diagnosztikus algoritmus légzőszervi és asszociatív mycoplasmosis madarak
Algoritmust a diagnosztika légúti és asszociatív mycoplasmosis a auks
A. P. Krasikov, doktor, Állatorvos-tudományi professzora. Omszk Állami Agrár Egyetem krasikovl 950 @ mail. ru
IG Trofimov, doktor, Állatorvos-tudományi professzora Omszk Állami Agrár Egyetem
N.F.HATYYU kandidátusa Állatorvostudományi Kar vezetője. Department of Molecular Biology of the State intézmény Omszk regionális laboratórium.
S.B.LYSKO. Kandidátusa Veterinary Sciences, Head. Állatorvosi Osztálya a szibériai Kutatóintézet Baromfi RAAS
O.A.SUNTSOVA, jelölt állatorvosi tudományok, vezető kutató, a Mezőgazdaságtudományi Kar Veterinary Research Institute of Baromfi
Absztrakt / Összefoglaló. Úgy tervezték, a javasolt és kísérletileg proved've terinarnoy praktake kifejezett módszerek bakteriológiai és szerológiai diagnosztizálására légúti mycoplasmosis madarak és a kapcsolódó formák megnyilvánulása.
A fejlett és a kísérletileg alátámasztott és felajánlotta állatorvosi gyakorlatban elérhető Express-módszerek ofbacteriological és szerológiai diagnosztikai légúti mycoplasmosis tartják a madarak és a kapcsolódó formák megnyilvánulása
Kulcsszavak: mikoplazmózis madarak epizootologicheskie, klinikai, patológiai, immunológiai módszerekkel diagassgiki.
Kulcsszavak: mycoplasmosis madarak, epizootologichesky, klinikai, pathoanatomical, immunológiai, diagnosztikai módszereket.
A cél a kutatás. Hogy tanulmányozza a járványügyi helyzettől légzőszervi mycoplasmosis madarak és asszociatív formák megnyilvánulása a szibériai régióban javult laboratóriumi módszereket annak diagnózist.
Légzőszervi mikoplazmózis rögzített négy (33,3%) a baromfi Omsk régióban egyetlen - Novosibirsk régió (9%) és a 9 (47%) Altáj régióban. Mycoplasmosis leggyakrabban fordul elő együtt ehsherihiozom, stafilokokkoz, ritkán pasteurellosis és reovírus ínhüvelygyulladás. És az összes ehsherihiozom egyesület a leggyakoribb. Tehát, az egyik baromfi gazdaságok -issleduemyh Omsk régióban mikoplazmózis együtt ehsherihiozom kimutatható 72% -ában. A leggyakoribb szerotípusok E. coli: 01, 03, 020, 078, O103, 0111, 0119. azonos szektorban lévő visszanyert kettő, legalább - három szerotípus.
Elemezve a bakteriológiai és szerológiai vizsgálatok, meg kell jegyezni, hogy annak ellenére, hogy nincs súlyos légzőszervi klinikai mycoplasmosis a szer van jelen számos baromfitelepeken a Omszk régióban, és az Altáj területén. Ebben az esetben a fertőzés forrása nem csak a csirkék, hanem a kakasok, kiemelve mycoplasma a spermát, és ezzel hozzájárul a további terjedését a kórokozót. Azt találtuk, hogy a leginkább fogékonyak a légúti fertőzés asszociatív mycoplasmosis, a fejlesztés komplex klinikai tünetek, csibék év 1-50 nap. Ebben az esetben az volt 67,3% a szerkezet fiatalok halálát aránya fertőző betegségek, melyek 100% volt társítva mikoplazmózis colibacillosis (ehsherihiozom). Ill fiatal mögött növekedését és fejlődését. Tojótyúkok és kakasok, anélkül, hogy nyilvánvaló klinikai tünetek a betegség rejtett hordozók légúti kórokozó és Mycoplasma fertőzés forrása az utókor számára. Tehát az eredmények bakteriológiai kutatások mikoplazmonositeley legnagyobb számú csirkék (60%) mutatott csúcsot tojástermelés (220 nap), egy átlagos antitest-titer az ELISA volt 7387 ± 1253. A száma kakasok mikoplazmonositeley nőtt az életkorral, és elérte a 372 nap a 70% és a szám a reaktív ELISA - akár 82%, az átlagos titer 5165 ± 137.
Jelzése mikoplazmák 43% az embriók, valamint az antitestek jelenlétére naposcsibék (64,8%), és izoláljuk őket M. gallisepticum (55%) átbocsátás azt mutatja, a fertőzés által transovarial ami alapvető. Ezen túlmenően, jelentős tenyészetek száma a M. gallisepticum izoláljuk a sperma a kakasok, amely arról tanúskodik, hogy az intenzív szennyeződés és fertőzés csibéit, különösen akkor, ha a mesterséges termékenyítés polyspermy.
