Az Aujeszky-féle betegség laboratóriumi diagnosztikája - stadopedia
Aujeszky-féle betegség (AD, pseudorabies, fertőző bulvár bénulás, viszketés pestis, Mad viszketés) - Szivárgó akut betegség a / haszonállatok mindenféle, prémes állatok és a rágcsálók. A primerek az emlősökből stabilak. A fiatal állatok hajlamosabbak a felnőtteknél. A madarak nem érzékenyek. A BA-t az agy és a gerincvelő sérülése, súlyos viszketés és karcolás jellemzi (minden állatfajban, kivéve a sertéseket).
A betegség az összes európai országban, Délen és Észak-Amerikában, Afrikában, Ázsiában enzootikus formában fordul elő és nagy gazdasági károkat okoz.
Az Aujeszky-féle betegség vírusa (BWA) a Herpesviridae család tagja. Alfaherpesvirinae alcsalád. a Varicellavirus nemzetség. Először létre, és leírta a betegség Európában, a magyar tudós A. Aueski a 1902g.AG lehetőségként BWA ustanovleno.Metodom nem keresztezhetik isofluran AG rokonság BWA és egyszerű gerpesa.Virus indukál BHA, KSA, PA.
A diagnózis a járványos adatokon, a betegség tünetein, a patogenetikai változásokon és a laboratóriumi vizsgálatok eredményén alapul.
Alapvető módszerek laboratóriumi diagnosztika: vírusfertőzés, vagy május közvetlen és közvetett immuno RDP-dioimmunvizsgáiat Me-Todd, bőrteszt RN, RAC, ELISA és biológiai vizsgálata.
Vírusos elkülönítés Az anyag elkészítése és elkészítése. Az Aujeszky-féle betegség kórokozójának izolálására az agyat, a tüdőt, a lépet, a májat, a nyirokcsomókat és a mandulákat a halott állatok boncolásából nyerik. A beteg sertések életében a vírus izolálható az orrváladékból, amelyben a betegség 4-6. Napján jelenik meg, és a regenerálódás után 5-11 napig fennmarad. A megszakított állatokból gyümölcsöt és placentát használnak.
Amikor összegyűjtése anyagok virológiai vizsgálatra tisztában kell lenniük az egyenlőtlen a vírus különböző részein az agy, hogy elkerüljék a hibákat diagnózis, meg kell tenni legalább 2-3 minta különböző részein az agy bizonyos távolságban egymástól. Általában, a nyitó kiválasztott kisagydarabokat, medulla oblongata különböző helyekről az agyféltekék a-idegszövet.
Az összegyűjtött anyagot steril penicillin palackokban vagy kémcsövekben helyezik el, és a jéghőmérsékletű laboratóriumba szállítják. Az anyagot 50% -os pufferolt glicerinoldatban (pH 7,2-7,4) lehet megőrizni. Az orrüreg titkait steril pamut törlőkendővel gyűjti össze, melyeket az orrjáratokba injektálnak, majd a Hanks oldatába merítették a tesztcsövekbe. antibiotikumokat tartalmaznak.
A kísérőokmányban információt kell adni az állatok immunizálásáról és az alkalmazott oltóanyagról.
A laboratóriumban az anyagokat a szokásos módszerekkel dolgozzák fel: 10% szuszpenziót készítenek, 3-5 000 fordulat / perc sebességgel centrifugálják 15-30 percig. A glicerinnel megőrzött anyagokat előzetesen leöblítik.
A vírusizoláció nagyobb valószínűségével és a vizsgálati minták számának csökkenésével az agy különböző részeiből származó állatok egy állattól egy közös mintába keverednek, amelyet ezután őröltek, antibiotikumokkal kezeltek és megvizsgálták. A szuszpenzió jobb vírus retenciójának érdekében a normál inaktivált borjúvér borjak 1-2% -át hozzá lehet adni. Használat előtt a szuszpenziót fagyasztva és fagyasztva (mínusz 30 ° C) vagy 4 ° C-on kell tárolni.
Állatok fertőzése. Ami laboratóriumi modell Aujeszky vírusizolálás patológiás anyagok általában két súlyú nyulak 2-2,5 kg, amelyet intramuszkulárisan vagy szubkután 1 ml 10% -os szuszpenzió a vizsgált anyag. Az inkubálási idő ebben az esetben 36-48 óráig tart, néha 4-6 napig, és néhány esetben legfeljebb 12 napig is eltarthat.
Tüntessük el az encefáliát. meningeal, paralytic, zudnevuyu és törölt formák a betegség. A kísérleti fertőzés folyamata, de nagymértékben függ a fertőzés módjától.
Az encefalitikus forma szorongással kezdődik. halad egy erős izgatottság, - pet fut körbe a ketrec-idegesen oglya dyvayas megjegyezte, mydriasis, lefagy vagy fül, fogcsikorgatás, túlzott kiáramlását a nyál a szájában. Gerjesztés helyébe depresszió - a betegek nyúl az oldalára fekszik, vagy a gyomor, hátsó lábat nyújtva gyakran, amikor megpróbál az állatok elvesztik egyensúlyát és elesik. A halál az izgalom vagy az elnyomás támadásának időszakában történik; A halált gyakran megelőzi a végtagok bénulása.
