Biotechnológiai vektorok kineziológus
Biológiai (Biotech) vektorok - egy biológiai szerkezet, amely képes bemutatni idegen genetikai anyag sejtbe: plazmidok, bakteriofágok, vírusok.
A „vektor” kifejezés a tudomány, általában azokban az esetekben, ahol ez szükséges hangsúlyozni, hogy létezik egy bizonyos irányba.
Tehát már, értelmében a kifejezés lehet érteni, hogy a biológiai vektorok irányított mesterségesen ágyazott DNS-ükben érintetlen célsejtekbe. A bevezetése egy kis mennyiségű DNS-t az ókori bezyadernye prokarióta sejtekben jellemzően plazmidokkal. és ez a folyamat alkalmazásával végezzük kalcium-klorid (CaCl2). Ez a plazmid biovektorov rendszer nagyon jól működik a kis mennyiségű genetikai anyag, a plzmidy magukat - egy kis molekula. De a nagyobb gének már megköveteli más vektorok.
Biológiai (Biotech) vektorok - egy biológiai szerkezet, amely képes bemutatni idegen genetikai anyag sejtbe. Ezek közé tartozik: 1) plazmidot, 2) bakteriofágok, 3) vírusok.
Ezek biovektory használt transzfer másik cellára mesterségesen megváltoztatott DNS, úgynevezett rekombináns.
Egyetlen rekombináns DNS - egy módosított DNS-molekula kombinálásával nyert in vitro ( „in vitro” in vitro), heterogén DNS-fragmentumokat. hogy sehol a természetben nem léteznek együtt.
Például, a rekombináns DNS-plazmidot hívjuk második. amelyben az integrált DNS-szegmens, idegen a baktérium.
Plazmid (episzóma) - egy külön cirkuláris DNS-molekula, a baktériumokban, amelyek meghatározzák extrakromoszómális öröklődés predstalyayut bakteriális sejtekben, valamint a genetikai elem, amely autonóm létezését és tartós replikáció. Általában ez egy kettős szálú, cirkuláris DNS hossza 1-200 kb (Kilobázis).
Száma plazmidok baktériumokban eltérő lehet, és a további plazmidok, a kisebb vannak.
Plazmid átvitellel genetikai információ „saját” baktériumok minden más baktériumok, még ha ezek a baktériumok tartoznak más családok. Ezek tartalmaznak információkat enzimek, biztosítva alkalmazkodás sajátos használata a hordozó az áramforrás vagy enzimek nyújt bakteriális rezisztencia a különböző kedvezőtlen környezeti tényezők: antibiotikumok, stb ksenobioikam.
plazmidok általában elfogott baktériumok a környezet és az általuk használt kapacitásának saját további genetikai információs forrásokat.
mert Baktériumok általában elfog plazmidok a környezet, a plazmid biotechnológiában alkalmazott vektorokat: ők ki a kívánt géneket, és így ezek a gének a plazmiddal együtt vezetjük be a baktérium és kezdenek viselkedni benne.
Mivel a vektorok a biotechnológiában alkalmazott nem csak a plazmid. hanem a vírusok és bakteriofágok.
Bakteriofaki hogyan biovektory
Különösen sikeres tervezett vektor alapján egy ilyen bakteriofág coliphage λ.
Fág λ - mérsékelt coliphage hosszú farok nyúlvány a reszketés és dsDNS genom mérete 48,502 bp A központi része a fág genom nem esszenciális a működésére és arra használjuk, hogy helyezze be a klónozott DNS szubsztitúciós egyetlen felismerési helyet EcoRI restrikciós enzim. Önmagában ez a vektor a rövid csomagolási fág fej (fej mérete korlátozásokat nem csak a tetején, de a minimális hossza a genom). Így, hogy kapjunk egy fág újratermelésére képes alkotnak érett fág részecskéket, vágott szülői vektor szükségszerűen integrálódott idegen DNS-fragmenst. Ez azt eredményezi, egy automatikus szelektív rendszer kiválasztásának kiméra fág genomok. A könnyű kiválasztásának rekombináns fág a nem-esszenciális régiójába a genom behelyezésére használt, beillesztett lacZ-gén. Rekombináns fágok vannak kiválasztva területeken lízis a bakteriális gyep, amelynek fehér színű.
M13 fág - fonalas coliphage kör alakú ssDNS genomot. A rekombináns DNS replikatív formáját a fág, amely egy cirkuláris kettős szálú DNS-t a 6400 bp amelybe be van helyezve a gén lacZ, tartalmazza a polilinkert helyek számos restrikciós enzimekkel. Rekombináns fágok vannak kiválasztva területeken lízis a bakteriális gyep, amelynek fehér színű. A vektorok használata alapján M13 számos pozitív pont. Tehát, egy klónozó ad kétféle fágok egyszálú DNS-genom. Minden típusú tartalmaz csak egy fág DNS-inszertjének szálak, amelyek lehetnek különböző irányokban. Ebben az összefüggésben, a klónozó M13 fágot használva, kényelmes, hogy hozzon létre egy egyszálú DNS-próbákat és DNS-szekvenálással.
Próbálok előnyeit egyesíti a plazmid és a fág vektorok létrehozásához vezetett kozmidok. Ezt a plazmidot a beépített specifikus DNS-szekvenciák (cos - oldalak), felelős a csomagolás a fág λ DNS-t a fág részecskék. Az ilyen vektorok létezhetnek baktériumok plazmidok formájában, de lehet tiszta formában izoláljuk csomagolásuk Fágrészecskékbe in vitro. Value kozmidvektorok az ő nagy kapacitású - vagyis az a lehetőség, klónozás nagy betétekkel. A hossza ezen vektorok is kiszabott korlátok a méret a fejét a fág, de egy ilyen genomban nem feltétlenül jelenléte szükséges gének litikus ciklus.
Ábra: A genetikai anyag átviteli baktériumok plazmidokkal