Vakcinához társuló anaerob enterotoxémia és esherihioznoy hasmenés borjak

A61K39 / 08 - Clostridium, például a Clostridium tetanusz

A tulajdonosok a szabadalmi RU 2428202:

Szövetségi állam intézmény „Szövetségi Központ Állati toxikológia és Sugárvédelmi” (FGU „FTSTRB-VNIVI”) (RU)

A találmány tárgya, az állategészségügyi mikrobiológia. A vakcina az alábbi komponenseket tartalmazta egy arány 1 liter vakcina: A szuszpenziót a törzs sejtek №28 Cl.perfringens A típusú a tenyészközegben koncentrációban 3,5 10 12 -4.0 × 10 12 cm 3 - 140,0-160,0 ; törzs sejtszuszpenziót №392 Cl.perfringens C típusú a tenyészközegben koncentrációban 3,5 10 12 -4.0 × 10 12 cm 3 - 140,0-160,0; törzs sejtszuszpenziót №213 Cl.perfringens A típusú a tenyészközegben koncentrációban 3,5 10 12 -4.0 × 10 12 cm 3 - 140,0-160,0; szuszpenziós sejtek törzs E. coli KB-1, amely egy ragasztóval antigént K99 sóoldat koncentrációban 100 -120 10 12 * 10 12 cm 3 - 25,0-30,0, a szuszpenziós sejtek törzs E. coli PP-3 A20 antigén, amely egy ragasztót egy fiziológiás oldatot koncentrációban 100 -120 10 12 * 10 12 cm 3 - 25,0-30,0; alumínium-hidroxid, 6% -s cm 3 - 200,0-250,0; formalin, cm 3 - 4,0-5,0; hőlabilis és hőstabil toxoidok E. coli E. coli K99 törzsek, és PP-3 arányban 1: 1 egy olyan táptalajba, amelynek titere a DSA 1: 8-1: 16, l - 1 l. A vakcina képződését okozza intenzív immunitás borjak és a felnőtt szarvasmarha 12 hónappal a két vakcinálás. A borjak a beoltott tehenek keletkezik, miután megkapta a kolosztrum kolosztrum immunitás 1,5 hónap. 2. táblázat.

A találmány tárgya, az állategészségügyi mikrobiológia és a biotechnológia, különösen a termelés és a biológiai anyagokat használnak a elleni anaerob és enterotoxémia esherihioznoy borjú hasmenés.

Ehsherihiozom - ostroprotekayuschih fiatal fertőző betegség nyilvánul meg vérmérgezésben, toxémia és bélhurut, kiszáradás, kár, hogy az idegrendszert, növeli a depresszió és a gyengeség, és néha tüdőgyulladás és ízületi gyulladás. A betegség által okozott enterotoxikus Escherichia coli (E. coli), szintetizáló adhézió antigének K88, K99, 987R, F41, A20, Att25. Borjak több mint 80% esetek ehsherihiozom baktériumok által okozott E. coli, termelő adhéziós antigének A20 és K99. Megelőzésére irányuló ehsherihioza Oroszországban alkalmazott „vegyértékű vakcina ellen colibacillosisos gidrookisalyuminievaya (ehsherihioza) malacok, borjak, bárányok”, „Vaccine ehsherihioza mezőgazdasági Megengedett „Coley-Wack” ragasztót tartalmazó antigének K99, K88, 987R, F41, TL-, TC-toxoidok és szomatikus antigének szerotípus 078, 0141. Ezek a vakcinák fokozott reaktivitása szarvasmarha tartalmának köszönhetően a rendkívül mérgező törzsek E. coli, termelő adhéziós antigének K88 és 987R, nem okoznak betegséget a borjak.

Elleni vakcina anaerob enterotoxémia borjak az Orosz Föderáció nem fejleszt és gyárt.

Köztudott, hogy az anaerob enterotoxéma borjak gyakran nyilvánul kevert fertőzés ehsherihiozom. Ezért a tényleges fejlesztési kapcsolódó elleni vakcina anaerob enterotoxémia esherihioznoy hasmenés és a borjakat.

