Szerológiai azonosítás - studopediya
HAI. Basic, nagyon speciális és egyszerű megvalósítását a Nemzeti Bank a vírus azonosítási módszer. Mert nyilatkozatot, akkor meg kell adni a konkrét referenciaszérumokat a Viru-su, és elkötelezett a CE-vírus (allantoiszfolyadékból) HAI hozott közös metoxi-ház egy makró és mikrovariantah. Vírus azonosítása tekintettük teljesnek, ha az ágyéki-specifikus szérum gátolja vírus HA aktivitását belül az egész, vagy 1 / 2-1 / 8-titert homológ a referencia magas vérnyomáshoz. Gyors azonosítására az izolált vírus ajánlani a következő módszert alkalmazzák tárgylemezre, és egy csepp allantoin folyadékból 1% -os szuszpenzióját csirke eritrocitákat. Azután, hogy a vizsgálat a semlegesítése GA aktivitást. Erre a célra, a téma-ing üveget alkalmazzuk egy csepp azonos allantois-folyadékot, dobja a referencia specifikus szérum és jól összekeverjük. Ha agglutináció vörösvértestek nincs, akkor megoszlanak, a vírus egy vírus NB.
Előállítása hiperimmun szérumok. 5-8 hónap csirkék titerű anti-HA postvaktsi-közi elleni immunitás NB 1: 4-1: 64 giperimmuniziruyut vírusvakcinák a darab. B1, La Sola, N. első beadás make adjuváns (autoklávozott keveréken lanolin vazelin arányban 1: 1,5). Az 1 ml elegyhez 5 ml a vakcinavírus. Az elegyet eldörzsöljük mozsárban, és helyezzük egy vízfürdőben 30 percig 56 ° C-on
1. alkalommal vakcinát egy adjuvánssal térfogatban 1 ml intramuszkuláris injekció, 2. alkalommal - 3 nap adjuváns nélkül, 3. ismét 3 nap után adjuváns nélkül. 10 nap elteltével hiperimmun szérumok eszköz check-ség titer általában 1: 6144-1 12288.
RN az FE. Használt a vírus azonosítása ritka, mivel ez időigényes és hossz-CIÓ. A reakció alkalmazott a vitatott helyzetekben póz RN hagyományos módszer általában kiviteli alak vírus hígításában állandó dózisú szérum. A reakció pozitívan az index a semlegesítés során a> 21g.
RSK. A diagnosztikai gyakorlat NB ritkán használják. Javasolt RAC, mintha, Stryi és legolcsóbb módja differenciálódásának NB törzsek virulencia
RIF. A módszer alapja az a használat konjugációs rodaminsulfohlorida-sósav immun szérum a vírus azonosítása érdekében a vírussal fertőzött sejtek AH SAW Shih és elpusztult madarak ezzel a színezék legmegfelelőbb és kényelmes köszönhetően a fényes narancssárga-vörös lumineszcencia AH. FITC-konjugátumok (flyuorestseinizotiotsianat) kevésbé alkalmasak kimutatására egy adott AG alkalmazni homológ PCX konjugátumok ismert módon. A legtöbb esetben a magas vérnyomás a sejtmagban detektáltuk a fehérvérsejtek (limfociták, monociták, és eozinofilek psevdoeozinofilah) vagy fertőzött sejtek az említett szervekben, mint a fényes narancssárga-vörös fluoreszcencia színű. A késő-kontroll egy kezelt preparátumokban azonos homológ konjugátumokat, például SVE-cheniya nem fordul elő csak bizonyos esetekben észlelt pont sárga-narancssárga izzás a citoplazmában a fiatal eozinofilek. Megállapítást nyert, hogy a vírusos AH fertőzött sejttenyészethez (CEF és BHK-21), kiderült, Feenberg kiindulva 4 órán át (a velogén törzsek) és a 6 órán át (a lentogén törzsek), hogy 10-12ch izzani AG jegyezni csak a citoplazmában, és 20 óra múlva - a citoplazmában és sejtmagokban.
RIGA. A technika készítmény VNIVIP szárított szabványos SZEZON érzékeny és nagyon specifikus eritrocita és vizsgálati gyógyszerek az AT az NB vírus gyors diagnózishoz. Az említett vörösvértest diagnosztikai készlet lehetővé teszi, hogy a vírus azonosítása salakanyagokban a szervek és szövetek.
ELISA. ELISA virális AG észlelt korai fertőzés után A megjelenése-MENT D. A CPU 12 órával a fertőzés után egyetlen látható AG-tartalmú sejtek.
Azonosítás használatával mAb. Vizsgáltuk a különböző vírustörzsek és IBD lyaty NB homológ kapcsolata a monoklonális antitest. A vizsgáló 40 törzsek és izolátumok egy sor kilenc mAb kiderült, hogy 8 csoportok. Vírusok Minden csoport rendelkezett nemcsak közös AG-tulajdonságokkal rendelkeznek, hanem azonos járványos jellemzői mAb HA és glikoprotein F ajánlott meghatározására patogenitási és biológiai jellemzői törzsek keringő beoltott és be nem oltott madarak Ezeket lehet használni azonosítására mező izo-lyatov, magas vérnyomás kapcsolódó tárgyakat. La Sota és B1, gyors differenciálódását ezen vakcina törzsek, mov a virulens izolátumok.
