Cikk - kreatin foszfokináz
A diagnosztikai értékét hatásainak tanulmányozására CK izoenzimek
Meghatározási módszerei CPK
Szabványos klinikai és laboratóriumi paramétereket
A szerepe a kreatin az izomszövet anyagcsere
A kinetikai cselekvési CK
Energia transzfer mitokondriumok a citoplazmában a szívizom sejtekbe izoenzimek CPK
CPK aktivitás miokardiális szarkoplazmatikus retikulum kísérletes koronária-elégtelenség
Hatása alkoholmérgezés és az öregedési folyamat a aktivitását kreatin-kináz és enzimek
A történelem a tanulmány a kreatin-foszfokináz (CPK) érdekes és szokatlan: annak ellenére, hogy kezdődött több mint 80 évvel ezelőtt (a nyitó kreatin 1927), valamint a kreatin válasz nyitott vonallánc és Lehmann a 1934- 1936-kutatók még nyitva új funkciók a rendszer, és a probléma a kreatin is messze nem megoldott. A fejlesztési elképzelések a fiziológiai szerepe a kreatin rendszer a kezdetektől szorosan kapcsolódó sikerek terén izom fiziológia és bioenergetika. A maga részéről a kreatin kutatási rendszerek jelentősen hozzájárulnak a kialakulásához elképzelések általános elveinek szervezet anyagcsere és a metabolikus kontroll a sejtben.
Célkitűzés: A tanulmány a modern megközelítések a szerkezet és a biológiai szerepe a kreatin.
A kreatin-kináz (EC 2. 7. 3. 2) - utal a foszfotranszferáz nitrogéntartalmú csoporttal akceptor.
Ez az osztály a transzferázok közé tartoznak az enzimek, amelyek katalizálják az átalakítás különböző, egy radikális elmozdulás a donor molekula egy akceptor molekulához, és egy nem-hidrolízis folyamata. A nevét az összetevők formájában: „donor - szállított csoport - transzferáz.”
1964-ben, a kreatin-foszfokináz izoenzimet felfedezték: citoplazmatikus BB-CK (egy táskát az agy - az agy.) MM-CK (egy táskát izom - izom.) És egy hibrid formában - MB-CK és a mitokondriális izoenzim - MT-CK.
A szív a citoplazma felét tartalmazza az MM-formák, valamint a teljes ± MW és a BB-CK; a teljes aktivitás 40-50% -át aktivitást.
A diagnosztikai értékét hatásainak tanulmányozására CK izoenzimek
A szérum CPK izoenzimek aktivitását Investigation nagy diagnosztikai jelentőségű. Izozim kreatin kináz különösen fontos, hogy vizsgálja meg az akut miokardiális infarktus, mert a CF-formában jelentős mennyiségben tartalmazott szinte kizárólag a szívizomban. Megnövekedett aktivitása MV-formában a szérumban jelzi a vereség a szívizom.
Meghatározási módszerei CPK
Egységes meghatározására szolgáló eljárás a kreatin kináz aktivitást módszerrel szolgál, mint a reakció szubsztrát kreatin. Az enzim aktivitás arányos a mennyiségű szervetlen foszfát mennyiségét savas hidrolízisével a reakciótermék a kreatin - kreatin-foszfát. A szervetlen foszfor által meghatározott szín reakciót ammónium-molibdát. Normális esetben, a tevékenység a kreatin-kináz a vérben termék által talált ez a módszer 100 nmol / (c * n), vagy legfeljebb 6 NE. A aktivitását kreatin-kináz MB-forma kevesebb, mint 2% -a az összes enzim aktivitását. Egy második módszer aktivitásának meghatározása a kreatin-kináz, valamint elfogadott szabványosított egy módszerrel, mint a szubsztrát kreatin. Az enzim aktivitás arányos mennyiségét kreatin eredményeként kialakult az enzimatikus reakció. A kreatin határozzuk meg színreakciót a-naftol. Normális esetben, a tevékenység a kreatin-kináz a vérszérumban a termék által talált ezt a módszert, 0-220 nmol / (c * n), vagy 0-tól 13 NE [International Unit = 16,67 nmol / (c * n)]. (Lehninger A. Biochemistry, M. 1976 o. 382).
