A kutatási anyagok feltöltése
A kutatási anyagok feltöltése. A drogok blokkjai
A vágás megkönnyítése érdekében a szöveteket általában szilárd közegbe öntik. Ahhoz, hogy a mikrotom előállításához vékony szakaszokat, rögzítéséről szöveti alapozás után kell impregnált anyagok, amely nekik szilárd állaguk. Paraffin és műanyag gyantákat használnak öntő anyagokként. A paraffint általában fénymikroszkópiára, gyantára használják - mind fény-, mind elektronmikroszkópiára.
A paraffinba öntés folyamata. vagy szöveti impregnálással, két fő szakasz lépett elő: dehidráció (dehidratálás) és fehérítés. Mielőtt szakadó darabokat kivesszük a vízből, kezdetben helyezve azok egymást követően, lépcsős sor etil-alkohol elegy (etanol) és víz (általában 70% és 100% etil-alkohol).
Az etanolt ezután oldószerrel helyettesítjük. amely képes keverni az öntőközeggel. Amikor paraffinba öntjük, általában xilolt használunk ilyen oldószerként. Mivel a szöveteket egy oldószerrel impregnálják, általában átlátszóvá válnak (megvilágosodás). Egy szövetdarabot oldószerrel impregnálva a termosztátot az olvadt paraffinba helyezzük, rendszerint 58-60 ° C-on.
Hőhatás hatására az oldószer elpárolog, és a szövetekben lévő helyeket paraffinnal helyettesítik. A termosztátból való eltávolítást követően a szövet és a paraffin, amely impregnálja, meggyűrűsödik. Szövetek, hogy öntjük a műanyag gyanta, és etanollal dehidratáltuk, és attól függően, hogy milyen típusú gyantával impregnált műanyag több oldószert. Az etanolt vagy oldószereket ezután olyan műanyag oldatokkal helyettesítik, amelyek térhálósító polimerekkel megszilárdulnak.
A műanyag masszába való öntés megakadályozza a kompressziót, ami a paraffinba való öntéshez szükséges magas hőmérsékleteket eredményezi, és jelentősen jobb eredményeket ad.
Szilárd tömbök. szöveteket tartalmaz. mikrotomban keverjük össze; Ennek eredményeként a vágás acél vagy üveg mikrotom borotva (blade) vastagságú metszeteket készítettünk 1 - 10 mikron. Nem szabad elfelejteni, hogy 1 mikrométer (1 mikron) = 0,001 mm = 10-6 m; 1 nanométer (1 nm) = 0,001 mikron = 10-6 mm = 10-9 m. Ezután a metszeteket vízbe helyeztük, és át tárgylemezre festéshez.
A szövettani szakaszok teljesen eltérő módszerrel történhet a szövetek gyors fagyasztásával. Ebben az esetben a szöveteket fagyasztással rögzítik (fizikailag, nem kémiailag), és ugyanakkor keményekké válnak, ezért le lehet vágni. Mikrotom fagyasztás - kriosztát (görög kryos - hideg + statos - telepítés) - fagyasztott szövetek vágásához.
Mivel ez a módszer lehetővé teszi a színes szakaszok gyors előkészítését (néhány percen belül), rendszerint kórházakban használják a szövetminták vizsgálatát sebészeti beavatkozások során. A fagyasztott szövetek szintén jó hatást fejtenek ki nagyon érzékeny enzimek vagy kis molekulák hisztokémiai vizsgálata során, mivel a fagyasztás nem képes inaktiválni az enzimek többségét.
Annak a ténynek köszönhetően, hogy a szövetek oldószerekkel, például xilollal való feldolgozása során a szövetek lipidjeit feloldják, akkor javasolt a fagyasztott részek alkalmazása, ha szükséges a vegyületek vizsgálata.