Session 11
- fenotípusos és genotípusos változékonyság mikroorganizmusok;
- mutációk; Genetikai rekombináció baktériumokban: transzformáció, transzdukció, konjugáció;
- A fő irány az orvosi biotechnológia;
- módszerek a genetikai és sejt mérnöki, ezek alkalmazása diagnózis és kezelés; készítmény terápiás, profilaktikus és diagnosztikai ágensek;
- módszerek géntérképezésre;
- elvek megszerzésének interferon, genetikailag módosított inzulin és ICA keresztül hibridóma technológiával;
- lefolytatására, és figyelembe veszi a kísérletek eredményeit transzdukció, transzformáció, a konjugáció;
- saját molekuláris hibridizációs technikák, polimeráz-láncreakció.
Kérdések, hogy teszteljék a kezdeti tudásszint
1. A genetikai berendezés baktériumok. Bakteriális kromoszómába és a plazmid. Genotípus és fenotípus.
2. Mutáció spontán és indukált. Mi a molekuláris mechanizmusa mutáció? Mit tud a mutagén?
3. Mi a auxotrofok? Hogyan juthat auxotróf baktériumtörzs?
4. Genetikai rekombináció. Mi átalakulás?
5. Transduction. Milyen tulajdonságokkal transduktsiruyuschy fág Transduction specifikus, nem-specifikus, sikertelen.
6. Mi a ragozás a baktériumok? Hogyan valósul meg? A fő funkciók az F-faktor.
7. A koncepció extra kromoszóma genetikai információ hordozók. A plazmidok. Osztályok plazmidok.
8. típusai genetikai szabályozását rezisztencia baktériumokat? Milyen tulajdonságok R -plasmids?
9. Mi az a bakteriocineket? Meghatározó géneket bakteriotsinogennost. Melyek az alapvető tulajdonságait a gyűjtőbe plazmidok?
10. A fő fejlesztési irányait az orvosi biotechnológia.
11. A problémák építésének sejtek új tulajdonságokkal. Válogatás a termelő mikroorganizmusok biológiailag aktív anyagokat.
12. módszerei géntechnológia. Előállítása interferon, inzulin, növekedési hormon, az interleukinok, subedinichnyh vakcinák.
13. A módszer a polimeráz láncreakció (PCR).
14. Cell Engineering. Hybridoma technology and monoklonális antitestek (mAb).
15. A módszerek feltérképezése kromoszómák, és bakteriális plazmidok.
16. A problémák új készítmények. Immobilizálása antibiotikumok liposzómák.
Önálló munka a diákok
Cél 23. Tekintsük az S - és R -kolonii bemutatáson csészéket.
Leírás jelen notebook.
Feladat 24. genetikai rekombináció baktériumokban:
- ragozás beállítás párzás tapasztalat NFR × F Escherichia coli (bemutató);
- specifikus transzdukció: a tapasztalatok átadása staging lokusz „gal” segítségével mérsékelt fág „lambda” Escherichia coli-ból (demonstrációs);
- Transzformáció: bemutató a tapasztalatok átadása ellenállás sztreptomicintartalmú Bacillus subtilis;
- plazmid: demonstrációs elektron különböző plazmidok;
- Eredmények azt mutatták, tapasztalatok leírását és magyarázatát bemutatott notebook.
Módszertani útmutató a munka elvégzésére
Tekintsük a tenyészetek növekedését biokémiai mutánsok a demonstrációs csésze.
Auxotróf mutánsokat - biokémiai mutánsok, amelyek megkövetelik a jelenlétét a tápközegben növekedési faktorok (aminosavak, vitaminok), amelyek nem igényelnek a kezdeti sejtek (vad) típus, az úgynevezett prototróf.
Prototrófíát képesek egészben médiában, de nem tud növekedni minimál. Ahhoz, hogy auxotróf mutáns megszorozva minimál táptalajon, hozzá kell tenni, növekedési faktor (vagy több különböző tényező), amelyben az aktív auxotróf igényel, mert nem képes szintetizálni.
Az auxotróf mutánsok segítségével „penicillin” módszer az eredeti (prototróf) kultúra befolyásolja mutagén tényezők - ultraibolya sugárzás, vagy kémiai mutagénekkel. Ezután az így kezelt tenyészetet növesztjük komplett közegben, amelyben mind a proliferációra prototróf és auxotróf sejteket. Szorozzuk meg a bakteriális sejteket mossuk és átvisszük olyan minimál tápközegbe kiegészített penicillin, ahol csak prototrófok-sejtek szaporodnak. Az intézkedés alapján penicillin ezeket a növényi sejtek elpusztulnak. Auxotróf mutánsok nem képesek osztani olyan minimál táptalajon.
Ennek tesztelésére auxotrófia telepeket oltunk párhuzamosan a minimális és a teljes tápközegben (kényelmes a használata a „replika” módszer). Dedikált azonosítani auxotrófokat, azaz meghatározzák a megfelelő növekedési faktor.