Prokalcitonin marker diagnózisa súlyos fertőzések - labortechnikai
Több évtizedes, szepszis és súlyos fertőzések továbbra is az egyik legégetőbb probléma a modern orvostudomány miatt állandó emelkedő tendenciát mutat a betegek száma és a tartósan magas mortalitás, annak ellenére, hogy az új elvek és módszerek.
Ez gyakran előfordul, mert a késői diagnózis és a kezelés megkezdése, valamint a hiánya miatt képesek pontosan felmérni a kezelés hatékonyságát. Ezért a probléma időben történő diagnosztizálása szepszis és tényleges ellenőrzése a betegség most egészen heveny.
A klinikai gyakorlatban a két fő probléma a diagnózis súlyos fertőzés:
- Először - megkülönböztetése fertőzés önmagában, vagyis a helyi és általános szisztémás fertőzés kísérik megfelelő reakciókat. Patofiziológiás hatású a szisztémás gyulladásos válasz szindróma (SIRS) lehet meghatározni klinikailag a tünetek, de a tünetek súlyossága és prognózisa klinikailag sokkal nehezebb megítélni.
- A második probléma a diagnózis szepszis - megkülönböztetése fertőző és egyéb okai szisztémás gyulladásos válasz szindróma, mint például a traumát és immunkomplex betegségek. Diagnózis bonyolítja az a tény, hogy a betegek jelentős hányada egyértelmű klinikai képet a szepszis, a vér kultúra gyakran negatív.
A gyulladás fordul elő, hogy miután bármely formája szöveti károsodás, kíséretében a citokinek és az akut fázis fehérjék, amelynek meghatározása jelenlétére utalhat a gyulladás, és annak súlyosságától. Egyes esetekben, a meghatározását az akut fázis fehérjék vagy citokinek jelezheti a természet a gyulladásos folyamat vagy annak szövődményei, bár a gyulladásos folyamatok általában nagyon hasonlóak, függetlenül annak kiváltó okától. Ebben a tekintetben, megértjük az érdeklődés a kutatók és a klinikusok a prohormon kalcitonin, és mindenekelőtt a procalcitonin (PCT), amely, mint egyes kutatók úgy vélik, specifikus markere a fertőzés.
Klinikai értéke prokalcitoninhoz
• Mivel a diagnózis szepszis, szeptikus sokk és súlyos bakteriális fertőzések. A differenciáldiagnózis fertőző és nem-fertőző etiológiája ismeretlen eredetű láz.
• folyamatosan figyelemmel kísérhető a betegek szeptikus sokk; értékeli a kezelés hatékonyságát; értékeli a beteg prognózisa.
• PCT korai diagnózis a fertőzéses szövődmények:
1. Sebészeti betegek
2. intenzív ellátásra szoruló betegek
3. A címzettek a transzplantáció után
4. A betegek gépi lélegeztetésre
5. betegek immunosuperssiey
6. Betegek neutropenia
7. betegek betegségek ismeretlen eredetű
• PCT iispolzovat differenciáldiagnózis:
1. fertőző és nem-fertőző etiológiája (pl. ORDSV, akut hasnyálmirigy-gyulladás)
2. Bakteriális és vírusos fertőzések (például akut meningitis, újszülöttkori szepszis)
3. Akut bakteriális fertőzések és krónikus gyulladásos folyamatok, autoimmun betegségeket, például
4. reakció ellen, a transzplantáció, illetve a fertőző komplikációk a bakteriális és gomba eredetű
• PCT szint is emelkedett súlyos tüdőgyulladás, hashártyagyulladás, bakteriális agyhártyagyulladás.
• Ezen kívül PCT szint emelkedett lehet a malária, melioido-sis, szisztémás gombás fertőzések.
JELLEMZŐK prokalcitonin normális és kóros körülmények között
A normális élettani, az egyetlen szerep a PCT - ez a szerepe a kalcitonin prekurzor. A kalcitonin ismert, hogy szabályozza a csont metabolizmus és a kálcium, és gátolja oszteoklasztok által végbemenő csontfelszívódást. Korábban azt feltételezték, hogy a kalcitonin (CT), így nevezték a hypokalaemiás hatás rendkívül pajzsmirigy eredetű fontos szerepet játszik a csontváz homeosztázis. Azonban azt találták, hogy ha a pajzsmirigy emberben nem fordul elő jelentős élettani hatása vonatkozásában kalcium homeosztázis és a csontsűrűség a legtöbb esetben ugyanaz marad. Így az élettani funkciók érett CT emberekben még mindig ismeretlen, sem voltak eddig azonosított jogsértések fordulnak elő a szervezetben, amikor felesleges vagy hiányosság érett kalcitonin.
