Camera számlálására vérsejtek és sejtes elemek
Goryaev kamera - olyan eszköz, amellyel számolni a sejtek számát egy adott térfogatú folyadék. Általában arra használják, hogy meghatározzák számú kialakult elemek a vérmintában.
A kamra egy vastag bevont csúsztatható üveg ezekkel keresztirányú rések alkotó három keresztben futó sík területen.
Átlagos játszótéri hosszanti rés van osztva két, amelyek mindegyike már vésett a rács. Mindkét oldalán a középső pad a Goryaev kamrában még két másik 0,1 mm-rel (a Fuchs-Rosenthal kamrában 0,2 mm) a fenti a medián. A repülőgép az ilyen helyeket használják kenőcsök fedezze üveg előtt az úgynevezett Newton-gyűrűk. Miután kenőcsök fedőlemez kamra jön létre, két oldalon zárt, és, a másik kettő marad a rés (kapilláris tér), amelyen keresztül a kamra tele van.
rácsok elv ugyanaz. Ők vannak osztva egy bizonyos számú négyzetek, csoportosítva különböző módokon.
Állandó minden hálózatok az úgynevezett „kis négyzet” oldalon egyenlő 1/20 mm, így annak területe 1/400 mm2.
A rendszer segítségével a fényképezőgép Goryaeva is lehetséges, hogy meghatározza a nagyítás a mikroszkóp.
Külsőleg paralelepipedon egy átlátszó (tárgylemezre), a barázdák és a kiosztott mikroszkopikus rács. Méretek kisebb szétválására rács sejtek 0,05 mm, és nagyobb - 0,2 mm-es. Ebben a háló alkalmazása a pad (üveg rész), hogy 0,1 mm-rel alacsonyabb, mint a két szomszédos platformokon. Ezeket a helyeket használják kenőcsök fedőlemez. A folyadék térfogata a tér felett képződött a nagy deléciók Goryaeva mesh 0,004 mikroliter. Számlálás sejtszám felett nagy tér lehet számítani a sűrűsége ilyen típusú sejtek a szuszpenzióban a képlet:
A sejtek száma / ml = sejtek száma egy nagy tér * 2,5 • 10 5
Használata Goryaev kamera egyfajta szabvány nagyítású mikroszkóp lehet meghatározni a következő képlet:
ahol kG - a növekedés a mikroszkóp;
1 m - helyzetben a bal oldali határ sejtek Goryaev kamrát;
2 m - helyzetében a jobb határa a cella vagy sejtcsoport;
N - sejtek száma között mért határok;
egy - Goryaev kamera felbontás sejtek (egyenlő, mint 0,05 mm).
Goryaev kamera is használják, hogy számolja meg a tenyészetben. [1]
A képlet kiszámításához vérsejtek a Goryaev kamrában -
X = (a · 400 · a) / b,
ahol x - a kívánt számú kialakult elemek 1 mm3; és - a képződött elemek megszámoltuk egy bizonyos térfogatú kamrát; b - a számát megszámoltuk kis négyzetek; a - a vér hígításban.
Módszer számítva oociszta a Goryaev kamera.
Ez a módszer általában alkalmazható a kísérleti fertőzés az állatok pontos beállítása oociszták számának (állati adjuk a megfelelő mennyiségű milliliter szuszpenzió). 1 ml szuszpenzió, amely az oociszták, kerülnek a Goryaev kamera. Mivel a térfogat Goryaev kamra 0,9 m 3, Az oociszták száma megszámláltuk szorozva 1111. Az eredményül kapott szám megfelelő számú oociszták 1 cm3 oldat. Pontosabb meghatározására számításokat kell végezni, legalább háromszor, majd kiadja a számtani középérték. A szükséges mennyiség a fertőzés oociszták bemérjük kalibrált pipetták. Az egyenletes eloszlását oociszták az inkubációs közegben a cső tartalmát kell ismételten rázzuk.
Vörösvértestszámot a Goryaev kamrában
Elv. A pontos mennyiség a vérben -t egyenletesen elkeverünk egy bizonyos mennyiségű folyadékot, és egy kamrába helyezzük egy ismert térfogatú, ahol a pépet elosztott vér egy réteget. Razgrafleno A kamra alján, úgy, hogy a pontos szám a vörösvértestek lehetséges.
Reagensek: 0,9% nátrium-klorid oldat.
Különleges berendezések: mikroszkóp kamera Goryaeva, laboratóriumi kémcsövek vagy kapillárisok gemometra Sali.
Ennek során a meghatározást. Egy tiszta, száraz üvegcsébe hogy 8 ml 0,9% -os nátrium-klorid-oldattal, és a kapilláris pipettával 0, 02 ml vért. Pre-törölje pipettaheggyel vért fúvatunk az aljára a kémcső, és a pipetta alaposan átmossuk, a felső folyadékréteg. A csövek tartalmát jól összekeverjük. Kaptunk vér hígítása 1 400 m. E. Blood hígítjuk 400-szor. Amikor megvastagodása a vér célszerű hígítja a 500, 600, 700, 800-szor.
A kamera és a fedőlemez ki kell mosni és szárazra töröljük. A fedőlemez őrölni kamrába úgy, hogy megjelent fényes gyűrű. Vegyünk egy csepp hígított vért a csövet, és betöltjük a kamrába, ami a szélén a fedőlemez eritrocitából megszámoltuk 1 perc után, miután a kamra töltési kis nagyítás mikroszkóp (lencse x8 szemlencse x10 vagy x 15) a burkolt diafragma vagy csökkentette kondenzátor (egy sötét látómező) .
A vörösvérsejteket megszámoltuk öt nagy (vagy kicsi 80) négyzetek elrendezve átlósan. Vegye figyelembe a vörös vérsejtek, amelyek beleesnek egy kis négyzet, és a bal felső falai. A sejteket a jobb és alsó vonal a tér, nem tekinthető.
Számítás: A megszámolt sejtek száma 80 kis négyzetek szorozva 20000 hígításával vér 1 400 és 25 000 500 hígításban 1 30.000, vagy hígítva 1 600 megszerezni a végeredményt milliók 1 ul. Feltételezzük, hogy a méret egy kis tér 1/4000 ul. A sejtszámláláshoz 1 liter vörösvértestek számát 1 mm-es, még egymillióval megszorozzuk.
Megjegyzés. Nem megengedett a tanulmány a vér rögök; sejtszám közvetlenül a töltés után a kamra (nem vár 1 perc); a használata gyengén mosott és szárított pipetták és kémcsövek, alacsony minőségű reagensek, okozva hemolízis. Ha minden szabályt számlálási hiba átlag ± 2,5% lehet.