Első fágok
Első fágok. A gyakorlati használat fágok
Az alacsony hatásfok ellensúlyozza fagoprofilaktiki phagotherapy és széles körű alkalmazása fágok azonosítása és infraspecifikus differenciálódását baktériumok diagnosztikájában fertőző betegségek és epidemiológiai vizsgálat foci vérhas, szalmonellafertőzés, diftéria és más Staphylococcus-fertőzések, ahol azok segítségével lehet azonosítani források és átviteli utak fertőző eredetű. Illusztrációként, hogyan lehet azonosítani fág és meghatározása tevékenységük, indukciós módszereket a lizogén baktériumok és fágtipizálás.
Izolálása virulens fág. Izolálása fág analizáltuk folyékony anyagot centrifugáljuk. A felülúszót mennyiségben 1 ml vittünk át 30 ml, a hús-pepton húsleves, de th (BCH), beoltjuk 1 ml 6-18 órás tenyészetből a szóban forgó organizmus.
A vetés termosztátba helyezzük 37 ° C hőmérsékleten egy napon, majd átengedjük egy Seitz-féle szűrő, és a szűrletet hígítjuk 1:10 és 1: 100, 1: 1000 és hozzáadjuk 0,05 ml-es tenyészetekben. Control az húsleves tenyészet szűrletet nélkül. Miután 18-20 óra hosszat a kémcsövet kivesszük a kemencéből. A fágok jelenlétét a megítélni fehérítés a közeg (a kontroll normális baktériumok növekedését).
Indukálása lizogén baktériumok ultraibolya sugarak. Svezhevyrosshuyu 8 órás baktériumtenyészetet hígítjuk 1: 20-1: 30 veronai puffer és 5 ml szétosztjuk két Petri-csészébe. Egyikük (pilot) van nyitva, a 30-180 besugárzott germicid lámpával LUV és második (kontroll) - tartott UV lefedettség zárva. Ezután a két szuszpenziót a baktériumok (3-3,5 ml) inokulálunk két csőbe, 5 ml megfelelő tápközegben, és miután több órás inkubálás egy inkubátorban besugárzott vetés mutatnak lítikus hatását hatásának vegetatív fágok.
Gépelési staphylococcus tárcsa 23 fagovarov referencia. Egy éjszakás tenyészete Staphylococcus aureus 209 P oltottuk 2,5 ml Hottinger tápközegben, 3-4 órán át, és frissen szélesztett pázsit és előszárítjuk egy Petri-csészébe 1,2% agar th. Az alján a Petri-csészébe oltottuk be ceruzával osztva 23 tér és mindegyikben egy szabványos hurok vagy Pasteur pipetta alkalmazni egy csepp a megfelelő fág. fág intézkedések figyelembe veszik az eredményeket a lízis mértéke Staphylococcus kultúra, jelezve előnyöket - az «±» bizonyos fág tevékenység Appelman módszer.
Határozzuk fág aktivitás a BCH. Ehhez, hogy számos tartalmazó csövekbe 4,5 ml húsleves. Az első cső készült 0,5 ml vizsgálati fág, hogy összekeverjük a közepes és pipettázzuk egy másik 0,5 ml-es csőbe, és a következő t. D. így fág sorozatosan hígítjuk 10-1 és 10-9 és a fenti.
Az egyes fág hígító hozzájárulnak 0,05 ml 18 órás tenyészetével baktériumok a megfelelő fajok. Két cső a BCH kontroll legyen: az egyik beoltott baktérium kultúrát (kontroll a bennük fág) fágot öntjük a második (ellenőrizzék annak sterilitását). Az eredmények értelmezése után végezzük 18-24 óra tartózkodási csövek egy inkubátorban. A titere fág meghatározza a legnagyobb hígítás, amelyben van a teljes lízis a baktériumok.