Szabványos klinikai és laboratóriumi paramétereket
Kreatin-foszfokináz (CPK) szint
Norm: 10-50 NE / l volt 30S0 (függ a meghatározási módszer).
A. óvintézkedések a kísérlet során: Az enzim nem stabil, a tartalmát eritrociták gátolja enzimaktivitás. A szérum azonnal ki kell elválasztani a vérrög. Amennyiben a vizsgálat nem végezhető el azonnal, a szérum kell fagyasztani.
B. fiziológiai alap: CPK hasítja foszfokreatin (bevonásával ADP) kreatin képződik, és az ATP. CPK sok a vázizmok és szívizom, az agy.
B. adatok értelmezését:
Növekvő index akkor jelentkezik, amikor az izom rendellenességek (szívinfarktus, izomsérülés), izomsorvadás, polymyositis, súlyos izomfeszültség (futás), a pajzsmirigy, a stroke. A miokardiális infarktus utáni CK gyorsan emelkedik, (3-5 óra), és magas marad 2-3 napig.
Az ár nem növeli a szívizom elváltozások a tüdő vagy a májparenchyma.
Izoenzimek szérum kreatin-foszfokináz (táblázat №1)
A. óvintézkedéseket a kísérlet során: ugyanaz, mint az esettanulmány CK (lásd fent)..
B. fiziológiai alap: CPK áll három izoenzim, leválasztható elektroforézissel. A vázizom jellemző izoenzim MM, miokardiális MB, az agy - BB.
Táblázat №1. CPK izoenzim
Normál szint (% -át)
A váltás által észlelt aktivitás CK, szorosan kapcsolódik a strukturális változások a membránok a IDB, különösen azok lipid készítmény. Tehát, tekintve a koszorúér-elégtelenség volt némi csökkenése membránkötött koleszterinnel, valamint egy éles visszaesése szintjén foszfolipidek (40%),
A bevezetés után az antioxidáns gyógyszer AV-156Na megfigyelhető egyirányú változás a vizsgált paraméterek az irányt a normalizálás. Ez a hatás azt sugallja, hogy a szint a szivárgás a peroxid reakciók a szívizomban nagymértékben meghatározza a viselkedését az egyes anyagcsere folyamatok membránok.
A megfigyelt csökkenése CPK SPR membránok kísérletes ischaemia utalhat egy bizonyos megsértése normál energiaellátás közlekedési Ca-ATPáz SPR membránok. A változás az aktivitás a CK történik a háttérben jelentős csökkenése a membrán foszfolipidekben szív PRL szintek nyulak. Talán CPK izoenzim. A membránhoz kötött PRL lipidzavisimym enzim és bemutatására annak teljes megőrzését normális aktivitását a lipid membrán szerkezet - fontos és szükséges feltétele. (Frolkis RA Voronkov GS Dubur GY Tsiomik VA Gomon IV - Néhány szempontból a tanulmány a kreatin-kináz aktivitásának a membránok a szarkoplazmatikus retikulum szívizom kísérletes koronária-elégtelenség // Bulletin of Experimental Biology and Medicine, M. 1983 №5, pp. 53, 54).
Hatása alkohol-intoxikáció és öregedési folyamatok aktivitását és annak izoenzimek CPK
A Department of Pharmacology of the Institute of Experimental Medicine, Orvostudományi Akadémia a Szovjetunió (Leningrád) végzett kísérleteket azonosítani korfüggő változásait CK aktivitás a vérszérumban az intakt állatok idősebb 4 és 24 hónap, és vizsgáltuk a hatását akut alkoholmérgezés a aktivitását kreatin-kináz és izoenzimek szövetekben és testfolyadékokban patkányok 2 csoport: 1) a idősebb állatok 4 hónapos, amelyek 3 órán át a kísérlet előtt intraperitoneálisan injektáltunk 25% -os etanollal dózisban 3 és 5 g / kg; 2) kontroll - Patkány kezeljük megfelelő mennyiségű fiziológiás sóoldattal. Mielőtt lefejezés ezekben az állatokban, éteres altatás került folyadékot. Az agy kivonatok az agykéreg, agy-gerincvelői folyadékból és vérből szérumot CK aktivitás és annak izoenzim profil. A teljes enzim aktivitást úgy határozzuk meg kolorimetriás módszerrel. Izozimek oszlopkromatográfiásan szétválasztjuk kromatográfiával Sephadex DEAE A50. A fehérje mennyiségét határoztuk mikrobiuretovym módszerrel. Statikus feldolgozás végeztük Student.
