciókat xilolban enyhén fűtött 60-80% -os oldatba lehet zárni.
A foltos befecskendezett készítmények hiányos vízhidratálásának eredményeképpen gyakran áttetsző vagy felhős zónák keletkeznek. A vágás ilyen szakaszában található mikroszkóp alatt számos vízcseppet találunk, a szín erősen elhalványul. Ahhoz, hogy megszüntesse ezt a, távolítsa el a fedőlemez, mossuk xilollal szintetikus gyanta vagy balzsam, vágott dehidratáljuk 100% -os alkohol, aceton vagy izopropil-alkohol, xilol világít keverékben egy dehidratálószerrel és 2-3 változások friss xilol és ismét arra következtetünk.
Ha a szín elszíneződött, a szakaszok újra megfesthetők. Ehhez a készítményt xilolban tartják (legfeljebb néhány óráig, amíg a fedő üveg elválik), majd 100% alkohollal és a megfelelő oldatokkal átmegy a szokásos módon.
Hasonlóképpen, ha a kutatónak csak egy festett szelet áll rendelkezésére, kívánatos lenne más módszerrel festeni. Szükség esetén az elsődleges színezék elszínezhető savanyított alkohollal; Ezután a metszeteket alaposan mossuk vízzel és új módszerrel festjük. Általában a hematoxilinnel festett szakaszok már korábban alkalmatlanok a vas-kálium-ferricianid reakciójával, mivel a vaslakk is reagál.
Ha két szelet egy blokkot szerelnek a csúszkára, néha csak egy szelet festek, a másik pedig a fedőlap alatt.
A nitrocellulóz-beágyazott szövetek szakaszai ragasztósíthatók a festék elszíneződéséhez vagy festés előtt vagy után. A szeleteket a tartályból egy tiszta csúszkából vettük és egyenesítettük; az üveget félig víz alá merítik, majd a kivágást szűrőpapírokkal alaposan elkenik.
Ha a vágás még nem színes, akkor éterpárral lehet feldolgozni; míg a nitrocellulóz lágyul és szorosan illeszkedik a csúszkához. Az is lehetséges, hogy elhagyjuk az üveg néhány másodpercig egy 0,5% -os nitrocellulóz éteres alkoholos törlővel száraz alsó felülete a tárgylemez és merítsük tömítésére a film kloroformban 5-10 percig. Ezután a metszeteket egymás után végzett keresztül 95 és 80% etil-alkohol a vízben (szöveti metszetekben rögzített folyadékok higany-klorid, az átvitel előtt a vízbe készült oldatához 0,5% jód oldattal 70% -os alkoholban 10-15 percig, majd 5% -os nátrium-tioszulfát-oldat 5-10 perc). A szeleteket közvetlenül a festékoldatba lehet átvinni, ha vizes alkohollal készül. Festés után a felesleges festéket mossák, ahogy ez a módszer szokásos.
A celloidin egyike a nitro-cellulóz, a salétromsav cellulóz-észterének. Lilly felhívja a cselloidint viszonylag alacsony moláris tömegű termékre, és a nitrocellulóz egy nagyobb viszkozitású termék, amelynek nagy molekulatömege van. A hazai laboratóriumok gyakorlatában gyakori az egyik kifejezés használata - a celloidin.
"Szabad" nitrocellulóz szakaszok.
Néhány kutató szívesebben celloidin és nitrocellulóz szakaszokat folt, mielőtt azokat diákra szereli. Ez különösen hasznos laboratóriumi vizsgálatokban, amikor egy blokkból nagy számú szekciót kell készíteni.
Ebben az esetben a szeleteket tároló 80% -os alkoholt azonnal átviszik a színezékek alkoholtartalmára, vagy korábban 70 és 50% alkohollal és vízzel. Ha a higanybevonatot el kell távolítani, a metszeteket 0,5% -os jódoldattal, 70% -os alkohollal, nátrium-tioszulfát-oldattal és vízzel végezzük. A szekciókat enyhén ívelt spatulával kell átvinni, ha szükséges, egy boncoló tűvel.
A nitrocellulóz szakaszok kiszáradása és megvastagodása.
