Antibiotikumok - stadopedia
Az antibiotikumok fő termelői: actinomycetes, penészgombák, baktériumok. Legfontosabb élőhelyük a talaj. Ahhoz, hogy mikroorganizmusok izolálása képező antibiotikumok figyelembe talajminták, szárítják, légszáraz állapotban, és különleges borítás táptalajon.
Az antibiotikumok fő termelői közül az aktinomyceteseket izolálják olyan szintetikus tápközegeket, amelyek szénforrásként keményítőt vagy glicerint adnak hozzá. Nitrátsókat adunk a táptalajhoz nitrogénforrásként. Ezekben a környezetekben a baktériumok növekedését elnyomják, és a gombák kis számban fejlődnek. Ahhoz, hogy ezek jobbá válhassanak, meg kell savanyítani a tápközeget pH = 4 - 4,5 értékre. Használhat Czapek közegét is, agarizált talajkivonatot.
Az antagonista mikroorganizmusok izolált tenyészetét az antibiotikumok tartalmának megfelelően, gyakorlati célokból vizsgáljuk. Ebben az esetben a kromotográfia módszere meghatározza az ismert antibiotikumok jelenlétét. Ha felfedezni az új antibiotikum, az első hordozzák az elsődleges kiválasztási antibiotikum és a kémiai tisztítás, meghatározza toxicitása vagy kémiai és terápiás tulajdonságokkal állatokban fertőzött kórokozók a különböző betegségek.
Az izolált antibiotikum-törzsek gyakran változóak és instabilak. Ezért a legígéretesebb törzseket kiválasztjuk, majd az indukált mutánsokat kiválasztjuk. A mikroorganizmusokra gyakorolt mutáns hatás a sugárzó energia (UV sugárzás, röntgensugár, neutron stb.) Különböző forrásaival történik.
A mutáns törzseket gazdag táptalajon tenyésztjük. A folyamatot vagy a biomassza koncentrációja, vagy a tápközeg tápanyag koncentrációja figyelemmel kíséri.
Bármilyen antibiotikum molekulájának bioszintézise több enzim részvételével történik - néhány egységtől több tízig. Az enzimek hatásának koordinálása, azaz az enzimatikus reakciók helyes szekvenciájának biztosítása, különböző, nem mindig világos módon.
A mikroorganizmusok (antibiotikum termelők) fejlődése általában kétfázisú.
Az első fázis a fejlesztés (trofofaza vagy fázisban kiegyensúlyozott növekedés) azzal jellemezve, hogy a kultúrában termelő az antibiotikum gyors felhalmozódását a biomassza, kíséri intenzív fogyasztása fő komponensei a hordozó (szénforrások, nitrogén, foszfor, stb), némi csökkenés a közeg pH-ja a képződése termékeket. Az antibiotikum bioszintézise ebben az időszakban nem jelentkezik, vagy elhanyagolható mennyiségben történik.
A második fázis (idiofázis - a kiegyensúlyozatlan növekedés fázisa) a biomassza teljes mennyiségének csökkenésével jellemezhető. A második fázisban a mikroorganizmus fejlődik és új sejtek jönnek létre, de a kultúrában az autolítikus folyamatok dominálnak, ami a biomassza teljes számának csökkenéséhez vezet. A táptalaj a metabolizmus termékeivel és a sejtek autolízis termékeivel gazdagodik, a pH-érték növekszik, az antibiotikum bioszintézisének gyors folyamata megtörténik.
Az antibiotikumok elkészítésének végén a vizsgálati törzsekkel szembeni aktivitás vizsgálata történik.
Az antibiotikumok aktivitását meghatározó módszerek sokak. De a legfontosabbak mikrobiológiaiak.
A mikroorganizmusok növekedésének és fejlődésének megölése vagy gátlása a drog biológiai aktivitását jelenti. E tekintetben különbséget kell tenni az anyagok cidikus és statikus hatásai között. Például az antibiotikumok fungicid, baktericid hatású vagy fungisztatikus és bakteriosztatikus hatásúak.
Az antibiotikum aktivitásának számszerűsítésére egy akciócsoport (ED) fogalmát vezették be. Az izolált antibiotikum aktivitásának meghatározásakor általában referenciaként egy kémiailag tiszta készítményt használnak, amely egy korábban ismert aktivitásértékkel rendelkezik.
Az ED egy bizonyos tömegű antibiotikum aktivitása, amelyet a standardnak tekintünk.
Így a egység penicillin - ez minimális dózis, a hatalmas növekedés a vizsgálati Staphylococcus aureus törzs 50 ml táptalajt. Ha a tiszta kristályos penicillin a Staphylococcus aureus növekedését késlelteti
1. 83000000, majd 1 g antibiotikum 1666000 ED (83000000. 50 = 1666000) vagy 1666 egység 1 mg-ban.
Az antibiotikumaktivitás meghatározását folyékony vagy sűrű tápközegben, valamint az antibiotikum agaros diffúziójában végezzük.
A kontroll mikrobiológiai módszerén kívül kémiai és fiziko-kémiai módszereket is alkalmaznak: kolorimetriás, kromatográfiás, spektrofotometriás módszerekkel.