Citokinek, szerepük az immunválaszban
A citokinek kis peptid információs molekulák. Ezek szabályozzák a sejt-sejt és a rendszerek közötti kölcsönhatások, meghatározzák a sejt túlélését, stimulálása vagy gátlása a növekedés, a differenciálódás és a funkcionális aktivitását apoptózis, és szintén rendelkeznek a következetesség fellépés az immunrendszer, idegrendszer és az endokrin rendszer normál körülmények között, és válaszul a kóros hatásokat.
A citokin felszabadul az A sejt felszínére, és kölcsönhatásba lép a szomszédos B sejt receptorával. Így az A-sejtről a B-sejtre olyan jelet továbbítanak, amely további reakciókat vált ki a B. sejtben. A citokinek nagyon alacsony koncentrációban aktívak. A sejtekre gyakorolt biológiai hatásuk a sejtcytoplazmatikus membránon található specifikus receptorral való kölcsönhatás révén valósul meg. A citokinek kialakulása és szekréciója röviden és szigorúan szabályozott, minden citokin, és most több mint 30 közülük ismeretes, több független csoportra oszlik, strukturális jellemzőik és biológiai hatásuk alapján. A citokinek csoportosítása a hatásmechanizmus révén lehetővé teszi számunkra, hogy a citokineket a következő csoportokba soroljuk:
gyulladásos, gyulladásos válasz mobilizálásához (interleukin 1,2,6,8, TNF # 945; interferon # 947;);
gyulladáscsökkentő, a gyulladás kialakulásának korlátozására (interleukin 4,10, TGF # 946;);
a sejtes és humorális immunitás szabályozói - (természetes vagy specifikus), saját effektor funkciójukkal (vírusellenes, citotoxikus).
A citokinek biológiai aktivitásának spektruma jelentős mértékben átfedésben van: ugyanazt a folyamatot a sejtben egynél több citokin stimulálhatja. Sok esetben szinergizmus figyelhető meg a citokinek hatásaiban. A citokinek antigénspecifikus faktorok. Ezért a fertőző, autoimmun és allergiás betegségek specifikus diagnosztikája a citokinek szintjének meghatározásával nem lehetséges. De a koncentrációjuk meghatározása a vérben ad információt a különböző típusú immunkompetens sejtek funkcionális aktivitásáról; a gyulladásos folyamat súlyosságáról, a szisztémás szintre való áttérésről és a betegség prognózisáról.
A citokinek szabályozzák hormonális aktivitását a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese tengely: [1], például, az interleukin-1 által ható hipotalamusz, CRH fokozza a szintézis, ami viszont növeli az ACTH.
A fertőző betegségek (valójában immunrendszer, szerológiai, allergiás) immunológiai diagnózisának módszerei, azok célja, az eredmények értelmezése.
A szerológiai módszer. Szerológiai vizsgálatok alapulnak fiziologichekom jelenség - a kialakulását a szervezetben, szérum antitestek válaszul belépő a test egy idegen fehérje (antigén) - baktériumok, vírusok, módosított testszövetekben. A szerológiai vizsgálatok a gyakorlatban a bakteriális, vírusfertőzések, a szervezet immunrendszere zavarai, köztük a szexuális úton terjedő fertőzések diagnosztizálására szolgálnak.
Valójában az immunrendszer.
1. A C-reaktív fehérje szintjének meghatározása. C-reaktív protein - protein akut fázisú gyulladás kapcsolatos béta-globulin. C-reaktív protein, valamint más akut-fázisú gyulladásos fehérjék megjelenik a szérumban röviddel azután, szöveti károsodás és a gyulladás megjelenése. Enhancement a C-reaktív protein megfigyelt akut bakteriális és virális fertőzések, szívinfarktus, rosszindulatú betegségek és autoimmun betegségek (lásd. Ch. 15, p. II.b).
2. A hideg agglutininek titerének meghatározása. A hideg agglutinin IgM, amely a maximális eritrocitagglutinációt 4 ° C-on okozza. Néhány betegségben, például mycoplasma-tüdőgyulladásban, kevésbé influenzával, adenovírusfertőzéssel és egyéb akut légzőszervi megbetegedésekkel, valamint alvási megbetegedésekkel járnak hideg agglutininek. Diagnosztikailag szignifikáns a hideg agglutininek kimutatása 1: 1-es titerben, vagy négyszeres növekedése a titerben 7-14 napon belül.
