Aujeszky-féle betegség laboratóriumi diagnózisa
Aujeszky-féle betegség (AD, pseudorabies, fertőző bulvár bénulás, viszketés pestis, Mad viszketés) - Szivárgó akut betegség a / haszonállatok Sun ?? ex fajok prémes állatok és a rágcsálók. A primerek az emlősökből stabilak. A fiatal állatok hajlamosabbak a felnőtteknél. A madarak nem érzékenyek. Az AD a jelei elváltozások az agy és a gerincvelő, a súlyos viszketés és a karcolás (a Sun ?? ex eltérő fajok sertés ?? s).
A betegség az összes európai országban, Délen és Észak-Amerikában, Afrikában, Ázsiában enzootikus formában fordul elő és nagy gazdasági károkat okoz.
Az Aujeszky-féle betegség vírusa (BWA) a Herpesviridae család tagja. Alfaherpesvirinae alcsalád. a Varicellavirus nemzetség. Először létre, és leírta a betegség Európában, a magyar tudós A. Aueski a 1902ᴦ.AG lehetőségként BWA ustanovleno.Metodom nem keresztezhetik isofluran AG rokonság BWA és egyszerű gerpesa.Virus indukál BHA, KSA, PA.
A diagnózis a járványos adatokon, a betegség tünetein, a patogenetikai változásokon és a laboratóriumi vizsgálatok eredményén alapul.
A laboratóriumi diagnosztika legfontosabb módszerei: vírusizoláció, közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia, RDP, radioimmunológiai módszer, bőrpróba, pH, RSK, ELISA és biológiai vizsgálat.
A vírus izolálása Az anyag felvétele és elkészítése. Az Aujeszky-féle betegség kórokozójának izolálására az agyat, a tüdődarabokat, a szelént, a májat, a nyirokcsomókat és a mandulákat a halott állatok boncolásából nyerik. A sertésbetegek életében a vírus az orrváladékból izolálható, amely a betegség 4.-6. napján jelenik meg, és a regenerálódás után 5-11 napig fennmarad. A megszakított állatokból gyümölcsöt és placentát használnak.
Amikor összegyűjtése anyagok virológiai vizsgálatra figyelemmel kell lennie a nem egyenletesen oszlik el ?? enii vírus különböző agyi területeken, ebben az összefüggésben, hogy elkerüljék a hibákat diagnózis, meg kell tenni legalább 2-3 minta különböző részein az agy bizonyos távolságban egymástól más. Általában a disszekció során kiválasztják az agyi félgömbök különböző részeiből a kisagyat, a hosszúkás agyat.
Az összegyűjtött anyagot steril penicillin palackokba vagy vizsgálati csövekbe helyezzük és a laboratóriumba egy thermos palackba szállítjuk. Az anyagot 50% -os pufferolt glicerinoldatban (pH 7,2-7,4) lehet megőrizni. Az orrüreg titkait steril pamut törlőkendővel gyűjti össze, melyeket az orrjáratokba injektálnak, majd a Hanks oldatába merítették a tesztcsövekbe. antibiotikumokat tartalmaznak.
A kísérőokmányban rendkívül fontos, hogy tájékoztatást nyújtsanak az állatok immunizálásáról és az alkalmazott vakcinákról.
A laboratóriumban az anyagokat a szokásos módszerekkel dolgozzák fel: 10% szuszpenziót készítenek, 3-5 000 fordulat / perc sebességgel centrifugálják 15-30 percig. A glicerinnel megőrzött anyagokat előzetesen leöblítik.
A vírusizoláció nagyobb valószínűségét és a vizsgált minták számának csökkenését az agy különböző részeiből származó állatok egy államból egy közös mintába keverednek, amelyet ezután földeltettek, antibiotikumokkal kezeltek és megvizsgálták. A szuszpenzió jobb vírus retenciójának érdekében a normál inaktivált borjúvér borjak 1-2% -át hozzá lehet adni. Használat előtt a szuszpenziót fagyasztva és fagyasztva (mínusz 30 ° C) vagy 4 ° C-on kell tárolni.
Állatok fertőzése. Laboratóriumi modellként az Aujeszky vírus patológiás anyagokból való izolálására általában 2-2,5 kg súlyú nyulakat alkalmaznak, amelyeket intramuszkulárisan vagy szubkután injektálnak 1 ml 10% -os szuszpenzióval a vizsgált anyaggal. Az inkubálási idő ebben az esetben 36-48 óráig tart, néha 4-6 napig, és néhány esetben legfeljebb 12 napig is eltarthat.
Tüntessük el az encefáliát. meningeal, paralytic, zudnevuyu és törölt formák a betegség. A kísérleti fertőzés folyamata, de nagymértékben függ a fertőzés módjától.
Az encefalitikus forma szorongással kezdődik. amely erős izgalomba fordul - az állat a ketrec körül fut, félelmetesen körülnézve, a pupillák dilatációja, a fülek lógása, a fogak köszörülése, a szájban lévõ nyál nagy áramlása jellemzi. Az izgalmat helyettesíti a depresszió - a beteg nyulak fekszenek az oldalukon vagy a hasukon, hátsó lábuk gyakran meghosszabbodik, amikor megpróbálnak felállni, elveszítik egyensúlyukat és esnek. A halál az izgalom vagy az elnyomás támadásának időszakában történik; A halált gyakran megelőzi a végtagok bénulása.