Rendelkezésre álló módszerek MÉRÉSI
Bohuon et al. először úgy azonosítjuk, PCT képes emelkedni a szervezetben során mikrobiális fertőzés kifejlesztett egy kellően érzékeny és specifikus vizsgálati meghatározásához a kalcitonin a szérumban monoklonális antitest használatával.
Ezzel párhuzamosan az általuk kifejlesztett egy monoklonális antitest könyvtárból. határozzák meg nem csak a kalcitonin, hanem PCT, és N- vagy C-terminális molekulák kalcitonin prekurzor, kalcitonin glicinnel katakaltsina.
A fő probléma abban az időben az volt, hogy tiszta PCT hogy egységesíteni kell a mérést. . Ghillani és munkatársai is kifejlesztett egy teszt specifikus monoklonális antitestek ellen, a PCT maradékot 96-106, mint a primer antitest és anti-maradékot 70-76, mint egy címkét, amely érzékel csak intakt PCT. Plot 70-76 része a kalcitonin molekula, míg a 96-106 - katakaltsina ez a része a molekulának.
A mai napig, a kereskedelmi forgalomban kapható tesztek az egyetlen cég Brahms Diagnostica, Berlin, Németország, amelyek közé tartozik a félkvantitatív vizsgálat Brahms PCT-Q, kemilumineszcens assay Brahms Lumitest-PCT, Brahms LIAISON-PCT és Brahms Cryptor-PCT.
Brachms PCT-Q - egy szemi-kvantitatív immunológiai meghatározására PCT (PCT), mellyel a diagnosztizálására és nyomon követése szerek akut bakteriális fertőzések és szepszis. Brachms PCT-Q - egy vizsgálati rendszer egy inkubációs idő 30 perc, amely nem kell kalibrálni és további hardver. A teszt azon alapul, a használata egér monoklonális anti-katakltsinovyh konjugált antitestekkel kolloid arany (Mark) és poliklonális antitestek antikaltsitoninovyh (sűrű fázis).
LUMItest ® PCT - kemilumineszcenciás vizsgálatok, amelyek felhasználhatók a kvantitatív meghatározására PCT humán szérumból vagy plazmából. Két antigén-specifikus monoklonális antitestek, amelyek kötődnek a PCT (antigén) két különböző helyszínen (katakaltsinovy és kalcitonin szegmensek) ebben a vizsgálatban alkalmazott túlzott mennyiségben. Ezen antitestek egyikét - fluoreszcensen jelölt (címke) és a másik van rögzítve a belső felülete a cső. Az inkubálás alatt, mindkét antitest reagál PCT molekulák a vizsgálati minta, és így egy „szendvics komplex”. Ennek eredményeként, lumineszcencia-jelölt antitestek kötődnek a belső felülete a cső. Miután a reakció befejeződött, a felesleges jelölt ellenanyag teljesen eltávolítjuk a csőből. Ezt követően, a maradék mennyisége címke egy kémcső felülete mennyiségileg a fluoreszcencia mérésével jelet luminométer alkalmazásával és LUMItest ® Basiskit reagensek. A lumineszcencia szignál (RLU) egyenesen arányos a PCT koncentrációját a mintában.
LIAISON ® BRAHMS PCT ® - dvuhuchastkovy kemilumineszcenciás teszt (szendvics elv). Két különböző nagyon specifikus monoklonális antitest bevonására használt a szilárd fázis (mágneses részecskék) és a címke. Az első inkubálás PCT jelen van a vizsgálati mintában, és kalibrátorok jelzett antitestekhez. A második inkubációs lépést a szilárd fázisú ellenanyag reagál a már csatlakoztatott PCT. A felesleges címke eltávolítjuk mosási ciklus. Ezután adjuk hozzá a starter reagenseket adjuk hozzá. PCT koncentráció a mintaelemzés, kalibrálás által mért kemilumineszcenciás indukált reakció. Gyenge jel mérjük, és intenzitása egyenesen arányos a koncentráció prokalcitonin a mintában. KRYPTOR ® használ TRACE technológia alapján nem radioaktív energia átvitel. Ez az átcsoportosítás történik, a két fluoreszcens markerek: európium kriptát (donor) és XL665 (akceptor). A mért jel kialakulása alatt az antigén-antitest komplex felerősödik. Teszt KRYPTOR ® homogén, elválasztás nélkül eljárások vagy mosására. Ezáltal lehetőség van az adatok fogadására, megszakítás nélkül a immunológiai reakciót. Nagy PCT koncentráció tesztminták észlel az első néhány másodperc inkubálás. Ezek a minták lehetnek tenyésztjük a megfelelő megoldást, majd automatikusan újra analizáljuk.