Citológiai kenetek rögzítése
Száraz kenetek • A kenet elkészítése • A kenet szobahőmérsékleten történő szárítása (1 óra) • Rögzítés acetonnal (10 perc)
Nedves kenetek • A kenet elkészítése • Rögzítés etanolban (10-15 perc) Levegőszárítás
• A szövetek feldolgozásának módja az intravitális szerkezetének javítására
• Megvalósult a szövet speciális megoldások (fixálószerek)
• A fixáló anyag mennyiségét 20-30-szor nagyobbnak kell lennie, mint egy rögzítendő anyag térfogatát
• Egyszerű rögzítőanyagok: 10-20% formalin oldat, 96 º alkoholt, 100 (abszolút) alkoholt, 1-2% -os osmium-oldatot stb.
• Komplex reteszeket: alkohol - formalinos (alkohol 70º - 100 ml formalin és 2-5 ml.). Zenker folyadékot (maró hatású szublimátum - 5 g, nátrium-szulfát - 1 g kálium-dvuhromovokioly - 2,5 g Desztillált víz - 100 ml. jégecet 5 ml), stb.
• A rögzítés időtartama - több órától 1 napig vagy tovább, a rögzítő tulajdonságaitól és a vizsgált anyag jellegétől függően.
Az anyag rögzítésének általános szabályai
• Az anyagot közvetlenül és közvetlenül a bevétel után rögzítik.
• Az anyag rögzítéséhez használjon üvegből vagy cserépedényből (kerülje a fémet).
• A rögzítő folyadék térfogata legyen 20-30-szor nagyobb, mint a rögzítendő anyag térfogata.
• A rögzítő folyadék változik, amíg átlátszóvá válik (meg kell szüntetni a vér szennyeződését).
• Az anyag vastag papírból készült, grafit ceruzával vagy tintával.
• A rögzítés fényforrás nélkül történik.
• A fokozott hőmérséklet meggyorsítja a rögzítést. Az optimális rögzítési hőmérséklet 37 ° C.
• A leggyakoribb rögzítési mód a formalin. A formalin 40% -os vizes formaldehid-gázoldat (HCOOH).
Rögzítés formalinben
1. A minta formalin diffúziója (kb. 1 mm / h)
2. Kémiai rögzítés A formalin rögzítés vegyi összetevője
A sürgősségi rögzítés módja:
• 0,5 cm-nél kisebb vastagságú anyagot helyezünk 20% -os vizes formalin csőbe
• 3-5 percig melegítik, mielőtt a buborékok megjelennek (nem forrni kezd)
A formalin rögzítés nem érte el a célt a tanulmányban:
• vékony citológiai struktúrák • vízben oldódó anyagok (glikogén, húgysav) • Formalin rögzítés előnyei • Egyszerűség és olcsóság. • A szerkezetek jó biztonsága.
• Formalinban való rögzítés hiánya. • A vízben oldódó anyagok (glikogén, húgysav) kimutatásának képtelensége. • A citológiai struktúrák (kondriómák, Golgi készülékek stb.) Rossz kimutatása.
• A vízben oldódó anyagok kimutatására vízmentes fixáló anyagokat alkalmaznak (abszolút alkohol, 96% alkohol).
A rögzített szervekből és szövetekből vett minták felvételének szabályai. Egy fix tárgyból (szövet, szerv vagy szerv fragmens) óvatosan kivágnak egy fragmenst a kívánt helyről körülbelül 3 mm vastagsággal, körülbelül 0,5-2,5 cm2-es területet
Lépés - Vágjunk hozzá egy körülbelül 3 mm vastag darabot az elülső sík középső részéből
Bél - A bél minden részéből vágjon el 3 mm-es vastagságú darabokat az elülső síkban
-A egyik vese Vese vágott fragmentum körülbelül 3 mm vastagságú az egész test a középső része a szagittális síkban a második vese fragmentet kivágjuk 2 mm vastag középső része, amely a vese kapu a frontális síkban.
Máj - Vágott 3 mm vastag töredék a farok középső részéből, az oldalsó laterális jobb oldalsó lebenyek az elülső síkban
Szív - Vágjon egy 2-3 mm vastag darabot a szerv középső részéből, beleértve az aorta ívét az elülső síkban.
Tüdő - A jobb oldali agykoponya és a caudalis lebenyek középső részéből és a bal lebeny középső részéből kb. 3 mm vastagságú darabokat vágjon ki.
• A textíliák víztelenítése fokozatosan történik (úgy, hogy ne legyen ráncosodás) azáltal, hogy a növekvő erősségű szeszes italokat 50, 60, 70, 80, 90, 96, Minden alkohollal a darabok néhány órától 1 napig terjednek, a darab méretétől függően.
• Fixáció pufferolt formalinban (kb. 24 óra)
• Leöblítés folyó csapvízzel (3 óra).
• 50% etanol (1 óra) • 70% etanol (2 óra) • 80% etanol (1 óra) • 96% etanol (két eltolódás 30 percenként) • 96% etanol
• Abszolút alkohol (2 eltolódás 30 perc) • Abszolút etanol: xilol (1: 1, 20 perc)
• Xilol (három eltolódás 20 perc) - 3 eltolódás t = 56-nál # 8304; C • xilol keverék: paraffin 1: 1 (20-25 perc 56 ° C hőmérsékleten # 8304; C)
• Paraffin 1, 56 ° C hőmérsékleten # 8304; C (1 óra) • Paraffin 2, 56 ° C hőmérsékleten # 8304; (1 óra) • A viasz 3 hűlni kezd
Öntőállomások • Moduláris töltőállomások • Vezetékek és töltőállomások