3. Az agglutináló antitestek titerének meghatározása. A patogén agglutináló antitestek számos fertőző betegségben jelentkeznek a szérumban: szalmonellózis, paratyphoid, brucellózis, tularemia, rickettsiosis és mások. Ezen antitestek titerét az inaktivált baktériumok agglutinációs reakciójában határozhatjuk meg, ha különböző szérumhígításokat adunk hozzá. A kutatás szérumát általában kétszer gyűjtik össze: a csúcs és a helyreállítás alatt (10-21 nap elteltével). Az antitest titerének négyszeres növekedését diagnosztizálják.
4. A reakciót Neifel'd - duzzadás a sejtfalak baktériumok hatására antitestek típusspecifikus kapszuláris poliszacharidok, látható fénymikroszkóp alatt. Ez a reakció is megfigyelhető hozzáadásával ellen irányuló antitestek sejtfal poliszacharidokat Haemophilus influenzáé, Streptococcus pneumoniae és Neisseria meningitidis (szerotípus A és C), ezek a baktériumok. A Neufeld reakcióját a szérum és a CSF tanulmányozására használják.
5. A gerincvelő amebociták (Limulus polyphemus) líceumával való reakcióját a fertőzés, különösen a szepszis és a Gram-negatív baktériumok okozta meningitis diagnosztizálására használják. A módszer arra a tényre épül, hogy bakteriális endotoxinok hozzáadásakor a kard amoebociták folyékony lizája géllé alakul.
23. Immunológiai reakciók a fertőző betegségek diagnózisában. Agglutinációs reakció, variánsok, mechanizmus. Immunterheléses reakciók (RNGA). Agglutináló szérumok, diagnosztikumok, aktív hatóanyaguk, hatásmechanizmusuk, alkalmazási területeik.
Az agglutinációs reakcióra épülő módszerek meglehetősen érzékenyek, és a sejtek vagy részecskék felületén lévő antigének azonosítására és az ilyen antigének elleni antitestek félig kvantitatív meghatározására szolgálnak. A módszerek lényege a következő: ha antigénnel bevont sejteket vagy részecskéket kötünk, akkor nagy aggregátumok képződnek antitestekkel. A sejtfelszíni antigénekre vagy a részecskék felületére adszorbeált antigénekre vonatkozó titer meghatározásához ismert számú sejtet vagy antigénnel bevont részecskéket keverünk a vizsgálati minta, például a szérum különböző hígításaiból.
1. A közvetlen agglutinációs reakciót mikrobák vagy vérsejtek felületi antigének detektálására és ezen antigének elleni antitestek kimutatására használják. A módszer a következő: sorozathígításaival a vizsgálati minta (például szérum) összekeverünk sejteket az ellenanyag titerét ennek reciprokát a legnagyobb hígítás szérum okozó agglutináció. Ez a módszer sokkal érzékenyebb, mint a csapadékalapú módszerek, mivel egyenlő antigén koncentráció mellett az agglutinátum térfogata nagyobb, mint a csapadék térfogata. Az agglutinációs reakció hőmérséklet-független, hacsak nem a hideg agglutininek, amelyek hatékonyabbak 37 ° C alatti hőmérsékleten.
2. A közvetett agglutinációs reakció az antigénnel bevont vörösvérsejtek, más sejtek vagy részecskék (pl. Latex vagy bentonit) agglutinációján alapul. Az antitest titer meghatározásához a szérum sorozatos hígítását fiziológiás sóoldatban összekeverjük ismert mennyiségű antigénnel bevont sejtekkel vagy részecskékkel. A közvetett agglutinációs reakció érzékeny módszer, amely lehetővé teszi az oldható antigének alacsony koncentrációban történő meghatározását.
Agglutináló szérumok, különböző állatok szérumai, amelyek képesek agglutinációs reakciókat okozni.
