Lépés m-1
1.1. Feature-termelő törzset lakkázkészítmény.
Az itt használt lakkáz enzim is termelő magasabb basidiomycete Trametes hirsuta kultúra 56 (Wulfen.) Pilát.
Termelő törzs ez jellemzi a nagy sebességű növekedés és szintézisét az extracelluláris lakkáz aktív az folyadékfázisú mély művelés.
A cefre szilárd agar közegben kolóniákat formálni, jól fejlett rost-gyapjas légmicélium. A rendezési telepek nem fejeződik ki. A 3. napon a tenyésztés hőmérséklete 32 ° C-on Colony átmérője egyenlő lesz 6,7 cm. A légmicélium fehér. Colony széle sima, optimista. Reverzum változatlan, majd fehérített. Az öregedés telepeket egy sárgás vagy kremovatam képezik az alapjait termőtestek formájában halmok 3-10 mm átmérőjű. Illata kellemes gomba.
Alámerített tenyészetben fonalas agglomerátumok serdülő gömb alakú vagy szabálytalan alakú, átmérője 1-8 mm. A mélység és felületi tenyészetet általában nem képez klamidospórák artrospórákat és oidii. A hifák válaszfalasak, elágazó derékszögben. A hifák képezhet duzzanat és sűrítő végein. A hifák három fajta, alámerített tenyészetben főleg két típusa: vékony (1,0-2,0 mm) és vastag (2,5-5,0 mikron). Csatokat egyetlen, nagy, meredek, gyakran anélkül, lumen, néha medált.
Aerobic. Optimális növekedési hőmérséklet (31 ± 1) ° C-on, pH-optimuma 4,0.
1.2. Előállítása a tápközeg.
A tápközeg, g / l:
Corn extraktumot hígított önmagában (100 g / l), és külön-külön sterilezzük 0,18 MPa nyomáson 40 percig.
Lisztet egy külön tartályban oldódnak kis mennyiségű hideg vízzel, adjunk hozzá a forró vizet erélyes keverés közben, és 10 percig állni, sózzuk, steril kukoricalekvár. Lehűtjük 30 ° C-on a pH-t 5,7-titrálással 10% H2 SO4 vagy 10% KOH-dal.
A kapott közeget öntjük 150 ml-es rázólombikokban 750 ml kapacitású és ledugózott papírral sapkák.
1.3. Sterilizálása a táptalaj.
Elkészített lombikokat tápközeget autoklávba helyezzük, és sterilizáljuk nyomáson 0,18 MPa nyomáson 40 percig, majd lehűtjük olyan hőmérsékletre (31 ± 1) ° C-on, és Egy hónapon belül használtuk. Szobahőmérsékleten tárolandó.
1.4. Vetését és művelését vetőmag palackokban.
Minden dolgozni reseeding kultúra és készítsen egy mintavételi Hood steril körülmények között a lángzónában.
Előállítása inokulumlombikokban végezzük több szakaszban (passzázs):
- első passzálás - reseeding kultúrát a szilárd táptalaj (ajtófélfa) hajtjuk végre, az arány 1 és ajtófélfa 1 átvitelével a rázatott lombikos tenyészettel együtt egy darab agar táptalaj mikrobiológiai kalcinált horog.
- egymást követő passzálások (második, harmadik, stb) hajtjuk végre, az arány 10% térfogatú inokulum az előző járat (150 cm 3 15 cm tápközeg folyékony tenyészetet 3 előző átjáró) átvitelével az inokulum steril pipettával egy kitágított végződés Mora vagy egy steril hengeres.
Inokulátor beoltására vetőmag szükséges készíteni 0,44 liter inokulumot harmadik és az azt követő részeket. Élettartam 10 nap mag. Store mag hűtőszekrényben 4 ° C-on
A beoltott lombikot lezárjuk steril pamut dugón, és elhelyeztük egy himba termosztált szobában, és növesztettük a következő üzemmódban:
- Hőmérséklet 30-32 ° C-on
- / Perc (180-240 fordulat / perc) sebességgel himba 200
- tenyésztési idő: az első járat - 3-4 nap (72-96 óra).
második - 2-3 nap. (48-72 h).
a harmadik és az azt követő - 2-3 nap. (48-72 h).
Az oltóanyagot szabályozott (10% Seed lombikok):
- hiányában a külső mikroflóra lemeztken hús-pepton agar;
- az oxidáz-aktivitást spektrofotometriásán;
- morfológiai, fiziológiai indexek mikroszkóppal felnőtt inokulum (szerinti para. 1.1.).
Mint termelési oltótenyészetet szuszpenziót használunk után a 3. és az azt követő passzálással (legfeljebb 10).
Fenntartása kultúra szilárd tápközegbe, és tenyésztést lombikokban végezzük az utasítások szerint.
Ready vetőmag lombikok beoltására használjuk fel közepes inokulátor (Pos. FD-10) lépésben-2 TS.
A nem megfelelő inokulum irányul, hogy fokozzák CBO-1.