Alapvető módszerek figyelembe szövettani anyag, rögzítés és csontritkulás
A mikroszkópos vizsgálat a szövetek és szervek nagyon fontos figyelembe anyagi eszközök. E szabályok betartása figyelembe anyag csökkenteni fogja a tárgyak és a hibákat a szövettani vizsgálat.
1. Pieces szervek kell vágni egy éles késsel vagy borotva. Ollóval elkerülése pürével szövet nem ajánlott. Lehetetlen, hogy tömöríteni a darabokat, kaparjuk vagy törölje az arcukat, különösen a nyálkahártya és a savós hártyák.
2. darabok vágási 0,5-1 cm vastagságú, hosszúságú és szélességű különböző lehet (általában 1 x 1,5 cm) úgy, hogy az így kapott vágott illeszkedik alatt egy szabványos fedőlemezt. vastagabb darabok miatt nem javasolt a lassú behatolása szövet rögzítő mélységben veszi a tanulmány.
3. A darabokat helyezzük közvetlenül a rögzítő folyadék. Elfogadhatatlan mossa a darab előtt vízzel rögzítéséről.
Rögzítés stabilizálja a szöveti struktúrák és azok tömítést. Válogatás rögzítő közeg függ célkitűzései A tanulmány (például arra, hogy meghatározza tárgyak glikogén kell rögzíteni nem formalin, és etanol). A kötet a fixáló folyadék meg kell haladnia a hangerőt a darab nem kevesebb, mint 10-szer. Tehát szükség van, hogy a darabok ne ragadjanak össze a megoldás, és nem csatlakozik az alján a doboz. Hűtés reteszelt formalinban tárgyak nem kívánatos, mivel így lassítja a penetráció a horgony révén a szövet.
A formalin a leggyakoribb és egyetemes fixáló folyadékot. Formalin is a szövetbe, és ezért lehet használni rögzítése meglehetősen nagy tárgyakat. Fixálás után formalinban tárgyakat lehet paraffinba ágyaztuk, vágjuk celloidin vagy fagyasztás mikrotom. A nagy előnye a formalin Fixálóként lehet menteni darabokra hosszú idő után a rögzítés. Egy hátránya van a romlása formalin folyamatos festési és fixálási nedves tárolásra archív.
Rögzítő szövetet használjuk, mint egy 96% th, és abszolút etil-alkohol, valamint a különböző keverékek etanol és formalin. A gyakorlatban, az etanol kell alkalmazni, amikor rögzítéséről idegszövet a Nissl-festéssel és kimutatjuk tervezésekor glikogén. A legjobb eredményeket akkor kapjuk, az alkohol fixálás formalin és összehasonlítottuk a kimutatására vasbaktériumok amiloid. Összehasonlítva formalin-alkohol kevesebb átható ereje, így rögzítésére darabokból nem vastagabb, mint 0,5 cm. A fixálást mennyi ideig, néhány órától napig.
Kifinomult zár folyadékok:
A gyakorlatban, általában bonyolult zár folyadékot alkalmazunk, a kutatásban azonban gyakran inkább a formalin és az etanol miatt a magasabb minőségi rögzítéséről az egyes sejtek és szövetek struktúrák, kevesebb tárgyak a rögzítés, és a legjobb megőrzése színező tulajdonságai szövetek.
Ez a bilincs általában használt immunhisztokémiai vizsgálatokban, mivel ez jól tartja a fehérjék kapcsolatos celluláris membránok. A rögzítő úgy állítjuk elő, hogy feloldjuk 2 liter desztillált vizet, 50 g cink-kloridot és hozzáadunk 300 ml koncentrált formaldehid oldat és 1,9 ml jégecetet. A fixálást mennyi ideig nem több, mint 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük.
Folyékony Buena jól méri az összes szövetben, kivéve a veseszövet, nem vezet jelentős tömörítéssel és deformációjával fagyasztható szöveteket, és ezért gyakran használják a kísérleti és embriológiai tanulmányok. Retainer előállítására ex tempore telített (1,2%) vizes pikrinsav, a koncentrált formaldehid (40%) és jégecet arányban 15: 5: 1. Időtartam rögzítés körülbelül 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük.
Ez megőrzi a jó rögzítés folyékony sejtmag szerkezete és gyakran használják, ha szükséges, gyorsrögzítő és vezetékeket felgyorsult. Retainer előállítására nem több, mint 1 órával a fixálás előtt. Retainer áll abszolút alkoholt, kloroformot és jégecet aránya 6: 3: 1. Amikor rögzítés Carnoy folyadékegyensúlya vágott darabokat nem lehet több, mint 4 mm vastag. Időtartam fixálás 3-4 óra hosszat keverjük.
csont vízkőoldó
Dekalcifikáció végezzük, miután a teljes szövet fixálás, a szükséges anyagot, majd alapos mosás után (1-3 óra) a gyengén lúgos oldatokban. Mészkõtelenítés folyadék áll 100 ml 90% -os hangyasav, 80 ml 38,8% -os sósavat (sűrűség 1,19) és 820 ml desztillált vagy csapvizet. Elmozdulás mészkõtelenítés folyadék várhatóan jelentősen meghaladja az összeg dekaltsiniruemogo tárgy (10-20 alkalommal). Kis darab kompakt csont (12 g) mészkõtelenítés át 24 ° C-on 12 - 24 óra.