Gyors diagnosztizálása kolera
Gyors diagnosztizálása kolera. Kolera okozza, hogy két Biovariant Vibrio cholerae. Egyikük, egy dedikált Koch Egyiptomban, 1883-ban az úgynevezett klasszikus, a másik kapott F.Gotshlihom karanténszálláson El Tor Észak-Afrikában 1906-ban V.eltor. Mindkét biotípusú nonagglutinating vibriók Nagy halogenofil paragemoliticheskie vibriók termelnek hemolizinrésze és nem kolera vibriók-savanyító építeni a nemzetség Vibrio család Vibrionaceae.
Ez egy akut bélrendszeri fertőzés, kíséretében egy éles kiszáradás és sómentesítés a test. A fertőzés forrása a beteg vagy hordozó. A transzmissziós mechanizmus széklet-orális. Kórokozók szomatikus O és flagelláris H antigének.
O-antigén specifikus és tipikus specifitást. Szerint a szerkezet a O-antigén megkülönböztetni többé 40 szerovariáns. Fejlődő immunitás kolera humorális természetű. Anyaga a tanulmány széklet, hányadék, hullamerevség anyag. Módszer tömeges vizsgálatok vibriononositelstvo. Az anyagot közvetlenül a bélből egy üvegcsőbe 0,5 cm átmérőjű a gyermekek számára, 1,5 cm felnőttek és 15 cm hosszú, frittelt végei használt csöveket hiányában a gyapot tamponnal fa pálca.
Cső azonnal bemerítjük egy injekciós üveg 1 ml 100 200 pepton víz és agglutináló kolera O-szérum hígítási felére titer. Ugyanebben ampulla venni anyagot 10 fő. A fiolákat egy inkubátorban 370C. Miután 3 04:00 Vibrio cholerae összeragadt és fokozatosan kezd a következő 2 órában csökkent a pehely alján az üveg. Tanulás mikroszkóp alatt megfestett kenetet és medál csepp érzékeli ragasztó és részben szabad vibriók.
6 óra múlva a válasz megadott észlelése esetén azonnal V. cholerae beoltott egyenként mind a 10 egyed. Ez a módszer lehetővé teszi, hogy vizsgálja meg akár 16 000 ember 3 4 nap. Mikrofilm immunodiagnosztikai módszer. A tanulmány az antigén tulajdonságai a V. cholerae végezzük beállításával kémcsőben vagy lemezes agglutinációs reakció alkalmazásával száraz liofilizált diagnosztikai agglutináló kolera 0-szérumokat és sera Ogawa és Inaba. A szérumot hígítottuk fiziológiás sóoldattal vagy desztillált vízzel, és keverjük készítmény agglutináció üveg a Vibrio kultúrával tanulmány.
A felkészülés a használt szérum extra ételeket, ami megnehezíti a munkát a bakteriológus, a fennmaradó hígított szérummal gyorsan növekszik bakteriális mikroflóra és inaktiválja. A tanulmány antigén struktúrájának a V. cholerae immundiagnosztikai termék formájában egyetlen mikrofilm alkalmazások fejlesztettünk ki, amelyek rendelkeznek megfelelő specifitással, célzatosan és a gazdaság.
Immunodiagnostic kolera IHMP mikrofilm formájában egy polimer film bevont szárított cseppek, rögzített papíron, tartalmazzák a minimális szérum mennyisége, a filmképző komponens és tartósítószer. A filmképző komponens kötődik, tapad, és rögzíti a nyomkövetési anyagoknak a felületre a hordozó kiküszöböli szétmálló mikrofilm tartósítószer védi a gyógyszert a lebomlástól a hosszabb tárolás közben.
A koncentráció a szérumban diagnosztikai IHMP, elegendő, mivel, miután a emulgeálás a csepp sóoldatot tartalmazott ellenanyagokat titerű 1100, amely teljes mértékben biztosítja a reakció. Ez biztosítja a megfelelő koncentrációjú antitestek redukált szérum diagnosztikai fogyasztás és kizárja a lehetőségét annak nem használták. Ez megteremti a lehetőséget a gyors oldódás IHMP, az érintkezést Vibrio cholerae és a reakció kivitelezésére közvetlenül a polimer film.
Ready IHMP tároljuk sötét, száraz helyen, 4 7C kartondobozban eltarthatósága 3 éves megfigyelés, és adott esetben IHMP meghatározásához használt Vibrio cholerae. A véletlen szennyeződés környező IHMP elhelyezett tárgyak egy tiszta Petri-csészében. IHMP felületén alkalmazott egy csepp fiziológiás sóoldatot, amelyben feloldjuk. A hígított szérumot elegyítettünk vizsgálták kultúrák vibriók eltávolítjuk és bakteriológiai kacs egy tápközegben.
Egy másik megvalósítási mód szerint a készítmény IHMP reakciót szikével eltávolítjuk a papír szubsztrátum, és átvittük egy üveg tárgylemezre, feloldjuk egy csepp fiziológiás sóoldatot, és keverve egy kultúra Vibrio vizsgálták. Ha egy 1 pozitív reakciót 3 perc agglutinálja szemes színesnek tűnnek zöld és fehérített csepp. A negatív reakciót a csepp marad homogén zavaros. A használt részét a polimer film vágott és a maradék a film IHMP tárolhatók ugyanabban a Petri-csészében a további vizsgálatokhoz.