Tapasztalataink szerint a spontán feltételeket fogékony madarak ehsherihiozom napi, és a légzési mycoplasmosis - 20 napos korban. A elterjedése a légúti mycoplasmosis és ehsherihioza a baromfitelepeken a Omszk régió hozzájárulnak a hajlamosító tényezők: sérti a hőmérséklet, a szellőzés elégtelen, a tömörödés baromfi, az élő vakcinák vírusfertőzések ellen. Ha ez a baromfihús hajlamosabb mycoplasmosis mint madár tojás fajták: több pozitívan reagáló csirkék eléri a 300-napos korban és a 100% ezen a szinten tartjuk, amíg a végén az élet. Az asszociatív formák áramlását légúti mycoplasmosis bonyolítja a járványügyi helyzettől nehéz diagnózis, prevenció és leküzdésére irányuló intézkedéseket is.
A kísérleti reprodukciója az áramhoz társított légzési mikoplazmózis ehsherihiozom csirkék azt találtuk, hogy az inkubációs idő 6-18 óra. A klinikai megnyilvánulása a betegség a kezdeti szakasz jellemzi teljes gátlást, étvágytalanság, nehéz légzés, borzolt tollazat, madár halmozása kis csoportokban. A jövőben a depresszió növeli, a madár nem reagál az inger esetében megfigyelhető, emésztési zavarok, légzési. A spontán fertőzés csirkék tapasztaltunk hasonló, de kevésbé súlyos klinikai tüneteket. Ebben a kísérletben a madarak a halál után volt megfigyelhető 8 órával az expozíció amely tartott 8 napig. 3-4 nappal a fertőzés után ünnepelte dupla vagy egyoldalas nátha, légszomj, zihálás légcső-ügyi és a 9. napon az általános állapota javult valamelyest, zihálás gyengült. 12 nappal a fertőzés után a madár állapota kielégítő volt, nem zihálás.
Az alapvető patológiai változás légzőszervi mikoplazmózis, társított ehsherihiozom, lokalizált a szív, tüdő, légzsákban, májban, lépben, a bélben, mint savós, savós és fibrines fibrines gyulladás. Részvétel E. coli nyilvánul asszociatív fertőző folyamat fejlesztés fibrines gyulladása a szívburok, a máj kapszula és a hashártya pneumatikus zsákok.
Becslésére szolgáló módszereket T- és B-rendszerek lehetővé teszik, hogy felfedje a mechanizmusok az immunrendszer és azonosítani szabálytalanságok a rendszer immun-homeosztázis fertőzött csirkék. A tanulmány megállapította növekedése az abszolút és relatív mennyisége a leukociták és a neutrofilek, különösen az első héten a fertőzés után, az immunológiai válasz, amely egy válasz kórokozók M. gallisepticum és az E. coli. Psevdoeozinofily mint a legtöbb mozgékony sejt, jelennek meg elsőként a helyen az invázió idegen ágensnek és serkentik a funkcionális aktivitását a monociták, eozinofilek és limfociták kezében egy védelmi funkció gyulladásos folyamatok során.
Csökkenése, az abszolút a limfociták számát 14-21 nappal a fertőzés után, jelezve gátolja a lymphoid rendszer, fékezés limfopoe mögött, amely negatívan befolyásolja az immunrendszer működését, és kíséri csökkenése abszolút száma a T- és B-limfociták fertőzött csirkék egy 14-21 nap . Ezt támasztja alá szövettani vizsgálatok: delimfotsizatsiey Fabricius bursa limfoid tüsző, számának csökkentése limfociták és eltűnése a kortikális réteg a lebenykékben csecsemőmirigyben. Sorvadást a szemináriumban, viszont van társítva szintézisének gátlása az immunglobulinok benne. Mivel a sorvadás a központi szervek az immunrendszer (a csecsemőmirigy és a Fabricius bursa), azok funkcióit egy bizonyos mértékig végrehajtani másodlagos nyirokszervek (lép és máj) által megerősített, immunológiai és morfológiai és funkcionális változások ezekben a szervekben szövettani vizsgálattal.
