Ozmotikus rezisztenciájának a vörösvértestek
vérvizsgálat
Ozmotikus rezisztenciájának a vörösvértestek
Hogy értékelje a fizikai-kémiai tulajdonságait a vörösvértestek megvizsgálják ellenáll a különböző hatások. Leggyakrabban a gyakorlatban alakítani ozmotikus rezisztenciájának vörösvértestek. Megkülönböztetni a minimális és maximális ellenállás. Minimális ellenállás határozza meg vörösvérsejt hipotóniás maximális koncentráció (kevesebb, mint 0,85% -os) nátrium-klorid-oldattal (egy sor fokozatosan csökkenő koncentráció), amelynél a legkevésbé stabil kiindulási hemolízis eritrociták az oldatban 3 órán át. A maximális ellenállása határozza meg a maximális koncentráció eritrocita hipotóniás oldatot nátrium-klorid, hívás 3 óra hemoiízisét vörösvértestek.
Az egységes meghatározásának módja ozmotikus rezisztenciájának vörösvértesteket módosítani LI Idelson
Elv. Mennyiségi meghatározását a hemolízis mértéke eritrociták hipotóniás pufferolt nátrium-klorid oldattal.
Reagensek. ömlesztett oldatot (egy ozmotikus koncentrációja megegyezik a 10% -os nátrium-klorid-oldat), pH = 7,4: vízmentes nátrium-hidrogén-foszfát (Na 2HPO 4) - 27,31 g vagy kristályos (Na 2HPO 4 × 2H2 0) - 34,23 g; kristályos nátrium-dihidrogén-foszfátot (NaH 2PO 4 × 2H2 O) - 4,86 g nátrium-kloridot - 180 g; desztillált víz - legfeljebb 2 liter. A megoldás lehet tárolni egy zárt tartályban a hűtőszekrényben néhány hónapig.
A törzsoldatot 10-szeresére hígítunk desztillált vízzel, és a kapott oldatot ozmotikus megfelelő koncentráció 1% -os nátrium-klorid-oldattal. Ebből az oldatból a munkaoldatot készítettünk, a megfelelő oldatokat nátrium-klorid, a következő koncentrációkban: 0,85; 0,75; 0,70; 0,65; 0,60; 0,55; 0,50; 0,45; 0,40; 0,35; 0,30; 0,20; 0,10 %%. Célszerű, hogy készítsen 100 ml üzemi megoldásokat. Hűtőben tároljuk, azok alkalmasak 2 hétig.
Különleges berendezések. 1) photoelectrocolorimeter; 2) egy termosztáttal 37 ° C-on
A kontroll minta - felülúszót tartalmazó csőbe munkaoldatot egy nátrium-klorid-koncentráció 1%.
Számítási. A teljes (100%), figyelembe hemolízis hemolízis in vitro 0,1% nátrium-klorid-oldattal. Számítsuk ki a százalékos hemolízis mindegyik csőbe, összehasonlítva az érték a kihalás a felülúszó kihalás 100%, a következő képlet:
ahol E1 - kihalás a felülúszó a kémcsőben 0,1% nátrium-klorid-oldattal; Ex - kihalás a vizsgálati minta; 100 - teljes hemolízis in vitro 0,1% nátrium-klorid-oldattal.
A következő napon, a vizsgálatot megismételtük a vér, inkubáltuk 24 órán át 37 ° C-on
Referencia értékek. Az egészséges emberek friss vérben hemolízis (a minimális ellenállást eritrociták) kezdődik koncentrációban 0,50-0,45% nátrium-kloridot, és a teljes hemolízis (a maximális ellenállása eritrociták) figyelhető meg a 0,40-0,35% nátrium-klorid oldattal.
A klinikai jelentősége. Ezt a vizsgálatot elvégezni gyanúja hemolitikus anémia. Legkevésbé ellenálló hipotóniás oldatok spherocytes (előfordulása eritrocita hemolízis megfigyelt magasabb koncentrációban nátrium-kloridot 0,75-0,70%). Feszültségcsökkentő ozmotikus stabilitás figyelhető meg nem csak örökletes microspherocytosis, hanem egyes örökletes nesferotsitarnyh hemolitikus anémia, autoimmun hemolitikus anémia. Növelik az ozmotikus rezisztenciát a vörösvérsejtek jellemző thalassaemia, hemoglobin rendellenességek, esetleg elzáródásos sárgaság.