A Zune-forma leginkább a nyulak esetében az anyag intramuszkuláris vagy szubkután injekciójával. A 2-3 napos inkubációs időszakban az állatokban pozitív esetekben az inokuláció helyén erős viszketés következik be. Kezdetben általános aggódás figyelhető meg, az állat gyakran megrémül, visszanézve az anyag bevezetésének helyére, majd elkezd nyalogatni és kivonni a gyapjút ezen a területen. Gyakran megfigyelhető, hogy egy nyúl, keserűséggel, ráncolja a bőrt és az izomszöveteket az injekció beadásának helyén. Néha viszketést észlelnek a test más részein, ami különösen súlyos szorongáshoz vezet. A nyúl az oldalára esik, és hirtelen elpusztul, a bénulás fejlődése nélkül, vagy röviddel a halál előtt jelennek meg.
A meningeal formát az erős gerjesztés, a fogak kaparása és az opisthotonus jellemzi. Az állat az oldalára esik, és klónozott rohamok jelenlétében hal meg. Azonban a meningeal borítékok boncolásakor makroszkóposan néha nem észlelhető gyulladásos nyomok. Ezeket csak hisztológiailag lehet kimutatni (limfocitikus meningitis nyomai).
Az Aujeszky-féle betegség homályos és villámgyors formáinak köszönhetően a nyulak nagy része nem mutat a betegség tüneteit. Általában éjjel meghalnak. Este a halál előestéjén az állat teljesen normálisnak tűnik, és reggel egy jellegzetes pozícióban találja meg a holttestét - az oldalán.
A biológiai tesztekkel tekintjük pozitívnak, ha a nyulakat megöljük Klinikailag-lefölözött jelei az Aujeszky-féle betegség (idegi klinika, viszketés, karcolás) 2-10 nappal a beoltás után egy szuszpenziót a kórbonctani anyag. Ha a nyulak az Aujeszky-féle betegség jelei nélkül halnak meg, a biológiai vizsgálatot megismételjük az első passzázs patológiás anyagával. Úgy gondolják, hogy az anyagnak a nyúl szem elülső kamrájába való beoltása a betegség egy jellegzetes zudiform alakját eredményezi. Az agy és a gerincvelő szövetei, valamint a parenchyma-totikus szervek (tüdő, máj) szolgálnak a vírus izolálásához a holt nyulakból. A halála nyulak beadása után a patológiai-ügynökség a sertésekből származó anyagok vagy prémes állatok semmi jelét nem viszketés és a karcolás jelezheti kiosztási vakcinatörzsek wergild SA Aujeszky-féle betegség.
Kimutatták, hogy a sejttenyészetek az Aueş-ki vírusra érzékenyek, mint a nyulak; ráadásul felhasználhatók a betegség atipikus úton történő laboratóriumi diagnózisára is, ahol a sertések agyában a vírus fertőzésével végzett kísérletek a vírus fertőzésével negatív vagy atipikus eredménnyel járnak.
A sejttenyészet fertőzése. A vírusizolálás elhullott, megbetegedett sertés és nyúl általánosan használt primer tenyészetek tripszinizáljuk vesében és pajzsmirigyben sertés sejtek, vetőmag-ing borjak, csirkeembrió-fibroblasztok, transzplantálható vonal PK-15, BHK-21. A vírus számára a sertés és a szarvasmarhák vese első szakaszának szubkultúrái rendkívül érzékenyek.
Amikor egy vírus eredetileg izolálódik patológiás anyagból, jobb, ha a vizsgálati csöveket forgó dobba helyezi, ami segít a lerövidülési időben a cytopatogén hatás megjelenésének. Az utolsó kémcső azonosítása 5 napig naponta mikroszkóp alatt. Az 5. napon végzett citopátiás változások hiányában a tenyészeteket egyetlen fagyasztás és felolvasztásnak vetjük alá, és ismételt átjutást hajtunk végre. Minden anyag 3-5 alkalommal halad át.
A vírus primer elkülönítésével a citopatogén hatás tünetei a tenyészet beoltása után negyedik és ötödik napon jelentkeznek. A következő szakaszokban a CPD megjelenésének időzítése 15-20 órára csökken, és egyre hangsúlyosabbá válik. A különböző kultúrákban a citopátiás változások jellege nem feltétlenül azonos, a vírus epitheliális és fibroblasztikus sejtjeinek különböző hatásai miatt. A vesesejtek, sertés, sertés vagy nyúl embrió tenyészetében a vírus citopatogén hatásai kifejeződnek a syncytium kialakulásában. Kezdetben kerekített sejtek tűnnek fel, amelyek határai eltűnnek; és a magok a központba költöznek és konglomerátumokat alkotnak, amelyeket egy közös héj veszi körül. Néhány óra múlva ezeknek a sejteknek a csoportjai gömb alakúak, a citoplazmában szemcsésnek tűnnek. Ezután a cellák felületének bőséges hámlását okozzák.
A kultúra fibroblaszton citopatogén hatás a vírus úgy tűnik, hogy kerekítése sejtek és megjelenése szemcseképződés vakuólum-TION citoplazma majd leválása sejteket a felszínről az üveg. A vírus titerei a CPD maximális kifejlesztésének időszakában általában 10,5 -10,5 TCD 50 / ml értéket érnek el.
Az Aujeszky-féle betegség diagnózisa akkor történik, ha a sejtkultúrában izolált vírushoz tartozó faj a PH-ben meg van erősítve. A vírus viralent törzsei jellegzetes szimplasztokat alkotnak. A csirke-fibroblasztok tenyészetében sokszor passziváit törzsek kevésbé expresszálják a szimplaszták kialakulását és a sejtproliferációt. A csirkeembriók fibroblasztjai tenyészetében átadott törzsek 10-50 alkalommal csökkentik virulenciájukat.