A virális vektorok - Referencia vegyész 21
DNS belép a sejtmagba. Azonban, virális vektorok számos hátránya, ezek azonban drágák, és gyakran korlátozott klónozási kapacitás, amely nem szabályozza a kifejezés egy terápiás gén keresztül szövet-specifikus szekvenciákat. Továbbá, virális fehérjék váltanak ki a gyulladásos választ. kiküszöbölve a ismételt beadása a vektor. Ezért a nem-virális génbeviteli rendszereket fejlesztettek. [C.499]
A retrovírus vektor tartalmazhat csak mintegy 10.000 Mon Miután befejezte a kezében egy vírus vektor. tudják megfertőzni a megfelelő célsejteket. például fibroblasztok, amelyek expresszálják a megfelelő felületi receptorokhoz. [C.585]
A virális vektorok nem elterjedtek. A jellemző eukarióta vírusok egy kompakt szerkezet a genom és a szinte teljes hiánya a gének. nem alapvető fontosságú a fejlődésük. Ezzel a klónozás velük az idegen DNS hiányuk és használatát igényli helpervírusok. [C.379]
Nyilvánvaló, virális konstrukciók egyedülálló tulajdonságai szempontjából szimuláció egyes kiviteli alakjainak génterápia. Azonban a klasszikus virális vektorok közvetlenül fel tud használni a hosszú távú feladatok génterápia (kivéve talán bizonyos esetekben terápia limfoproliferatív betegségek) miatt a transzformáló akciós potenciál saját transz-ható faktorok. vezető megsértése alapvető biztonsági követelményeknek kezelést. Bizonnyal ígéretes trend a szakterületen, hogy új és meglévő vektor rendszerek tesztelése, transz-ható tényezők vezetősínek nagyrészt elveszítik transzformációs képessége (onkogén potenciált). Azonban még ebben az esetben, abban a pillanatban nehéz megfelelően értékelni azok hatását az élő szervezetre. [C.225]
Ha hiányzik egy élő rekombináns vírus vakcina, amely a vakcinázott a csökkent immunrendszer állapotát (pl AIDS) szenvedő T5gzhelaya vírusfertőzés lehet fejleszteni. Ahhoz, hogy megoldja ezt a problémát, akkor be kell építeni egy virális vektor kódoló gént humán interleukin-2, amely serkenti a T-sejt-választ, és korlátozza a vírus burjánzását,. [C.241]
RSlon C-cDNS beépített gén lehet egy fertőző-ség, következésképpen, hogy fertőzött egy szabadalmazott növény. Ha a cDNS-t beillesztett gén nincs fertőzőképesség, a virális vektor átírható előállítására RNS, amely azután felhasználható fertőzésére a növények. [C.514]
Leírt Sec. 19, eljárás klónozó idegen szekvencia nostey bakteriofágokban vagy plazmidok is használhatók, hogy gének eukarióta vírusok. Azáltal, hogy a szükséges szünetek restrikciós enzimek és az azt követő társulása kapott fragmensek globin, inzulin, és más forrásokból a több gént építettünk be eukarióta virális vektorokat. Az egyik leggyakoribb vektor-8U-majom vírus 40, amely replikálódni képes sejtekben számos emlősökben. Új géneket lehet illeszteni a régióban a korai vagy késői gén transzkripciós egység a vírus. A kifejezés magában foglalja azt a lépést, képező RNS-predshe stvennika, 5 co-terminális, amely általában rendelkezésre álló virális szekvenciákkal. szekvencia követi a beillesztett gén. Az ilyen RNS-t a szokásos módon kell splicing, ábrán látható. 26.8. [C.325]
Ezzel a célra vektorok, például ASE-kényelmes, abban az értelemben, hogy inkább könnyű telepíteni több példányban a vírus (akár több száz cellánként). Ez magyarázza a sikeres alkalmazása vektor alapú ASE magas expresszióját számos fehérje [1]. A hátrányok virális vektorok van társítva egy korlátozott számú sejtvonal. amelyben a vektor replikációs. és az expresszió szintjét, és a fenntartása episzómális szerkezet állapotban általában attól többek között is a specifikus DNS-szekvenciák vektorba klónoztuk. Egy növelésére szolgáló alternatív módszer a példányszámot ebben a fejezetben leírt biztosít sejtek szelekcióját amplifikálására a vektor szekvenciák után integrációja a gazdasejt DNS-ébe, ez a megközelítés nem alapvető korlátozásokat a használata egy adott sejttípusban. Amikor a sejtek lehet kiválasztani ezzel a megközelítéssel a kívánt tulajdonságokat, mint például a képességét, hogy módosítsa a specifikus fehérje terméket vagy felismerjen egy bizonyos DNS-szabályozó szekvencia. [C.239]
Fertőzés predimplantirovannyh embriók rekombináns retrovírusok - egy viszonylag egyszerű eljárás, amely nem igényel drága berendezéseket. Azonban, bármilyen kívánt gén, először meg kell pereklonirovat a virális vektor, és a rekombináns konstrukciót lépett a megfelelő sejtekben szerezni sejtvonal. termelő rekombináns fertőző vírusrészecskéket. Itt azonban meg kell jegyezni, hogy a méret a betét. amely képes fogadni egy virális vektor. korlátozott (kb 10 m. n. n.) Ezen túlmenően, a DNS-t tartalmazhat [c.309]
Vektorok helyettesítéssel 8 40DNK késői géneket. Az első próbálkozások építeni a virális vektorok végeztek az SV40-vírus, amely nem a DNS-ben a hosszú távtartók. A virális genom helyébe chuzhDNK késői vagy korai gének. A szerkezetek voltak helyettesítő vektorok, amelyek kapacitása nem több, mint 2,5 kb- és dolgozni velük szükséges helper vírus. [C.398]
Egy másik megközelítés, ami remélem, hogy növelje a hatékonyságot a gén transzfer. a használata a retrovírusok vektorként. A fő előnye ezeknek a vektorok, hogy azok képesek hatékonyan fertőzni nagyszámú különböző sejttípus. Az általános formája a virális vektor. Használt transzgenezisére ábrán látható. 66. A retrovírus vektorok nyújtanak integrációja egyetlen példányát a transzgén az embriók különböző fejlettségű. Az első kísérletek. bizonyítja a végrehajtás és öröklési egerekben exogén beadott egér Moloney leukémiavírus (MoMLTV), tartottak vissza a közepén 70-es években a múlt század a személyzet Jenisch [c.191]
Ezek a kísérletek a kutatók arra utalnak, a használata bizonyos szegmenseiben a virális genom am plifitsiruyuschih virális vektorok. Először vizsgálták annak lehetőségét, hogy a bevezetése a hibás vírus genomja idegen DNS-t. Speth F és H. Frenkel (1982) beágyazott része Bgal-rKS7 plazmid (egy származéka [c.388]
A klónozott gének állati sejtekben, két típusú vektorok alapján egyikük rejlik SV40 gént szerkesztettünk, és a másik gén patgillomavirusa szarvasmarha (BPV). Alapvető tulajdonságait a két virális vektor rendszerek vannak leírva Sec. 5.7. Papillomavírus-alapú vektorok különösen hasznosak a szintézis bolschoy mennyiségű proteint és az SV40-alapú vektorok használják számos kísérlet. [C.360]