Az képtelenség, hogy ezt a vakcinát immunizálására borjak szűk antigén-spektrummal (hiánya az oltóanyag-antigének Cl. Perfringens A, D, és a ragasztó A20 antigént E. coli, a gyakran előforduló betegséget okozni borjak), a nagy reakcióképesség miatt tartalmát erősen toxikus E. coli törzsek előállítására ragasztóval antigének K88 és 987R, nem okoznak betegséget a borjak.

A célunk a találmánnyal az, hogy javítsa a immunogén és antigén aktivitás spektruma és kiterjesztése a védő hatását a vakcina és a csökkenés a reaktogenitást.

A probléma megoldódik annyiban, hogy a vakcina ellen a kapcsolódó anaerob és enterotoxémia esherihioznoy borjú hasmenés tartalmazó clostridium antigének, antigének az Escherichia, inaktivátor formalinnal és egy adjuváns egy clostridium antigének tartalmaz B toxin és a szuszpenziós sejtek törzs №28 Cl. perfringens A típusú, B-toxin és a szuszpenziós sejtek törzs №392 Cl. Clostridium perfringens C típus, B toxin és a szuszpenziós sejtek törzs №213 Cl. Clostridium perfringens D típusból antigének Escherichia - A sejtek szuszpenzióját a törzs E. coli KV-1, amelynek a ragasztó antigén K99 fiziológiás sóoldatban, a szuszpenziós sejtek E. coli törzs PL-3, amely a ragasztó A20 sóoldatban levő antigénnel hőlabilis és hőstabil toxoidok tenyészetben közepes tenyésztésével kapott E. coli törzsek KV-1 és PP-3 a tápközegben a adjuvánsok - alumínium-hidroxid gél az alábbi komponensek aránya per 1 liter vakcina:

A szuszpenziót törzs sejtek №28 Cl. perfringens A típusú a tenyészközegben koncentrációban 3,5 10 12 -4.0 × 10 12 cm 3 - 140,0-160,0.

A szuszpenziót törzs sejtek №392 Cl. Clostridium perfringens C típus a tenyészközegben koncentrációban 3,5 10 12 -4.0 × 10 12 cm 3 - 140,0-160,0.

A szuszpenziót törzs sejtek №213 Cl. Clostridium perfringens D típus táptalaj koncentrációban 3,5 10 12 -4.0 × 10 12 cm 3 - 140,0-160,0.

A szuszpenziós sejteket az E. coli KV-1, amely a ragasztó antigént K99 sóoldat koncentrációban 100 -120 10 12 * 10 12 cm 3 - 25,0-30,0.

A szuszpenziós sejteket az E. coli PL-3, amely a ragasztó A20 sóoldatban levő antigénnel koncentrációjú 100 -120 10 12 * 10 12 cm 3 - 25,0-30,0.

alumínium-hidroxid, 6% -s cm3 - 200,0-250,0.

A formalin, lásd 3. - 4,0-5,0.

TC- toxoidok és a TL E. coli törzsek KV-1 E. coli és a PP-3 arányban 1: 1 egy olyan táptalajba, amelynek titere a DSA 1: 8-1: 16, l. - Akár 1.

Klostridioznye készített antigéneket törzsek Cl. perfringens №28, №392, №213, kapcsolatos rendre szerocsoportok, C, és D

A törzsek az alábbi tulajdonságokat. Szerdán Kitty Tarotstsi baktériumok gyors növekedés erős egyenletes elhomályosodását a levest, és bőséges felfúvódás. A kenetek tenyészetéből baktériumok Gram-pozitív, rövid vastag rudak végei levágták viták nélkül. Glükóz-vér agart baktériumok képeznek nagy, sima, konvex telepeket sima élek, erős átlátszatlan terület veszi körül, a (részleges) hemolízis. A kultúrák toxikus, okozó megsemmisítés fehér egerek 12 órán belül.

Esherihioznye epiteliotropnyh készített antigéneket enterotoxikus Escherichia coli-törzsek «KB-1" és a»PP-3«, izolált a vékonybélből betegek hasmenés újszülött borjak.

A törzsek az alábbi tulajdonságokat.

Morfológiai tulajdonságok: polimorf, Gram-negatív bacillusok nem képez spórákat elrendezve kenetek egyszeresen.