24. Csapadék reakciója, változatai, mechanizmusa, alkalmazási területe. Szérumok kicsapása, előállítása és titrálása.
A kicsapási reakció egy finoman diszpergált oldható antigén kicsapódása antitestek hatásával elektrolit jelenlétében. A reakció nagyon nagy
érzékeny az antigénre, lehetővé teszi az antigén szó szerinti nyomainak felismerését és azonosítását. A készítmény változatai: gyűrű-kicsapási reakció, csapadék reakció gélen (agar). RP módosításai: immunoelektroforézis, radiális immunodiffúzió Mancini szerint, immunblotálás. A kicsapási reakciót alkalmazzuk az antigén feltárására és azonosítására a vizsgált anyagban. Az ISH széles körben elterjedt az igazságügyi orvosi vizsgálat során, és meghatározza a biológiai folyadékok foltjának a fehérjéhez tartozó fajokhoz való tartozását. A mikroorganizmusok tenyészetének toxigénségét (a diftéria, a staphylococcus toxikózis diagnózisának) meghatározása során az RP agarban alkalmazzák. Manciniben a radiális immunodiffúzió módszere a vérszérum különböző immunglobulin-osztályainak meghatározására szolgál. Az immun-elektroforézist a vérszérum fehérjefrakcióinak meghatározására használják. A szérum kicsapódását a nyulak bakteriális antigénekkel, kivonataival és toxinjaival történő immunizálásával nyerik. A kicsapódó szérum titere a maximális antigénhígítás, amelynél a kicsapási reakció bekövetkezik. A precipitáló szérumokat magas titerrel állítják elő - legalább 1: 100 000. Ez annak köszönhető, hogy a kicsapási reakcióban meghatározott antigén finoman diszpergált szerkezetű, és nagyobb mennyiségben tartalmazhatja a térfogata egységét, mint azonos mennyiségű szérum-antitestben.
A fertőző betegségek (antrax, pestis, tularémia, diftéria, és
stb.), a krónikus orvosi vizsgálatnak a fehérje fajazonosságának meghatározására, a szájüregi gyakorlatban a fehérjetermékeknek a termékekben való megfelelőségének kimutatására (ha feltételezzük, hogy hamisítanak).
25. Immun lízis (bakteriolízis, hemolízis) reakciója. A reakció komponensei, gyakorlati alkalmazás.
A specifikus AT, amely a sejtek lízisét (feloldódását) okozza, lizineknek nevezzük. Ezeket az antitesteket bakteriolizineknek nevezett baktériumokra, eritrocitákra - hemolizinekre alkalmazzák.
A lizinok csak a komplement jelenlétében mutathatják ki a lizáló hatást a magas vérnyomásra, amely szerves része a friss savónak.
Így a lízis reakció három összetevő kölcsönhatásán alapul:
1) korpuszkuláris magas vérnyomás (bakteriális sejtek, eritrociták és más sejtek);
2) specifikus AT immunszérum (bakteriolizinek, hemolizinek stb.);
3) komplementum (tengerimalac szérum).
Kezdetben a reakció az agglutinációs típus szerint folytatódik, majd komplementet adunk az AG-AT komplexhez. Megérkezik a komplement komponensek aktiválása, ami sejtek líziséhez vezet (AH).
A mikrobiológiai diagnózis során a bakteriolízis reakciót a következőkre használják:
1) az ismeretlen mikroba típusának specifikus szérum általi meghatározása;
2) meghatározzuk a bakteriolizinek jelenlétét a vizsgált szérumban egy ismert mikrobának.
A vizsgált szérum a benne lévő komplementer elpusztítása érdekében 56 ° C-on 30 percig inaktiválódik.
A bakteriolizinek hatása a komplement jelenlétében a mikroorganizmusok elveszítik a mobilitást, megváltoztatják az alakját (duzzadják), szétesnek és végül teljesen feloldódnak.
A bakteriolizin reakciót kolerában használják a vibrók azonosítására (r. A vibriók kolóraszerákkal való immobilizálása) és meghatározzák a vibríolizineket a szérumban; szifilisz (r., treponem immobilizáció), leptospirosis (agglutinációs lízis); ismétlődő tífusz esetében serodiagnosis (lízis) céljából.
Hemolízis reakció. Hatása alatt a reakciók az AT-E a komplement jelenlétében eritrociták zavaros szuszpenziót válik egy fényes vörös, átlátszó folyadék - „lakk vér” miatt a hemoglobin felszabadulását. A hemolízis-reakciót a komplementkötés diagnózisának (RCC) indikátoraként alkalmazzuk a komplement és a hemolitikus szérum titrálásához.