Laboratóriumi rabota18 kapjunk abszorpciós spektrumát a biológiai objektumok

Hozzárendelés hallgatók laboratóriumi munka №18

„Meghatározása a koncentráció és a moláris extinkciós anyag kolorimetriásan”

Célkitűzés: A konstrukció a legkisebb négyzetek módszerével kalibrációs görbe. Annak megállapításához, a moláris extinkciós a festék az egyik hullámhosszon, és hogy megtalálja az ismeretlen anyag koncentrációja.

Kérdések az elmélet (alapvonal)

Elnyelt fény és a törvényeket. abszorpciós együttható az együtthatók-elegendő átviteli, optikai sűrűség. Regisztráció abszorpciós spektrumok betétek biológiai objektumok. Fénykolorimeterek és spektrofotometriya.Ustroystvo FEKA. Meghatározása a megoldások koncentrációk alkalmazásával. Meghatározása az abszorpciós spektrum az anyag spektrofotométer. A fényszórás és formái, a törvény a Rayleigh. Ria. (Előadás №15.)

1.Vypolnit munka a használati utasítás a papírhoz.

3. Védelem munka értékelésére.

1. Amikor halad hullámhosszúságú fény λ1 keresztül anyag réteget, annak intenzitása csökken az elnyelés következtében 4-szer. A fény intenzitása a hullámhossz λ2 ugyanezen okból legyengített 3-szor. Keresés anyagot tartalmazó réteg vastagsága és abszorpciós tényezővel fény egy hullámhossz λ2, ha ugyanakkora χ1 = 0,02 cm-1 a hullámhosszú fény λ1.

2.Cherez lemez átlátszó anyagból vastagság x = 4,2sm halad fele a beeső fényáram. Határozza meg a természetes abszorpciós együtthatója az anyag. A fényszórás lemez elhanyagolt; feltételezzük, hogy 10% -a a beeső energia tükröződik a felület a lemez.

3. A 4% -os oldott anyag az átlátszó fényintenzitás mélységben X = 20mm legyengített 2-szer. Hányszor fény intenzitása van gyengítve, hogy a mélysége x = 30 mm 8% -os oldatát ugyanazon anyag. Mi a koncentrációja az oldat, ha ugyanaz a megvilágítás kaptuk fotometriás mezők vastagságú 8mm x = y hivatkozási 3% -os oldatához X = 24 mm, és y vizsgálati oldat?

4. Amikor halad monokromatikus fényt egy réteg vastagsága x = 15cm

az intenzitás csökken, és 4-szer. Határozza meg a szórási tényezője abszorpciós mutatók ha χ = 0025 cm-1.

5.Chem egyenlő moláris abszorpciós koefficiense anyag, a hullámhossz 400 nm, amikor a fény áthalad az oldat koncentrációban 0,5 M Csökkenti a fényintenzitás-varrt 10-szer? . 6.Dlina küvetta 0,3 cm rés szélessége monokromátor a referencia oldat 0,1 mm, a vizsgálati oldat - 0,038mm. Áramlási sebesség érzékenység spektrofotométer 2.0 Mi az optikai sűrűség a vizsgált megoldás?

Célkitűzés: A photocolorimeter távolítsa el a molekuláris abszorpciós spektrumát az anyag.

Készülékek és anyagok: a fotoelektromos fotométer CK-3, küvetták, desztillált vízzel, egy festék oldatba (bróm-fenol-kék vagy KMnO4).

Haladás. Meghatározása a hullámhossz megfelel a maximális optikai sűrűségét a festék.

Utasítás munka fotoelektromos fotométer KFK-3

Forgassa CK-3 és felmelegíti a készülék 15 percig.

Készítsünk 0.01MKMnO4 megoldás. Ahhoz, hogy ezt a mátrixot tartalmazó oldat 1 MKMnO4 hígítható 100-szor.

Összehasonlításképpen küvettában öntsünk desztillált vizet, és a vizsgálati küvetta - 0.01MKMnO4 oldatot. Ügyeljen arra, hogy a falak a sejt maradt folyékony cseppek vagy egyéb szennyeződéseket. Törölje át a sejtet egy tiszta ruhával.

A mérési adatok egy táblázatban 1.

Ábrázoljuk a függését az optikai sűrűség az oldat megfelelő hullámhosszúságú a maximális abszorpciós spektruma az oldat koncentrációja mol.

Ábra. 2. Az függését az optikai sűrűség az oldat max a festék koncentrációjának az oldatban.

Segítségével a grafikon (kalibrációs görbe) és a törvény Bouguer-Lambert-Beer kihalás, és megtalálja a megoldást max.

.

Megoldásokat kell hígítani.

Mérjük meg a hosszát a cella cm l A egységét, ε egyenlő a tangensét a lejtőn a kalibrációs vonal .:

,

ahol α- dőlése a kalibrációs vonal az abszcissza. A kipusztulás dimenzió M -1. cm-1

Számoljuk ki a kihalás három pár koncentráció értékek és megtalálja azt az átlagos. Az eredmények felsorolása a 3. táblázatban.

sejt, cm