A cerebrospinalis folyadék mikroszkópos vizsgálata
Ez a cerebrospinális folyadék vizsgálatának egyik legfontosabb szakasza, amely alapján az adatok gyakran igazolódnak vagy megcáfolják a diagnózist.
A formázott elemek számát a cerebrospinális folyadék kivonása után 30 percen belül végezzük, majd a sejtek differenciálódását követően. Leukociták számolásához a hatóanyagot az egyik reagenssel festjük:
Ø 5 ml 10% -os jégecetes oldat + 0,1 metil-ibolya + víz 50 ml-ig - festési idő 2 perc;
Ø Samson reagens: 2,5 ml 1:10 magenta alkoholos oldat + 30 ml ecetsav + 2 g karbonsav + desztillált víz 100 ml-re, festési idő 10-15 perc.
Festett hatóanyag helyezzük Fuchs-Rosenthal kamrában térfogata 3,2 ml. A fehérvérsejtek megszámoltuk egy kis növekedése mind a 256 négyzet, a magas Pleocytosis 200-1000h10 6 / l hisz fele a rács, és az eredményt szorozzuk 2, Pleocytosis fölött 1000h10 6 / l megszámoltuk számos nagy négyzetek, és az eredményt szorozzuk 4. A normál értékek felsorolt sejtszám 1. táblázatban, a különböző típusú patológia - a 2. táblázatban.
Citoszkózis az ágyéki cerebrospinalis folyadékban
A cerebrospinális folyadékban lévő vörösvérsejtek számát a Goryaev számláló kamrában számolják. Ehhez a CSF-et 10-szeres hígítással - 9 rész izotóniás nátrium-klorid oldatot és 1 rész CSF-et keverünk egy kémcsőbe. A kapott folyadékot alaposan összekeverjük, a Goryaev-számláló kamrát megtöltjük, és a vörösvérsejtek számának szabályozása szerint meghatározzuk az eritrociták számát öt nagy négyzetben. Az eritrociták számát 1 μl CSF-ben a következő képlet határozza meg:
ahol A - a vörösvérsejtek száma 5 nagy (80 kicsi) négyzetben, 1/400 - egy kis négyzet térfogata, 10 - a folyadék hígítása, 80 - a kis négyzetek száma.
A Fuchs-Rosenthal kamrában a sejtmag és a citoplazma struktúráit fókuszban festett sejtes és alakos elemekben számolják, ami lehetővé teszi azok megkülönböztetését. 7x40-es növekedéssel értékelik őket. A számlálási eredmények nyilvántartása százalékos vagy numerikus kifejezéssel (liquorgram) lehet. Tekintettel arra, hogy a sejt- és sejtelemek degeneratív változásokon mennek keresztül, hosszú távon a CSF-ben, meg kell állapítani és számolni kell a képződött és sejtes elemeket a festett készítményekben.
A CSF sejtjei teljesen eltérő affinitással rendelkeznek az anyagok színezésére, mint a vérsejtek, ezért a színezékek kiválasztásának másnak kell lennie. A jó eredményeket az alábbi készítmények színezik:
1. Rosina színezése. A CSF-et 7-10 percig centrifugáljuk. A felülúszót leöblítjük, az üledéket zsírtalanított üvegre helyezzük, könnyedén eloszlatjuk az üvegfelületen és 1-2 perc elteltével a folyadék lefolyik. Az üveg függőleges helyzetben van, és szárítószekrényben 40-50 ° C hőmérsékleten szárítjuk, majd az oldatot Romanovsky szerint metanollal és színnel 1-2 percig fixáljuk. A készítményeket a kenet vastagságától függően 6-12 percig festjük. A készítményt desztillált vízzel mossuk és szárítjuk. Ha a magvak halványkék színűek, a kenetet további 2-3 percig festjük.
