Meghatározást, ha - és ha a titer
Escherichia coli - a legtöbb és állandó lakója az emberi bélben vastag kártya, és minden meleg vérű állatok. Ez kerül a környezetbe a széklettel, ezért használják indikátorként a bélsár és a környezet szennyezése és közvetett kijelző-Tel jelenlétében vízben kórokozók - ügynökök bélfertőzések férfi, a széklettel ürül, hogy végezzék az egyéb tárgyak.
Így az E. coli szolgál egészségügyi víz szemléltető mikroorganizmus. Mivel ez nem képez spórákat, és halnak meg, viszonylag kíméletes módszerek szers-Bani, jelenlétét konzerv ételek vagy a víz jelzi sérti a védelmi rendszer és alatti elégségességével vízkezelés, mintha az E. coli visszatartott életképesség azt jelenti, hogy túlélje, és mások asporogén baktériumok, például Shigella vérhas, tífusz Salmonella és más patogén baktériumok - patogének gyomor-bélrendszeri betegségek.
Coli index (index E. coli) - az a szám Ki antiplakk rudak kimutatható és 1 liter vizsgálati folyadék (a nemzetközi szabványok - 100 ml).
A jelenlegi szabályozás szerint coli titert az ivóvíz nem lehet kisebb, mint 333 ml (Moscow - nem kevesebb, mint 500 ml), és a coli-index - nem több, mint 3 (lásd 15.1.4 ..).
Koli-titer módszerekkel határozzuk meg a fermentációs mintákból. Dan-WIDE módszerek alapján a képességét, E. coli-TEP lokrovnyh állatok és emberek fejlesztése magasabb hőmérsékleten (43-44 ° C), és fermentálni cukrok (mannit, glüko-zu et al.) A gázfejlődés. Vannak két- és háromfokozatú fermentációs módszerekkel.
Három fermentációs eljárás nyomon jelen van. Az első lépésben, hogy az első mintát a fermentációs: különböző hígítású vizsgálandó folyadék alkalmazásával steril pipetták-teles be a lombikba, és a csövek speciális sarok-levodnymi folyékony táptalaj (Bulira közepes Eijkman közegben rozolovaya et al.) És úszik.
Attól függően, hogy a tervezett mikrobiális szennyezés-CIÓ vízforrás különböző telepítési program. Így a növények hogy összesen 300 ml (2 térfogat 100 ml és 10 ml térfogatú 10) csapvízzel tanulmány. A vizsgálat nyílt víztározók (.. folyó, tó, és így tovább) a nem szükséges az elterjedt vizet össztérfogat 111,1 ml (1 térfogat - 100 ml; 1 térfogat - 10 ml, és egy 1 ml térfogatban, és 0,1 ml). Közötti arány a közeg, és a víz az elvetendő 1. 2. Ezért, kis mennyiségű víz növények (1 ml, 0,1 ml) végeztük kémcsövekbe hígított közegben (normál koncentrációja), és nagy mennyiségű vizet (100 ml és 10 ml) - a koncentráljuk szerdán.
Termesztett egy inkubátorban 43-44 ° C Techa beállított 24 órán át. Ezen a hőmérsékleten a mikroorganizmusok növekedését elnyomják nélkül egészségügyi indikatív ZNA-cheniya víz. Ezután böngészi növények növekedés jeleit az E. coli (a jelenléte gázbuborékok az úszók, színváltozás, zavarosság).
A második szakaszban, hogy érvényesítse a kimutatására az E. coli szaporodását a folyékony közegben a beoltott szigetek jelei a bakteriális növekedést a loop-out esetén beoltással Petri-csészékben Endo Agar és termesztett Cul-kerek 37 ° C-on 24 órán át.
Endo Agar áll MPA, laktóz és színtelenített indikátor (bíbor elszíntelenítjük nátrium-szulfit). Ezen a tápközegen coliform melegvérű Ms-votnyh formában jellemző sötétvörös, élénk piros vagy rózsaszín telepek sötétebb Center, amelynek fémes csillogás vagy anélkül. Annyira jellemző a növekedési közeg Endo ezek a baktériumok annak a ténynek köszönhető, hogy ők aktívan laktózfermentálási, amely hasítási termékek okoznak hasznosítás-vissza- jelzõ bíbor, színező kolónia. Hiányában jellegzetes növekedés mintán adott negatív válasz.
Jelenlétében jellegzetes telepek közülük nem kenetet, amely festjük Gram és mikroskopiruyut. Ha kenetet asporogének kis Gram-negatív pálcák, majd mozgassa a harmadik szakaszba véglegesség-nek erősítenie a vizsgálati eredményeket.
A harmadik lépésben a tipikus telepek a mikroszkóp alatt, amelyben az érzékelt jellemző mikrobiális sejtek teszik reseeding híg folyékony szénhidrát CFE do (Bulira, Eijkman et al.). Termesztett át 43- 44 ° C-on 24 órán át, majd végül figyelembe. A növény jelenlétében zavarosság, gáztermelés és változó színekben ad pozitív választ, az eredmények, amelyek kifejezett, ha-titer. Ennek hiányában gázosító Xia ad negatív választ, azaz a. E. adatai fermentáció első minta megerősítette.
Coli indexet úgy határoztuk meg membránszűrők. Erre a célra, membránszűrők № 3 (ultra-szűrő) - porózus fóliák készült mikroklet-Kamcsatka (nitrocellulóz), egy pórusátmérője 0,7 um. Mielőtt vannak kitéve steriiszűrést duplán forralva desztillált vízben 15-20 percen át. Ezután ste-steril csipesszel-szűrőt, hogy megakadályozzák pre proflambirovannuyu felülete Seitz szűrő eszköz. Keresztül Seitz szűrő végezzük szűrés keretében Waku-elme bizonyos vizsgálati folyadék mennyiségét (via egy membránszűrőt - 100 ml víz).
Szűrésével filtroval szabad vége a lemez-nek részlegesen szétszerelése az eszköz. A ste - steril csipesszel a szűrőt helyezünk fel a felületre, iszap Endo közegben egy Petri-csészébe töltött szorosan nyomni CFE de. Az egyik csésze szűrő helyezhető 4-5. Miután cul-tivirovaniya termosztátban 37 ° C-on 18-24 órán át Calc Pipeline kinőtt telepek a szűrőn csoportra jellemző-nN Escherichia coli. 2-3 telepek tipikusan a színezett és színtelen take anyagot keneteket, megfestettük Gram festés és mikroskopiruyut a merülő lencséjű.
Ha jelen van a kenetek kis asporogén Gram coli telepeket a többi a de-ugatás reseeding fiolákba egy kis térfogatú folyadékban szén-vizes közegben (a közepes vagy Bulira al.). Termesztett át 43-44 ° C-on 24 órán át a szabad gázosító -. Ez utóbbi adat jelenlétében coliform baktériumok.