Korlátozás - biotechnológiai felhasználás
Genetikai mérés enzimjei
korlátozás
A restrikciós enzimek (restrikciós endonukleázokkal, restrikciós endonukleázok) - olyan enzimek, amelyek felismerik és megtámadják bizonyos nukleotid szekvenciák a DNS-molekula (restrikciós helyek).
1953-ban fedezték fel, hogy a DNS-t egy adott törzs az E. coli, juttathatjuk be a sejtekbe egy másik törzs (például DNS-törzs B - a törzs sejtjeinek C) nem mutat, mint egy szabály, génaktivitás leggyorsabban szét kisebb fragmensek.
1966-ban azt is kimutatták, hogy ez a jelenség kapcsolódik egy adott gazda-DNS módosítása - tartalmaz több metilezett bázisok hiányoznak módosítatlan DNS, a metilezés (hozzátéve, hogy a bázis a metil-csoport) után történik replikáció befejeződött. Baktériumok képesek megkülönböztetni a saját DNS minden betörő „idegen” ez annak módosítás típusát. A "címke" megfelel a metilezést módosító enzimeknek, úgynevezett DNS-metilázoknak. A különbség a módosítását teszi az idegen DNS az érzékeny a restrikciós enzimek, amelyek felismerik a hiánya metilcsoportok saját oldalakat.
A restrikciós és módosító rendszerek baktériumok széles körben elterjedtek; létük fontos szerepet játszik abban, hogy a rezidens DNS-t külföldi eredetű szekvenciákkal szennyezzék.
A restrikciós enzim, amely hasítja a nem metilált DNS-t izoláltunk az 1968-ban, Meselson és Yuan. Ez az enzim nagymértékben specifikus volt kapcsolatban egy adott DNS-szekvencia, de hasítja a molekula nem-specifikusan, máshol bizonyos távolságra a felismerési hely. Hamarosan, 1970-ben Mr. Smith és Wilcox izolált Haemophilus influenzae első restrikciós enzim, amely hasítja a jól meghatározott DNS-szekvencia (Hind III). Mivel a különböző baktériumok különbözőképpen jelzik a DNS-jüket, akkor a restrikciós enzimeknek különböző szekvenciákat kell felismerniük. Valóban, azóta azonosítottak olyan restrikciós enzimeket, amelyek több mint 150 restrikciós helyet ismertek (DNS hasítási helyek).
A fejezet egyéb fejezetei: