Az escherchiózis mikrobiológiai diagnózisának módszerei
Kutatás anyaga: széklet, élelmiszer maradványok, hányás, gyomornedzés, vizelet, genny, fülszétválasztás, likőr, vér, szekcionált anyag, környezetből származó mosók.
A laboratóriumi diagnosztika módszerei:
1) Bakteriológiai - alap
Az anyag bakteriológiai vizsgálatának rendszere
- Az anyagot Gram-ból festették, mikroszkóposan festették és előzetes választ adtak.
- Az egyik vizsgázó anyagát 6 Petri táptalajjal tápláljuk be: Endo és Levina - az EPE izolálására; Ploskireva antibiotikummal és Ploskirev antibiotikum nélkül - shigella izolálása; BCA - a szalmonella izolálása; SPA - a yersiniy kiosztására. Minden növényt 37 ° C-on 24 órán át inkubálunk, kivéve egy ICA-t tartalmazó csészét, amelyet 48 órán keresztül inkubálunk.
- Az anyagot szelenit-tápközegben 37 ° C-on 14-16 óra hosszat bevonjuk.
- Az anyag fagodiagnosztika (pestis, tífusz, szalmonella, polivalens shigellosis bakteriofágok), azaz gyorsított azonosítási módszer, amely lehetővé teszi az előzetes választ, de nem zárja ki a bakteriológiai kutatások magatartását.
1. Az Endo (Levin) táptalajján lévő Petri-csészébe 10 elkülönítetten választják ki az EPE-telepeket.
2. Az egyes kolóniák 1/3-át teszteljük az E. colihoz való kötődésre RA-en keresztül polivalens escherichia OCA-szérummal.
3. Ugyanazon telepnek a második harmada átkerül az elsődleges azonosítási környezetek egyikébe: Kligler vagy Russell vagy Olkenitsky, hogy meghatározza a tenyésztés általános összefüggését → 37 o 24 órán keresztül.
4. Az ugyanazon telep kolónia fennmaradó (harmadik) része a lejtős SPA-ba költözik azzal a céllal, hogy izoláljon és felhalmozódjon tiszta tenyészet és szerológiai azonosítása → 37 ° C.
1. A kultúra elsődleges azonosítása (generikus tartozéka meghatározása) a Kligler (Russell) környezetben történő növekedés természetének megfelelően történik.
2. Ellenőrizze az izolált tiszta tenyészet homogenitását, azaz E. csinál egy kavicsot egy kavicsos SPA-ból, Gram-folt, mikroszkópia, a sejteknek egyenletesnek kell lenniük.
3. Tiszta tenyészetet a Giss és az SPB környezetére vetítsünk két indikátorpapírral (indol és hidrogén-szulfid) → 37 o 24 óra alatt.
4. Vetés Simmons közegben → 37 o º 24 óra.
5. Vetés egy félfolyékony agar oszlopban → 37 o 24 óra.
6. Minta az oxidázra.
Az első 6 teszt az enterobakteriák minimális differenciál sorozatának tesztjeire vonatkozik.
7. Vegyen RA üveg többértékű esherihioznymi OKA, RCF, ACS, DCD, Oke szérumok (nemzetségbe tartozó megerősítette, és az összeget a szérumok, hogy meghatározzuk szerovariáns EPE).
8. Tedd RA üveg élő kultúra és OK-immunglobulin meghatározására K antigén és RA üvegre egy fűtött kultúra (100 ° C-on 30 percig vízfürdőn) és OK csoport és faktoriális-szérumok, hogy meghatározzuk az O antigén EPE.
9. Ha nem OK-immunglobulin és faktort és az O-csoport szérumok szerovariáns EPE lehet meghatározni beállításával az RA telepített élő kultúrák és fűtött (100 ° C-on 1 órán át) és a csoport UC szérumok.
10. Vizsgáljuk meg az izolált törzs érzékenységét antibiotikumokra → 37 o 24 óra.
1. Az összes vizsgálat eredményeinek elszámolása.
2. A mobil törzsekben az Escherichia H-szérumon lévő üvegben lévő H-antigént további meghatározzák.
3. Írja fel a választ.
Következtetés: A „kiosztott E. coli 020: 84 K, érzékeny a klóramfenikolt és kanamicint, tetraciklin közbenső rezisztens penicillinre, és ampicillin.”
Az izolált kultúra végleges azonosítása a
az EP serovar meghatározása a telepített RA-t élő és meleg kultúrákkal és csoportos escherchiózis OC-szérummal végezte.
- A tiszta EPE tenyészetet egy steril IHC befecskendezésével kipróbáljuk. A mosás egy részét steril csőbe visszük át, és 100 ° C-os vízfürdőben 1 órán át melegítjük (megölt tenyészet), a mosás második része egy élő kultúra.
- A két sor csövek szerológiai hogy két-szeres hígításban a növekvő UC-szérum steril IPC, kezdve 1:50 és 0-titer a címkén, neprinimaya véve a K-titer antitestek. A reakciót 1 ml térfogatban állítjuk be. A KS és az űrhajók általánosan elfogadott módszertan szerint vannak beállítva.
- Minden 1 soros tesztcsövet 1 csepp élő bakteriális szuszpenziót injektálunk az ICH-ben, és a második sorban 2 csepp előhűtött forró tenyészetet.
- Az eredményeket 18-20 órás 37 ° C-os inkubálás után rögzítjük a nem sérült szemmel (élő kultúra) és agglutinoszkóppal (meleg kultúra). Az élõkultúra számára nagyméretû K-agglutinátum kialakulása jellemzi a felmelegített finomszemcsés O-agglutinátumot.
Az eredményt értékeltük pozitívnak egyidejű jelenlétében O-agglutinátumot felére titer titer vagy K-ellenanyagok A címkén jelzett, valamint O-agglutinálja titerre titer O vagy fél-antitestek, a címkén megadott; vagy O-agglutinációval mindkét csősorban az O-antitestek titerének vagy feleinek felére.
Ha a betegek szérumában agglutinineket észlelünk, akkor RNGA-t alkalmazunk, amelynek segítségével az O-antitesteket colienteritises betegeknél határozzuk meg.
A hasmenéses járványok teljes körű jellemzésére meghatározták virulenciájukat is: intranazálisan fertőző egerek, meghatározva a hemolitikus tulajdonságokat.