Oligonukleotid térképezési módszer. Ez a módszer vizsgált biokémiai összetétele több törzs a Nemzeti Bank az izolált vírus az Egyesült Államokban a Kalifornia, Texas és Flory-igen, lehetséges, hogy könnyen különbséget törzsek egymástól. Kiderült-rész törzs azonos volt. Úgy gondoljuk, hogy egy oligonukleotid térképezési módszer lehet ef-tively értékeléséhez használt járványügyi helyzet.
Virulenciájának meghatározására az izolált vírus. Emellett szerológiai Ident-telményeinek gyakran van szükség, hogy meghatározzuk a virulencia izolátumok. Ez fontos, ha fennáll a gyanú, hogy az izolált patogén egy alkalmazott törzs tömeges vakcinázás. Fokozat virulencia lehet meghatározni a következő módszerekkel.
Henson módszer - meghatározása az index intracerebrális virulencia. Vizsgálati anyag 1:10 arányú hígítást beoltott intracerebrálisan a dózis 0,05 ml 10 1-napos csirke lyat nyert nem vakcinázott csirkék ellen ND. megfigyelési idő 8 nap. Minden minősülnek konkrét gibshie csirkék; összegük szorzóval a 2. Minden csirkék, amelyek klinikai tüneteket mutattak minősülnek túl konkrét; összegük szorzóval az 1. intracerebrális patogenitási index kiszámítani, az összeg a labdák 80 (a megfigyelések száma a 10 csibék 8 napon). Tape-gén törzsek index legfeljebb 0,2, a velogén törzs - nagyobb, mint 1,5. A hátránya ennek a módszernek, - állandó megfigyelési időszak - 8 napon.
Meghatározási módszere az átlagos idő a halál a 10 napos embriók, indukált-edik minimális letális dózist (CSA / MLD). Előállítására egy sor 10-szeres hígításokat a vírus vizsgált A vizsgálatok, a 10 -1 10 -10. .. Öt közülük (10 -1 10 -7 10 8. 10 9. 10 -10 használjuk a Zara zheniya 10 nappal TBE allantois üregbe térfogatban 0,1 ml Mindegyik hígításhoz oltottunk 10 TBE .: 5 megfertőzni reggel 8 és -to 16 órán át (összesen 50 embrió-megfertőzni új), és inkubáltuk azokat 37 ° C-on megfigyelni őket 2-szer naponta 8 óránként 120 órán át. egy órával minden elpusztult embrió regisztráltuk az elhullást . a minimális letális dózis a legnagyobb hígítása a vírus okozza a halálát az embriók beoltott. az átlagos halál időpontjában talált összegét elosztják az összes óra a halál az embrió meghívásával Anna minimális letális dózist, az embriók száma: az átlagos idő a halál akár 60 órán át - velogén törzsek; átlagos idő a halál 61-90 órán át - mezogén törzsei, az átlagos idő a halál 90 és azon túl 100 óra - lentogén törzsek azonban, ezek a módszerek drágák, és elkészítésük. sok idő - meg kell tölteni legalább 7 napon keresztül, hogy megkülönböztesse a vad törzsek a vakcina.
RSK. A gyors és olcsó módja annak, hogy különbséget törzsek. Diagnózis után 3 napig a minták kézhezvételét. A leggyengébb kötési komplement oka velogén vad törzsek, a legerősebb -lentogennye (például La Sota), a határok között, az erős és a gyenge-E - mezogén. Ezen kívül, kevésbé virulens törzsek antigén, mint VAC-tsinnye, ellen CSA szintézis indukciója tengerimalacoknál. A legjellegzetesebb differenciálódás-rentsiatsiyu ad szérumában tengerimalacok immunizált törzzsel KHitchner.
Biológiai vizsgálat. 1972 óta az Egyesült Államokban, és később más országokban izolált törzsekkel nagyon magas virulencia. Ezek az úgynevezett törzsek WND (vistsero NB-tróp törzsek). Ahhoz, hogy azonosítsa a bioassay végzett érzékeny csirkéknél perces idősebb legalább 6 héten át. Csirkék oltunk a kloáka. Számos faj fertőzik a szem, hozzájárulva egy csepp a vírus. Madármegfigyelés 10 nap. Ha e határidőn belül nem csirke meghal, úgy véli, hogy a törzs nem tartozik WND. Ha a madarak megbetegszenek és elpusztulnak 10 napon belül, hogy a boncolás a következő értékelést az intenzitás változások hoztak az Egyesült Államokban (pontokban): pontos vérzés vagy nekrózis miatt TIONS a légcsőben - 25; pontszerű vérzések vagy nekrotikus változásokat a légcső és a kapcsolódó duzzanat a légcső és a bemeneti régió a mellkas - 100; pontszerű vérzések vagy nekrotikus változások a növény - 100; elhalás és a fekély a mirigyek következőképpen sing-vastagbél- és Peyer-plakkokban - 100; pontszerű vérzések vagy nekrózis változás-TION nyálkahártya kloáka - 10; gyulladás a hashártya a petefészekben - 10; petechiák máshol - 10. Diagnosztikai VVND akkor indokolt, ha ob jelen pontok száma eléri a 150 vagy annál több.