Számának növekedése a B-limfociták (7, 14 és 21 nappal a fertőzés után) annak köszönhető, hogy amplifikációját lépben immunológiai reakció, amely megnyilvánul az alkotó több nyiroktüszők álló nagy és kis limfociták, plazma sejtek fiatal. Ez összhangban van a nyilatkozatok N. L. Payne (1971) a felszívódását antigének és antitestek képződését limfoid sejtek a lép vörös és fehér pépet. Időszakok B-limfocita növekedést egybeesnek az antitestek képződését, hogy a kórokozó M. gallisepticum. amelyet megerősített a szerológiai. Tehát, 7 nappal a fertőzés után a Skra kiderült 15% pozitív csirkék és 14-es és 21-én nappal a vizsgálat - 100%. dinamikáját antitest akkumulációt ELISA-vizsgálat szerint. 7 nap elteltével a fertőzés után a csoportok átlagos titer 89,0 ± 0,9, a 14. nap - 874,0 ± 16,1 és 21. napon -1319 ± 76,98, míg a fennmaradó szinten diagnosztikai kissé meghaladja a titer (1: 800). Szintjének növekedése antitestek csirkékben a kísérleti csoportban állapotát jelzi azok fertőzés M. gallisepticum.
Bakteriológiai vizsgálata A vizsgálati csoportban a csirkék minden korban időszakokra E. coli tenyészettel és M. gallisepticum izoláltunk. A kontroll csoportban intakt patogén mikroorganizmusok az egész kísérlet talált.
Így a M. gallisepticum, fertőzött csirkék és E. coli okoz jelentős változást a T- és B-rendszerek max immunitást és a vér képet. Immunhiány ebben az esetben - a megszerzett hiba az immunrendszert, nyilvánul meg a szervezet képtelen teljes mértékben elvégezni a reakció a celluláris és humorális immunitás. Az ok az immunhiányos volt a legkorábbi involúció a központi szervek az immunrendszer (a csecsemőmirigy és a bursa), amely kifejezett delimfotizatsiey és cisztás degenerációja nyiroktüszők és növekedésének interfollikuláris sac szövet, és eltűnése a kortikális anyag, limfocita-mozgásban, az agyba területen, a formáció a cisztás üregek csökkentik csecsemőmirigy lebenykékben és környezetben a zsírszövetben.
Jelenleg az új fejlesztések kezdenek megjelenni speciális táptalaj izolálása mikoplazmák és Ureaplasma. Azonban még mindig nem jött létre egyetemes tömeggyártású ipari környezetben hulladék technológiai alapot a termelés, amely biztosítani fogja a növekedést a mycoplasma beleértve Ureaplasma. Elérhető recept tápközeg készítmények a diagnózis és mikoplazmózis ureaplasmosis nem szabványos, és ezért csekély különbségek a folyamat a főzés, attól függően, hogy a hús minőségét előállítására használt a tápanyag bázis. Ők igényelnek avtokla-virovaniya, sterilizálás és a minimális eltarthatósága.
Kínálunk felel meg a környezetvédelmi követelményeknek a rájuk kiszabott. Az eredeti összetétele összetevők tartalmazza a bázis egy egységes tömb normál tápanyag komponenseket, és így szükség gazdagító adalékanyagok, egy bizonyos mennyiségű indikátor koncentráció és optimális sor antibiotikumok, szérum, optimális pH különböző szakaszaiban a folyamat. A használt szabványos technológia előállítására folyékony közegek diagnosztikai jelzés mikoplazma légúti, tartalmaz képező bázis hozzáadásával egy nutritív alkatrészek és a megfelelő enzimaktivitás szubsztrátok (glükóz, arginin, karbamid), a szérum és antibiotikumok, valamint a végső sterilizálási szűrés és pasztőrözés. Szintén technológiai eljárás, a száraz alapjait sűrű közeg, ami lehetővé teszi, hogy azonosítsa az izolált kultúra természete növekedését. A diagnosztikai adathordozókat megjelenítéséhez és differenciálódását Mycoplasma csoport és titrálással, hogy megbecsüljük a felhalmozási szín-képző egység (Tsoe) vagy telepképző egység (CFU).
Minőségi jellemzőit javasolt kapcsolati média vizsgáltuk megfelelő kísérletek, hogy meghatározzuk a érzékenységét és specifitását folyékony, félig folyékony és szilárd táptalajokon jelzésére arginin glyukozofermentiruyuschih mikoplazma, Ureaplasma.
