Módszerek szövettani elemzése - fiziológia - módszerek - cikkek Directory - fiziológia és biokémia

olvasztókemence készítmények

11-a számlálók, edények.

Fixálás. Miután anyag mikroszkópos vizsgálat, ez kerül a rögzítő folyadék. A cél a zár be van zárva, hogy késleltesse a bekövetkezett változásokat szövetekben izolált élő szervezet és megőrzése szöveti és sejt struktúrák az állam életük épületben.

Abból a célból, egységes mosását szövet rögzítő darab, a tartályt rázzuk egy időszak néhány (1-2) óra. Az egyenletes impregnáló anyagot rögzítő darab szervek venni mérete 0,5-1 cm.

Ahogy a rögzítőelemet használt 10% -os formalin-oldatot, sóoldatban készített, így például desztillált vízzel okai árvíz és jelentős a szövetek duzzanata. A hisztológiai és hisztokémiai vizsgálatok Bouin folyadékot használnak tartósítószerként. A rögzítő tárolható - a 48 óra és 30 nap.

Mosás és a kiszáradás az anyag.

Mosás a biztosított kezdeti tisztítási az anyagot a rögzítőelem és a különböző csapadék előforduló a rögzítés során. Készült mosás folyó csapvízben 10-20 percig.

A kiszáradás, egy sor alkoholok (etanol), hogy a koncentráció 70 és 100%.

Ahhoz, hogy jó mikroszkópos készítmények nagy jelentőséget van fokozatos kiszáradás, mint a gyors kiszáradás szövet (különösen azok, amelyek a laza állag) zsugorodhat és deformálódhat (Eliseev, 1954; 1959).

A következő eljárás használható víztelenítő alkoholok:

70% - 2 óra. 80% - 12 órán át. 90% - 2 óra. 96% - 1 óra. 100% - 1 óra.

Alkoholok időszakonként frissítik állítja, mint az üzemeltetés során az árvíz és a szennyező anyagok a kivonható anyagok, különösen a zsír.

Öntés megszilárduló anyag közegben.

Víztelenítés után fragmensek szervek gondosan promakayut szűrőpapíron helyeztük 1% -os oldat celloidin.

Egy oldatot, amelyet 1 g celloidin 100 ml elegyének egyenlő részeinek alkohollal és éterrel. Ebben a koncentráció celloidin könnyen ez behatol a belső az objektumot, és teljesen impregnálja azt. Az átlagos időtartama a tartalmat anyagot celloidin oldatot 6 napig.

A következő lépésben az anyagot tisztítani celloidin. Erre a szerv és szövet mintákat mossuk, két órával a kloroform, majd 2 órán keresztül termosztátban 37 ° snegopodobnoy tömeg képviselő telített oldatával paraffinviasz kloroformban. Következő tartott termosztátban 56 fok tiszta paraffin impregnáló 1 órán át. majd a mintákat átvisszük egy tiszta viasz - 1 órán át. Ezt követően, a darabok töltjük 100 g paraffin viaszt és 5 g gyorsan lehűtjük vízben a jeget, hogy megakadályozzák a légbuborékok keletkezését a paraffin blokkokat.

A kapott paraffin blokkokat fuzionált fa tégla, biztosításához szükséges vágási blokkok szövet mikrotomon.

Használt tokozóanyagként fehér viasz, amelynek olvadáspontja nem magasabb, mint 52- 54 ° C-on A nagyobb képlékenység paraffin plusz 5% méhviaszt. Annak érdekében, hogy kiszorítsa gázok az olvadt viasz többlet többször forró lemezen melegítjük, zárt hélix majd gyors hűtést jeges fürdőn.

Előállítása szeletek termelt Sannomiya mikrotom a mikrotom kések. A vastagság a kapott szelet - 1, 2, 3. 4, 5, 6 mikron.

Eltávolításához redők és raspravki szalag vagy sorozat szeletek kerülnek felületére széles hajó (kristályosító) vízzel hőmérsékleten 40 ° C-on szeleteket Raspravka tett boncolótűvel. Ezután kiegyenesedett részt helyezünk egy speciálisan előkészített tárgylemezre, és szárítjuk egy külön táblázatban felmelegítjük 370 fok. Szemüveg zsírtalanítjuk a egy alkohol-éter (1: 1).

Egy tartósabb ragasztás paraffinos metszeteket A tárgylemezeket óvatosan előkent fehérje keveréket arányban glicerinnel 1: 1. Károsodása, hogy csúszik egy vékony réteg az elegyet láng fölött, hogy eltávolítsa a nedvességet az alkohol lámpa. Továbbá, ezek a kötéséhez használt üvegben szakaszok a gyógyszer. Üveg jel tinta kevert fehérje (1: 1) és égetett.

Festés előtt szakaszok, valamint szárított és ragasztott, tárgylemezre mentes viasz. Ehhez metszeteket helyezünk 30 másodpercig. I. xilolban 30 másodpercig, majd. xilol II. Miután feloldjuk a viaszt készítmények inkubáljuk 1 percig. 100% -os etanolban, majd 1 perc. 70% -os alkohollal. Miután alkoholok készítmények desztillált vízzel öblítjük.

Festése szeletek szerinti eljárással előállított a Mallory (Roskin, 1951).

Szakaszok desztillált vizet át 0,1% savas fukszinnal oldatot 3 percig. Ugyanakkor szerezzen rózsaszín szakaszok. A következő lépés - 5 perc. egy 1% -os foszfomolibdénsav. Ez a megoldás biztosítja savas fukszinnal elszíneződés. A metszeteket desztillált vízzel leöblítjük, majd 1 percig. elegyébe merítjük be az anilin kék narancssárga G és oxálsav. (Az elegy Mallory) (Roskin, 1951).

A festés után a metszeteket differenciált 70% -os alkohollal (2-3 mp.), És 96% -os alkohollal (2-3 perc.), Keresztül tartott xilol és zárt Kanadában balzsam. Félkész termék, amely korlátlanul tárolható, tanulmányait a nagyítással lencsék 8 x. 40 x. 90 x (merítés).

Rögzített szöveti metszetek mikroskopiruyut gyógyszerek a készülékek „Olympus” (Japán) és a „Jenamed” (Németország).

Válogatás növekedés, ha figyelembe vesszük tárgyak függ bizonyos feladatokat - 40 x 1000 x.

• a ivarmirigyek - az átmérője érett és éretlen petesejtek oocitákat magátmérő, a távolság a petesejt membrán a sejtmagba komponenseként oocita érettségi állapotú (. Sakun, Butsko 1963), deformálódtak oociták kondicionálja citoplazmatikus hím szexuális érettség szakaszában termékek (AF Turdakov 1972), az állam a falak a ampullák és az erek;

• máj - parenchyma és a kötőszöveti szerkezet, az átmérője a sejtmagok hepatociták, a feltétel az erek, az állam a citoplazmában hepatociták;

• lépben - ugyanaz, mint a máj, valamint a méret a vörös és fehér pép, a vérsejtek jelenlétét, a felhalmozódása a pigmentek;

• vese - feltétele a hám a megcsavart csatornák, az állam a vérképző, kötőszövet, a Bowman-tok, a felhalmozási pigmentek.

Cytometric kísérleteket végeztünk okulármikrométer méretarányú az egyes egyedi mikroszkóp