A kulturális tulajdonságok: a hús-pepton húsleves törzsek okoznak intenzív zavarosságot, a hús--pepton agar formában lédús, fényes, konvex, sima élek sima kerek formájú telepeket. Szerdán Endo kolónia málna színű, fémes fényű.

Enzimatikus tulajdonságok: fermentum glükóz, laktóz, mannit, xilóz, és egyéb szénhidrátok nem folyósítja el a zselatint alkotnak indol, nem képezik a hidrogén-szulfid.

Szerológiai tulajdonságok: magas antigén aktivitás RA, a csoport-specifikus és a faj specifikus antigén, törzs „KB-1” szintetizálja ragasztó K99 antigén, törzs „P3-3” - ragasztó A20 antigén.

Tartalmazza a vakcina-asszociált antigének hatékony mennyiségben, amelyek szinergetikus hatást mutatnak egy intenzitásának növekedését és az immunitás időtartama.

1. példa A gyártási klostridioznyh komponensek összefüggő termelési törzsek Cl vakcina. perfringens №28, №392, №213 termesztett hús-hepato-kazein közegben a reaktorban, 5-6 órán át 37-38 ° C-on történő tárolás előtt legalább 4 milliárd / cm 3 mikrobiális sejteket. Check termesztett kultúra toxicitás fehér egereken, amelyek die intravénás beadását követően 0,5 cm3 a tenyészet legfeljebb 24 óráig.

tenyészet előállításához használt a vakcina, amely legalább 6000 DLM / cm fehér egerek. A reaktorba adunk formalin 0,7% -os koncentrációban, tartjuk 8 napon át 37-38 ° C-on hozzáadunk 6% alumínium-hidroxid -os 10% -os koncentráció, karbantartott 3-5 nap, és eltávolított 50% a felülúszó teljes térfogata folyadék pH-ját 7,2-7,4.

2. példa Esherihioznye komponensek nyert E. coli törzsek KV-1 és a P3-3, illetve szintetizáló adhéziós antigének K99 és az A20. Ezek a törzsek halálát okozzák fehér egerek 14-16 grammosak 24 órán hasüregbe való fertőzést követően dózisban 500 millió MK

E. coli baktérium masszát használjuk a hús-pepton agart (a törzs P3-3) és Mink közegben (KB-1 törzs). Ebből a célból, ezek a tápközegek Matras öntjük 300 cm 3, és sterilizáljuk 0,5 atm (110 ° C-on) 15 percig. Megszilárdulása után vetés média, hogy ezek a kultúrák 3,0 cm 10 milliárd iszapot. Crops inkubáljuk hőmérsékleten 37-38 ° C-on 24 óra elteltével, szaporított tenyészetek kolónia E. coli öblítjük steril 0,85% -os vizes nátrium-klorid-, a szuszpenziót készítünk koncentrációban 100-120.000.000.000 MK 1 cm 3 bakteriális vagy optikai turbiditás szabványos Gisco őket. Tarasevich.

Az inaktiválást formalinnal végezzük baktérium szuszpenziót. Ehhez a szuszpenzióhoz hozzáadunk formalin 0,5% -os végső koncentrációban, és inkubáljuk 4-5 napon át kemencében, egy 37-38 ° C-on Ezután ellenőrizze a teljességét inaktiválása lemeztken megfelelő táptalaj.

Minden egyes toxoid törzset E. coli oltottunk be a reaktorba külön Hottinger tápközegben, 5-7 napon át 37-38 ° C-on A koncentráció TL, TC-toxinok diffúziós kicsapási reakció (RDP). Titer TL, TC-toxin a tápközegben kell lennie legalább 1: 4-1: 8. Ezután hozzáadjuk a tenyészethez, hogy 0,4-0,5% -os formalin és hőmérsékleten tartjuk 37-38 ° C-on 10-12 napig, majd adjunk hozzá 6% alumínium-hidroxid -os 10% -os koncentráció, 3 napig tartjuk fent, és eltávolítjuk 50% a teljes mennyiség a felülúszó pH-ját 7,2-7,4.