2. Festés a Wozni-on. A kapott csapadékot centrifugálással, öntjük az üveg enyhén rázogatva egyenletesen elosztva a felszínen. Szárított szobahőmérsékleten egy napon, rögzített 5 percig metanolban. Ezután festettük Azure eozin oldattal (ugyanaz, mint a festés a vért, de hígítottuk 5-szeres) 1 órán át. Ha blednookrasheny sejtek dokrashivaet hígítatlan festék mikroszkóp alatt kontroll 2-10 percig. Minél több alakos elemei a folyadékban, különösen a vér jelenlétét, a hosszabb elszíneződés.
3. Színezés Alekszejev szerint. A szárított, de nem fix alkalmazott hatóanyag 6-10 csepp Romanowsky-Giemsa festék, ugyanaz a pipetta óvatosan szétosztása az egész anyagot, és otthagytuk 30 másodpercig. Ezután hozzáadunk nélkül tinta elvezetését, 12-20 csepp desztillált vizet hőmérsékletre előmelegítjük 50-60 ° C, egy arány 1. 2. Swinging festék készítményt vízzel elkeverjük, és hagyjuk állni 3 percig. Tintasugaras desztillált vízzel öblítjük, szárítjuk szűrőpapírral és a kábítószer-mikroskopiruyut. Az eljárás alkalmas sürgős citológiai vizsgálatra.
A CSF-ben lévő sejtelemek normál értékét a 3. táblázatban mutatjuk be.
A cito-centrifugálás technológiája (citospin). A színes likőr készítmények előállítása az üledékből a centrifugálás után nem mindig teszi lehetővé a vékony réteg kialakulását, amely alkalmas a diagnózisra. Ennek a problémának a megoldása érdekében kifejlesztették a citocentrifugálás technológiáját, amely kiváló minőségű készítmények hardvergyártását foglalja magában. Ehhez a kapott folyadékot tesztelésre és a citokrómába helyezzük, majd a citocentrifuga rotorba függőlegesen elrendezett csúszdákat adagoljuk. A centrifugális erő hatására a sejtek egyenletesen oszlanak el az üvegen, míg a könnyebb folyadékot eltávolítják a hatóanyag felületéről. A készítmény szárítását, rögzítését és színezését a citocentrifugában végezzük. Az eszköz legfeljebb 8 diagnosztikai zónát hozhat létre egy dia számára.
Atipikus kletki gyakran sejtek a központi idegrendszeri daganatok vagy a shell. Ugyanez fordulhat elő krónikus gyulladásos folyamat (tuberkulózisos meningitis, meningoencephalitis, szklerózis multiplex, enkefalomielitisz) - van ependyma sejtek zheludochkovpautinnoy héj, valamint a limfociták, monociták és plazma sejtek sejtmag és a citoplazma változásokat.
Módosított sejtek és sejt árnyékok találhatók a CSF hosszabb expozíciója során. Leggyakrabban az autolízis neutrofil granulociták, arachnoid héj, kamra ependyma sejtjei vannak. A megváltozott sejtek és a cella árnyékainak nincs diagnosztikai értéke.
A liquorokban lévő kristályok ritkán találhatók. 4-5 nappal azután, szubarachnoidális vérzés, traumás agysérülés kimutatható kristályok hemosziderin esetében a bomlási a tumor ciszta tartalmát lehet kimutatni gematoidina kristályok, a koleszterin, a bilirubin, a koleszterin kristályokat szintén keletkezik a központok a zsíros degenerációt, nekrózist az agyszövet és az agy ciszták . Azonosításához kristályok CSF a reakciót a 4. táblázatban látható.
A kristályok folyadékban való kimutatására használt reakciók
A salétromsavban az eltűnő kék szín adódik
A berlini égszínkékre reagálva a sejteket kék és kékre festették
Alkoholban, éterben oldjuk, koncentrált kénsavban megolvasztjuk redundáns vezető vegyületek képződésével
Oldódik kloroformban és lúgban
Elements ehinokokka- horgok scolexes kitines shell töredékek és Echinococcus buborék mutathatók többes echinococcosis agyhártya. Rendkívül ritkák.