Az eredmények elemzése a kísérletek azt mutatták, hogy a táptalaj, az általunk kifejlesztett együtt NIIPOI Rospotrebnadzor megfelelnek minden mutató, követelmények rájuk. Nevezetesen, ezek a magas érzékenység tartozó mikroorganizmusok az osztály Mollicutes; növekedési üteme a vizsgált törzsek M. gallisepticum és M. fermentans - három napig, és az U. urealyticum - a nap folyamán; szelektív képessége, amely kifejezett a gátlási adatokat a tápközegek törzsek tesztelésére Staphylococcus aureus WHO-2, Proteus mirabilis, Escherichia coli 9001, amely nem befolyásolja a növekedési ütem Mycoplasma és Ureaplasma, és a bennük rejlő stabilitást a biológiai tulajdonságok lehetővé teszi, hogy tartsa a folyékony közeg a hűtőben feltételek 6 hónap.
Száraz diagnosztikai táptalaj a kijelző glükóz és argininfermentiruyuschih mycoplasma és Ureaplasma követelményeinek is eleget tesznek a rájuk kiszabott. Ezek a környezetek gazdaságos, kényelmes a használata. Ezeket fel lehet használni, mint egy kidolgozásának alapját az a szilárd és félszilárd média, ami növeli azok diagnosztikus értékű, eltarthatóságát és a könnyű szállítást.
Nagy érzékenység biztosítja a növekedést a média és a félig sűrű közegben legalább 1,0x105 CFU. Teszt törzseivel M. gallisepticum növekedési ráta szilárd táptalajon-öt - és félig - három nap, M. fermentans -Five és négy nappal és U. urealyticum - négy és három napig. Szelektív gátlása kapacitás expresszálódik ezekben a vizsgálati törzsek növekedési tápközeg Staphylococcus aureus WHO-2, Proteus mirabilis, Escherichia coli 9001 és az annak hiánya, a mycoplasma és Ureaplasma. Biológiai tulajdonságai közeg hűtőszekrényben tároljuk, amíg az év során. Az általunk javasolt módszer egyszerű, a kultúra, a készítmény nem igényel speciális felszerelést és lehetővé teszi a kijelző és differenciálódását kórokozók megtudhatjuk, hogy a címek.
Javasolt módszerek bakteriológiai és szerológiai diagnózis vizsgáltuk kísérletes körülmények között a broiler csirkék. Ennek eredményeként a kísérlet azt mutatja, hogy különleges diagnosztikai táptalaj feltüntetése mikoplazma és Ureaplasma aktívak és érzékeny tekintetében e mikroorganizmusok, miközben egyidejűleg következetesen gátolja a növekedést előforduló más élőlények együtt mycoplasma. A szerológiai adatok megerősítik, bakteriológiai kutatás és RNIF egy további nagyon érzékeny és specifikus diagnosztizálására alkalmas eljárás mikoplazmoznoy fertőzés. A vizsgálat a patológiás anyag RNIF csirkékből specifikus nyúlszérumot jelenlétére mikoplazmoznymi antigén mutat magas teszt specifikusságának minden esetben a kereszt-reakciók közötti egyidejű mikroflóra és mikoplazmák detektáltunk.
Termékek tesztelése a javasolt rendszer diagnosztikai asszociatív mycoplasmosis baromfik különböző korú és nemű csoportok megerősíti a kísérleti vizsgálatok eredményei, azaz a javasolt módszerek hatékonyak és informatív kapcsolatban mikoplazmoznoy fertőzés. Így a speciális tápközegeinek izolálására Mycoplasma és Ureaplasma Ingi-biruetsya kísérő mikroflóra növekedés, anélkül, hogy hátrányosan befolyásolná a növekedést a mycoplasmák, a jelzés a folyékony táptalajon igazoltuk eredményei párhuzamos növekedése szilárd táptalajon. A szerológiai vizsgálat (RNIF) megfigyelt magas érzékenység. Ezzel a módszerrel, az antigén volt kimutatható sperma mikoplazmozny kakasok, így azonosított a szerepe az utóbbi a terjedését mikoplazma a szülői törzstenyészetet. Ha összehasonlítjuk a szerológiai és bakteriológiai módszerekkel megállapították, hogy a E tanulmányok eredményei általában megegyeznek egymással, ami hozzájárul a finomítási és megbízhatóságának javítása diagnózist.
2. Koromyslov GF Irányelvek biokémiai és immunológiai módszereket a tanulmány a sejtek és azok összetevői, és más biológiai szubsztrátok / GF Koromyslov, NM Klimov, DD Poloz // VIEV. -VASKHNIL. - M: [b. és], 1980. -. 39c.
3. Payne, N. L. A nyirokrendszert. - A élettana és biokémiája házityúkot / N. L. Payne. - London, New York: Acad. Press. 1971 - № 2. - p. 985-1037.
4. Mitrofanov PM Immunpa a mycoplasmosis állatok / PM Mitrofanov, HZ Gaffarov, RV Borovik // állatgyógyászatban. -1984. - № 5. - pp 35-37.