3. példa kontroll vakcinával sterilitás, ártalmatlanságát és immunogén aktivitása. Ahhoz, hogy ellenőrizhessük a sterilitást a 6 injekciós üveg az egyes vakcinák sorozat a gazdanövény BCH IPA, MPPB ásványolaj alatt és az agar Saburo 2 csövek az egyes palackot. Növények média hőmérsékleten inkubáljuk 37-38 ° C, és a Saburo Agar - hőmérsékleten 22-23 ° C-on 15 napig. Ebben az esetben a táptalaj kell maradnia steril.

Annak ellenőrzésére, ártalmatlanságát kiválasztott 10 fehér egereken 16-18 g testtömegű és dózisban adjuk a vakcinát úgy 0,5 cm3 szubkután. A vakcinát ártalmatlan, ha az egeret 10 napig a vakcina beadását életben maradnak, és klinikailag egészséges. Ellenőrző vakcinák immunogén aktivitással végzett 3 nyulak, amely a hatóanyagot intramuszkulárisan kétszer időközzel 15 nap dózisban 4 cm 3 miután 20 nappal a második injekció a nyúl vérszérumban titert meghatároztuk az antitoxikus antitestek Cl toxin semlegesítési reakció. perfringens fehér egereken. Vakcinák tekintjük ellen hatásos enterotoxémia, ha a vérszérumban immunizált nyulak megvédi az egereket legalább kettő a három készült szakértelmet, a halál összes egerek a kontroll csoportban. A immunogén aktivitása vakcina tesztelni Escherichia 40 fehér egerek súlya 16-18 g 20 vakcinát adagolunk egereknek (kísérleti) kétszer szubkután időközzel 10 nap dózisban 0,3 cm 3 és 20 egerek (kontroll) nem vakcináltuk. 15 nappal a második a vakcina beadását állatoknak adjuk be intraperitoneálisan podtitrovannuyu halálos adag a két kontroll E. coli törzsek (K99 és A20), amelynek során minden egyes törzs az E. coli 10 és 10 nevaktsinirovanngh vakcinált állatok. A vakcina tartják ellen hatásos az E. coli túlélési legalább 10-ből 7 beoltott és a halál legalább 8 nevaktsinirovanngh fehér egerek.

4. példa vakcina hatékonyságát értékeljük száma beteg és halott anaerob és enterotoxémia esherihioznoy hasmenés borjak kedvezőtlen gazdasági ezek a fertőzések. Termelés teszt a kísérleti sorozat kötött vakcina végzett SKHPK „Dzevyatouski” Laishevo Tatár régió tartósan hátrányos helyzetbe anaerob enterotoxémia esherihioznoy és hasmenés. A kísérleteket a 46 glubokostelnyh tehenek és 60 borjak 30-35 napos korban. A tehenek vakcinát szubkután adjuk be egy dózisban 10 cm 3 kétszeresen 50-60 nappal az ellés előtt, hogy 15-18 napos időközzel. A borjakat immunizált évesen 18-20 napig, majd kétszer egy intervallum 15-18 nap dózisban 4 cm 3. Ennek eredményeként a vizsgálatok során megállapították, hogy a vakcina ártalmatlan állatok, nem okoz szövődményeket állatok és hatására aktív vakcinálás utáni immunitás. Például, egy csoportban az újszülött borjak a beoltott tehenek, az előfordulási gyakorisága 13,1% volt, a biztonsági - 89,9%, míg a borjúcsoport származó nem vakcinázott tehenek, ezek a számok 78,8 és 77,7%, sorrendben. A csoportban az idősebb borjak vakcinált társított vakcinával, az előfordulási anaerob enterotoxémia esherihioznoy és a hasmenés volt 8,3%, a biztonsági 91,6%, míg a csoport nem vakcinált borjúból, ezek a számok 21,9 és 73,9%. Ezért elleni vakcina anaerob és enterotoxémia esherihioznoy hasmenés borjak kellően magas immunogén aktivitású. Alkalmazása A megelőző intézkedésként, hogy végleg működésképtelen gazdaság, amely csökkentette az előfordulását, újszülött borjak 6,4-szer, a borjak idősebb - a 2,63-szor, és ezáltal javítja a biztonságot, újszülött borjak 12,2% -kal, a borjak idősebb - 17.7 % (lásd. 2. táblázat).