Az adatok elemzése a teljes aktivitását CK vérszérum patkányok akut alkoholmérgezés, valamint intakt patkányokban a különböző korú, arra lehet következtetni, hogy az intakt állatok korban 4-5 hónapos aktivitásának CK és izozim spektrum nagyon különböznek az intakt patkányokban korban 24 hónapos (asztal №3).
Táblázat №3.Obschaya aktivitása CK vérszérumában a különböző korú patkányok és patkányok akut alkoholmérgezés
CPK aktivitás a vérszérum IU / l
Ép patkányokon a 4 hónapos korban. (N = 12)
Egy dózis 5 g / kg (n = 12)
A megfigyelt tény, életkorral kapcsolatos csökken a teljes aktivitását CPK a vérben, lehet a következménye általános változásokat a metabolikus szinten, lassítási feldolgozza frissítés szövetekben csökkenteni lokomotoros aktivitást, és így tovább. D.
Bevezetésével etanol dózisban 3 g / kg, a teljes aktivitás a vérben nagymértékben növeljük növelésével aktivitása a három forma az enzim. Ezzel együtt, van egy éles változás a százalékos izoenzimek (ábra. 1).
Izoenzim spektrumát CK vérszérumban a patkányok különböző korú és patkányok akut alkoholmérgezés
Ezek az adatok azt jelzik, hogy az etanol okoz szerkezeti károsodás szintjén az egész szervezet sejtmembránok, agy és szívizom szenvedő így nagyobb valószínűséggel, mivel az abszolút nyereséget aktivitás ± MW-BB izoenzimeket, és a legnagyobb. (4 és 10-szerese,), míg az MM-CK aktivitás nőtt csak 1,4-szerese. Feltételezhető, hogy a forrás a szérum aktivitásának BB-CK agyszövet. CSF - - vért (táblázat №4) A hipotézis, a dinamika a aktivitásának CK a rendszer az agy vizsgálták.
Táblázat №4. CK aktivitás az agyban, cerebrospinális folyadék és a szérum a patkányok akut alkoholos intoxikáció (n = 12)
Brain NE per 1 mg fehérje
A kreatin - kulcsfontosságú enzim bioszintézisének nagyenergiájú hordozó - kreatin, játszik együtt a kiemelkedő szerepét az ATP a szívizom bioenergetika és a test.
Meghatározása A kreatin-kináz aktivitás értékes diagnosztikai teszt szívinfarktus és más betegségek. Alapján egymást követő mérések a szérum kreatin-kináz aktivitásának tudja ítélni mértékét szívizom elhalt folyamatot és értékeli a terápia hatékonyságát.
De nem minden szempontból a kreatin funkciókat vizsgálták. Fontos információk a következő címen szerezhetők tanulmányozásával kreatin rendszer az agyban, a CPK citoplazma és a mitokondrium amelynek jelentése eltérő izom, izoformák, valamint az izomsejtek különböző állatfajok különböző szakaszaiban az evolúció; különböző kóros állapotokban.
2. Dickson M. Webb E. Enzymes, T. 1, M. 1982.
4. Leningrader A. Biochemistry, M. 1976.
7. Frolkis RA Voronkov GS Dubur GY Tsiomik VA Gomon IV Néhány szempontból a tanulmány a kreatin-kináz aktivitásának a membránok a szarkoplazmatikus retikulum szívizom kísérletes koronária-elégtelenség // Bulletin of Experimental Biology and Medicine száma 5, M. 1983.
További munkák a biológiában
Biológia absztrakt