A Zune-forma leginkább a nyulak esetében az anyag intramuszkuláris vagy szubkután injekciójával. A 2-3 napos inkubációs időszakban az állatokban pozitív esetekben az inokuláció helyén erős viszketés következik be. Kezdetben általános aggódás figyelhető meg, az állat gyakran megrémül, visszanézve az anyag bevezetésének helyére, majd elkezd nyalogatni és kivonni a gyapjút ezen a területen. Gyakran megfigyelhető, hogy egy nyúl, keserűséggel, ráncolja a bőrt és az izomszöveteket az injekció beadásának helyén. Néha viszketést észlelnek a test más részein, ami különösen súlyos szorongáshoz vezet. A nyúl az oldalára esik, és hirtelen elpusztul, a bénulás fejlődése nélkül, vagy röviddel a halál előtt jelennek meg.
A meningeal formát az erős gerjesztés, a fogak kaparása és az opisthotonus jellemzi. Az állat az oldalára esik, és klónozott görcsökkel meghal. " Ugyanakkor a meningeal borítékok boncolásakor makroszkóposan néha nem észlelhető gyulladásos nyomok. Az Οʜᴎ csak szövettani (nyomokban lymphocytás meningitis).
Az Aujeszky-féle betegség homályos és villámgyors formáinak köszönhetően a nyulak nagy része nem mutat a betegség tüneteit. Általában éjjel meghalnak. Este a halál előestéjén az állat teljesen normálisnak tűnik, és reggel a saját testét - az oldalán - találja meg.
A biológiai tesztekkel tekintjük pozitívnak, ha a nyulakat megöljük Klinikailag-lefölözött jelei az Aujeszky-féle betegség (idegi klinika, viszketés, karcolás) 2-10 nappal a beoltás után egy szuszpenziót a kórbonctani anyag. Ha a nyulak Aujeszky-féle betegség jelei nélkül halnak meg, a biológiai vizsgálatot megismételjük az első passzázs patológiás anyagával. Úgy gondolják, hogy az anyagnak a nyúl szem elülső kamrájába való beoltása a betegség egy jellegzetes zudiform alakját eredményezi. Anyag felszabadító ?? eniya vírus halott nyulak az agy és a gerincvelő szövet és parenchyma-toznye szervek (tüdő, máj). A halála nyulak beadása után a patológiai-ügynökség anyag sertés ?? s, vagy prémes állatok semmi jelét nem viszketés és a karcolás jelezheti visszanyert ?? enii vakcinatörzsek wergild SA Aujeszky-féle betegség.
Kimutatták, hogy a sejttenyészetek érzékenyek az Aueş-ki vírusra, mint a nyulak; az atipikus betegségek laboratóriumi diagnózisára is használják, ahol a sertések fertőzésével a vírus kimutatására irányuló kísérletek negatív vagy atipikus eredménnyel járnak.
A sejttenyészet fertőzése. A eniya kinyert vírus ?? halott, beteg sertés és nyúl ?? s általánosan használt primer tenyészetek tripszinizáljuk vesében és pajzsmirigyben Ezy des ?? s ?? sertés sejtek, vetőmag-ing borjak, csirkeembrió-fibroblasztok, transzplantálható vonal PK-15, BHK-21. Ahhoz, hogy a vírus nagyon szubkultúra első járat vese ragasztó-áram ?? Enka malacok és szarvasmarhák.
Amikor a vírust először kórokozó anyagból szabadítják fel, jobb, ha a vizsgálati csöveket egy forgó dobba helyezi, ami segít a lerövidülni a citopatogén hatás megjelenésének időzítésében. Az utolsó kémcső azonosítása 5 napig naponta mikroszkóp alatt. Az 5. napon végzett citopátiás változások hiányában a tenyészeteket egyetlen fagyasztás és felolvasztásnak vetjük alá, és ismételt átjutást hajtunk végre. Minden anyag 3-5 alkalommal halad át.
A vírus elsődleges elosztása során a citopatogén hatás jelei a tenyészet beoltását követő 4. és 5. napon jelentkeznek. A következő szakaszokban a CPD megjelenésének időzítése 15-20 órára csökken, és egyre hangsúlyosabbá válik. A különböző kultúrákban a citopátiás változások természetének különbözőnek kell lennie, ami a vírus különböző hatásainak köszönhető a hámsejtek és fibroblaszták sejtjein. A vesesejtek, sertés, sertésembrió vagy nyúl tenyészetében a vírus citopatogén hatásai kifejeződnek a syncytium kialakulásában. Kezdetben kerekített sejtek tűnnek fel, amelyek határai eltűnnek; és a magok a központba költöznek és konglomerátumokat alkotnak, amelyeket egy közös héj veszi körül. Néhány óra múlva ezeknek a sejteknek a csoportjai gömb alakúak, a citoplazmában szemcsésnek tűnnek. Ezután a cellák felületének bőséges hámlását okozzák.
A csirkeembrió-fibroblasztok tenyészetében a vírus citopatogén hatása a sejtek kerekítésében, a citoplazma granularitásának és vacuolálásának megjelenésével, majd a sejt felszínének leválasztásával történik. A vírus titerei a CPD maximális kifejlesztésének időszakában általában 10,5 -10,5 TCD 50 / ml értéket érnek el.
Az Aujeszky-féle betegség diagnózisát akkor végezzük, ha a PH-ben a sejttenyészetben izolált vírushoz tartozó fajokat megerősítjük. A vírus viralent törzsei jellegzetes szimplasztokat alkotnak. A csirke-fibroblasztok tenyészetében sokszor passziváit törzsek kevésbé expresszálják a szimplaszták kialakulását és a sejtproliferációt. A csirkeembriók fibroblasztjai tenyészetében átadott törzsek 10-50 alkalommal csökkentik virulenciájukat.