5. példa megértése biológiai tulajdonságokat, a sorrendben alkalmazási elleni vakcina a kapcsolódó anaerob enterotoxémia esherihioznoy hasmenés és borjak.

A vakcina egy olyan átlátszatlan folyékony szalmasárga szín, bőséges szürkés csapadékot, amely, amikor az ampulla rázzuk könnyen törik, így homogén szuszpenziót kapunk.

Vakcinaampullák csomagolt lemez dobozok, integritásának biztosítása érdekében a palackokat csomagolva papír vagy cellulózvatta, a hideg évszakban - vattával vagy más szigetelő anyagok. Belül minden doboz fektetnek 3 példányban. használati utasítást a vakcina.

A vakcinát szállítani és tárolni, száraz, sötét helyen hőmérsékleten 4 és 8 ° C-on eltarthatósága a vakcina 12 hónapig termelés megfelel a szállítási és tárolási körülmények között.

A vakcina károsodott integritását ampulla és vetjük alá fagyasztás nélkül címkék, a szennyeződések jelenléte, és nem fogyasztott egy nap injekciós nyílást, eldobjuk. Vybrakovannyh vakcinát vetjük alá forralással, 15 percig.

Az aktív komponensek a vakcina antigének baktériumok Clostridium perfringens A, C, D, és az Escherichia coli K99 antigének szintetizáló ragasztó, A20, és azok TL- és a TC-toxoidok. Minden alkatrész ártalmatlan vakcinák erősen immunogén, és teljesen kompatibilis.

A vakcinát kétszer időközzel 18-20 napig megfelelő dózisban okoz a fiatal és felnőtt szarvasmarha kialakulása stressz immunitás 12 hónapig tartó. A borjak a beoltott tehenek keletkezik, miután megkapta a kolosztrum kolosztrum immunitás 1,5 hónap.

Az eljárás alkalmazása a vakcina

Az oltóanyagot használják profilaktikus intézkedés tartósan fenyegetett és hátrányos helyzetű háztartások által anaerob enterotoxémia esherihioznoy hasmenés és a borjakat.

Védőoltás kell a klinikailag egészséges állatokat. A gazdaságokban, kedvezőtlen anaerob és enterotoxémia ehsherihioza, kezdődik különleges prevenciós immunizálására vemhes tehenek és üszők, amely vakcina egy adag 10 cm3 injektálunk szubkután kétszer 50-60 nappal az ellés előtt, hogy 14-15 napos intervallumokkal. A borjak kaptuk vakcinázott tehenek vakcináztuk korban 18-20 napig dózisban 3 cm 3, kétszer időközzel 14-15 nappal.

Alkalmazása előtt a vakcinaampullák alaposan meg kell rázni, és a hideg, hogy meleg vízfürdőben 37-38 ° C-on

Tej és vágási termékek a beoltott állatok bármikor az oltás után végre korlátozás nélkül.

Az oltás szükséges betartani a szabályokat aszepszis és antiszepszis. Helyezzük a vakcina fertőtlenítettük 70% -os etanolos oldattal. Fecskendők és tűk sterilizáljuk használat előtt forralással egyes állatok segítségével egy tűt.

Amellett, hogy a vakcinálás állatok kell végezni a haszonállat-egészségügyi ellátás megsemmisítésére irányuló fertőző eredetű.

Ellenjavallatok:

- Nem beoltani beteg és legyengült állatokon;

- nem használja hiperimmun szérum vagy immunszuppresszív 1 hónapon belül az oltás után.

személyes megelőző intézkedések

Amennyiben az oltást szükséges betartani a személyi higiéniára, elfogadott, ha foglalkoznak gyógyszerek. A munkahelyén legyen egy elsősegély-készlet, hogy az elsősegélynyújtás.

Abban az esetben, vakcinák ki a nyílt területeken a test, vagy nyálkahártya a szem, száj, orr, és a munka után kezet és a szennyezett területet mossuk szappannal és vízzel.

A vakcina lejárati idő után nem vonatkozik a kérelmet. A vakcinát kell tárolni elzárva a gyermekek.