Festés után a szabad szakaszokat víztelenítik, tisztítják, egymást követően ugyanazon oldatokon keresztül folyik, amelyeket a diákra ragasztott nitrocellulóz szakaszokra használnak. Az utóbbiakat ugyanúgy kezeljük, mint a paraffin szakaszok és a sejtonozott paraffin szakaszok.
A metszeteket megfestettük a legellenállóbb színezékek, dehidratáljuk 95% -os alkohollal, hogy megvilágítsa karbolfukszin xilolt Weigert [8], amely egy keverék, amely egy rész olvadt kristályos fenolt és három rész xilolt, öblítjük 2-4 változások xilol és depex, Permalta, kanadai balsam vagy más megfelelő gyanta, valamint paraffin szakaszok.
Nitrocellulóz elszíneződés szakaszokban.
Ha szükséges, egy színes alap anilin festékek elszíneződések nitrocellulóz egy 2% -os etanolos oldatban fenyőgyanta, majd dehidratáltuk és vágott világítanod a fent leírtak szerint, vagy az egyik az alábbiakban ismertetett módszerekkel.
A könnyen extrahálható festékekkel festett szakaszok megvilágítása.
A karbol-xilollal extrahált, az alapanilinnal festett szekciók Weigert [8] több xilolos eltolódást javasol; Mielőtt a szekciókat áthelyezi a következő oldószercserére, szűrőpapírral szárítjuk őket.
A zsírok azonosítására festett fagyasztott szakaszok tiszta tálcákon találhatók. A kivágás egyik szélét ezután egy részben víz alá süllyesztett üvegen tartjuk, amelyet óvatosan eltávolítunk, úgyhogy a vágás az üveg felületén van elhelyezve. A vágás lehajlik, és ismét vízbe merül. Néha a szeleteket szétszórjuk tűk segítségével, különösen akkor, ha szakadt vagy szabálytalan alakúak. A megnedvesített szeletet megszárítjuk, finom szűréssel selymes szűrőpapírral. A kivágást ezután megfelelő közegben, a fent leírt székletbe helyezzük. Az ideiglenes készítmények megkötéséhez használhat glicerint. A készítmények előállításához a hosszú távú tárolás, óvatosan podsushivaya találkozásánál diák és fedőlemezeket és azok oldatot okantovyvaya Kanada balzsam xilolban vagy toluolban, és a nitro-cellulóz-ragasztó. Záró szakasz egy kis csepp glicerint, amelyek nem érik el a menedéket a fedél üveg, hogy okantovyvaya szélén polisztirol nyerhető sokáig tárolt gyógyszerek.
Polisztirolból készült szegélyező készítmények.
A glicerin-zselatinban vagy az arlex zselatinban elkevert készítményeket 20% -os xilolos polisztirol-oldattal kötjük össze, amelyet egy üvegrúddal viszünk fel a fedőüveg szélei mentén. 1 óra múlva a gyógyszer szárazon megszárul és leáll, és más reggelhez más készítményekkel is fel lehet venni, anélkül, hogy félni fognak. Ezenkívül használhatunk xilol és cellulóz-kaprát keverékét is.
A római liliolingyantát a legmegfelelőbb eszközként ajánlják a vízben oldódó közegbe záródó szeletekhez. Előállításához 20 g vízmentes lanolint szárítunk, 15- 20 percig porceláncsészében keverés közben melegítjük. Ezután a keverés megállítása nélkül fokozatosan 80 g gyantát adunk hozzá, amíg tiszta, világosbarna folyadék keletkezik. A gyújtás elkerülése érdekében jobb, ha egy elektromos csempe zárt spirállal melegszik. A kapott elegyet kis csészékbe öntjük, majd megszilárduljuk. Erősen felhevült egy üvegpálca vagy egy fém spatula, egy kis lanolingumot különítenek el a segítségükkel, és rögzítik a fedőüveg sarkait. Ezután az üveg szélei nagy mennyiségű forró olvadt gyantával vannak kiképezve.
Állandó gyógyszerek előállítására általában gumiarábát vagy zselatint tartalmazó táptalajt használnak. Az arab gumiabroncs egy idő után száraz állapotban szárazon marad, és a zselatint használat előtt megolvasztják. Számos sikeresen használt közeg összetételét a táblázat tartalmazza.