Használata IHMP kutatás Vibrio és más mikroorganizmusok lehetővé teszi, hogy statisztikailag megbízható eredményeket, mentse drága diagnosztikai szérum, minőségének javítása és a hatékonyság a vizsgálatok. Az agglutináció mikromódszerével. Nemrégiben, bakteriológiai gyakorlatban talált meglehetősen széles körben alkalmazott módszere mikrotérfogatú előadások szerológiai vizsgálatok speciális mikrotiter planchette-ek és tűk. Az agglutinációs tesztek adnak mikromódszer kolera agglutináló referenciaszérummal mikrotiter polistrolovyh Planchette lapos vagy V-aljú image NYM szánt immunológiai reakciók használt mpkrotitrovalnye mikrotiterlemezekhez térfogatú 0,4 ml kémcsövekbe és párhuzamos.
Pre Planchette promyvfyut alaposan folyóvízzel, mindegyik jól öblítettük desztillált vízzel, és jól megszárítjuk, ezután egy felirat ceruzával.
Minden mélyedésben négy sorozatban cseppentő készült mikrotiter Takács 0,85 nátrium-klorid-oldattal pH = 7,2 térfogatban 0,05 ml, akkor az első jól minden sorban megfelel az azonos mennyiségű szérum hígításban 125 és végezte titrálással mikrotitroval-sósav egy tűt egy fej 0,05 ml térfogatban, eltávolításával az utolsó a kutak 0,05 ml. Titrálása után a szérumok az összes rezervoárhoz, eltekintve a kontroll, hogy egy szuszpenziót 0,05 ml agar tenyészet vizsgálatban.
Ez manipuláció végzik egy tálcán. Végén a titrálási lemezt a fedéllel letakarva, és tálcára helyeztük egy kemencében 37 ° C hőmérsékleten 2 óra elteltével expozíciós rögzíti a végső reakciót sztereomikroszkóp alatt MBS 1, MBS 2 kosoprohodyaschem fény. Amikor elszámolása a fedelet a Planchette reakció nem távolítja el, helyébe másik esetén a köd. Miután hagyjuk, hogy a reakció Planchette, és rakott árokban fedelét, és öntsük 5 klóramin, hogy minden az üregeket töltött fertőtlenítő oldat planchette-ek.
Tanulmányok kimutatták, hogy az összes Vibrio cholerae El Tor és a klasszikus kolera biovars összeragadt faj 0-szérum mikro. Ami agglyutinabelnosti típusspecifikus szérumok, a következő minta nyomon követhető a készítményben a szérum Inaba mikromódszer agglutinálta 100, és a csöveket 90 törzsek Vibrio cholerae klasszikus Inaba szerotípusú. Biovar V. cholerae El Tor Inaba szerovariáns összeragadt a planchette-ek és csövek, illetve a 95 és 96 esetben.
A Vibrio cholerae klasszikus és El Tor szerotípus Ogawa biovars aránya mindkét módszer közel azonosak voltak. Érdekes, amikor megállapítják a agglutinációs reakciót RO-szérum legnagyobb számú törzsek összeragadt RO-szérumot egy titert detektáltunk micromethods agglutinációs csövekbe telepített egy törzsben. Minden törzs Vibrio 040.056 szerotípusok mikromódszer nem agglutinált kolera agglutináló szérumokat, és a kémcsövek törzs II 258-1099 040 szerovariáns összeragadt minden kolera szérumok.
A legtöbb Enterobacteraceae család képviselői a törzsek vizsgált nem összeragadt kolera agglutináló sera, kivéve Sh. flexneri 2503 amely találtak csövek agglutinációs az összes szérummal, és a S. typhimurium törzs 21, amely jelzi a nem-specifikus agglutinációs az összes szérummal mind in vitro és in egy ábécésdeszkalap fedélzeten.
Amikor ezt a módszert, agglutinációs sera fogyasztása csökken 10-szer, jelentősen csökkentve a szükséges idő a beállítás reakció és felgyorsul időszak kibocsátó válasz. Leírunk módszer kevésbé munkaigényes. Ennek megfelelően a szokásos, az eredmények pontosságának, a magas hatásfok a módszer lehetővé teszi, hogy ajánlom azonosításához Vibrio cholerae és törzs a vizsgálati populáció A Vibrio cholerae törzsek alapján agglyutinabelnosti.
És immobilizálása Vibrio cholera szérumok és tipikus kolera fágok. Cseppek vagy széklettel anyagot a felületén peptonvíz kezelt kolera O-szérum tipikus szérumok Ogawa és Inaba kolera tipikus vagy fágok. Ezen készítményekből előállított zúzott szalma, amely megvizsgálta sötét látóterű és fáziskontraszt mikroszkóppal. Pozitív esetben, 3-5 perc elteltével Vibrio mozgás megáll. RIF. Készítmények A vizsgálati anyagot kezeljük fluoreszcens kolera szérummal és alatt vizsgáltuk a fluoreszcens mikroszkóp.
A pozitív eredmény akkor tekinthető detektálását is egyetlen készítmény vibriók fényes sárga-zöld emisszió egy briliáns perem kerülete körül a sejt. A pozitív eredmény érhető 1-2 óra után kezdete után a vizsgálat koncentrációban vibriók legalább 106 sejtet tartalmazó 1 ml, ezért ajánlott előre tenyésztése az anyag táptalajon.