Embriológiai időszak IVF program értékelése a minőségi petesejtek, sperma kezelés előtt IVF
Az egyik legfontosabb szakaszában a IVF programban - fejlődéstani. Így lesz a becslés minősége és a műtrágyázás és az ezt követő tenyésztés embriók érése függ sikeres in vitro megtermékenyítés.
A siker határozza meg egy adott szakértelmet embryologist, és ellenőrzése ezt a lépést nem támadható. De míg sok nő lesz nagyon hasznos, hogy megtanulják, hogyan tojás megtermékenyítésben és termesztése embriók a színpadra.
Klinika meddőségi kezelés használható erre a célra, különböző környezetben, és függ, többek között a költségvetés és a technológiai felszerelésére.
A táptalajt
Követelmények a alkalmazott tenyésztési tápközeg IVF, nagyon komoly: lehetővé mutatók egybe kell esnie a paramétereket, amely a természetes folyékony közeg szolgál az embriók és petesejtek a női szervezetben.
A főbb jellemzői a közegben kell rendelkezniük:
- pH-érték - 7,4. Pontosan ugyanazt a pH-szinteken van emberi vér. Határozzuk meg a pH segítségével színes kijelző, amely színezni kell vörös-narancs színű;
- ozmolaritás egyenlő 285 mOsm / kg víz. Azt is megfelel a ozmolaritása amely a vér;
- használt víz előállítására A táptalajnak tartalmaznia kell alávetni dupla desztillációs. Az ideális lehetőség, amely gyakorolják sok központok a meddőség kezelésében - víz vásárlása neves gyártók, amelyek garantálják a kiváló minőségű termékei, például Ampuwa, Sigma Company;
Jellemzően, mivel a fehérjeforrás IVF használata humán vagy szarvasmarha-szérumalbumin vagy humán szérum inaktivált. Szerda néha hozzá aminosavakat, azok a petevezetékben képviselőinek bizonyos családok emlősök. De a stabilitás tenyésztési körülmények azt mutatják, nem az összes aminosavat. Amint a környezeti hőmérséklet eléri a 37 fok, törnek, felszabadító az elemek, így toxikus.
Ezen túlmenően, táptalajok használhatók in vitro megtermékenyítés, tartalmazhat nukleotidok, vitaminok és nyomelemek.
CO2 kultivátor
Tenyésztéséhez petesejtek és embriók IVF során szükséges jelenlétében 5% CO2-levegő, a páratartalom nem kevesebb, mint 80% és nem több, mint 90%, és a hőmérséklet 37 fok. Az optimális arányt ezen mutatók alkalmazásával lehet elérni CO2 inkubátorban, amely automatikusan fenntartja a kívánt teljesítményt. A szén-dioxidot vezetünk be egy speciális tartály, és a környezeti levegő, a szükséges páratartalmat felhasználásával érjük el a víz elpárolgása.
Minőség értékelése a petesejtek
Abban a pillanatban, amikor az eljárást végzik IVF follikuláris szúrás, velük együtt gyakran csapdába, és a petesejt-gomolyfelhő, néha a részecskék a follikuláris hám. Mivel tüszőfolyadék tartalmazza a fibrinogén, hogy hozzájárulhat a vérrögök kialakulását, amely megnehezíti az azonosító a tojás. Ahhoz, hogy a folyamat egyszerűsítése, a kapott oociták által punkció, mosott, vagy follikuláris folyadék egy edénybe helyezik a antikoaguláns (heparin).
Tüszőfolyadék ellenőrizzük vérrögök oocita-cumulus, majd öntsük egy Petri-csészébe, és ellenőrizni újra, de a mikroszkóp alatt. Jellemzően a tojás látható szabad szemmel, úgy néznek ki, mint a nyálkás csomókat mérete 5-10 mm.
Detektált oocitákat mosott egy különleges környezetben, majd elmozdulás egy különleges csésze amelyet megtermékenyített petesejt. Erre a célra, Pasteur-pipettával, egy kis gumi villanykörte a végén a kapillárisok vagy üvegből vagy műanyagból, amelyek össze vannak kötve mikroaspiratoru. Az eszközök megválasztása függ embriológussal végző mesterséges megtermékenyítés a tojás.
Miután oocitákat tenyésztőközegben, szakember számára előzetesen értékeli a minőségét, mennyiségét és érettségi fok. És komplex petesejt - gomolyfelhő nem mindig lehetséges, hogy egy valós értékelésének a tojást.
In vitro megtermékenyítés ciklus gyakran a hiányzó szinkron érés során ooplasm atommagok, a legtöbb tojást és kumuluszsejtek.
Indikátorok abszolút petesejt van: átmérő - 110-120 mikron oocita kell körülvenni a fényes film (zona pellucida), több cella sugárzó korona (corona radiata), és több a cumulus oophorus sejtek (cumulus oophorus).
Mi kilyukadt a tojás első meiotikus osztódás kell kitölteni, amelyet követően az első poláris test elválasztjuk. A másodosztályú általában a metafázisban. A kromoszómák formájában egy sor, ezáltal a metafázis lemez, található közvetlenül a fölött a sarki test. A tojás meiózis blokk kerül végrehajtásra, amely képes eltávolítani csak a spermiumok átjutását a héj.
sperma kezelés előtt IVF
Az érett spermium van egy körte alakú fej, kissé lapított, a mérete eléri a hossza körülbelül 6 mm, és maximális szélessége a régióban a egyenlítői szegmens - 4 mikron. Head magból és akroszómájú amely magában foglalja a lítikus enzimek. Emlékeztet sapka található és a fej tetején. spermium farok eléri a mérete körülbelül 50 mikron hosszúságú. Farok származik a fej, a nyak körül, van egy komplex a mitokondriumok és centriole.
petesejt megtermékenyítése
Sperma, mielőtt behatol a petesejt, ami egyre megtermékenyítés lesz leküzdeni számos akadály:
1) cumulus. Mélyebben benyúlik annak belsejébe, spermium növeli a sebességet, bizonyítva fázis hiperaktivitás.
2) zona pellucida. Itt, a spermium kötődik a receptorhoz.
Ezután a akroszomális reakció, amelyben a citoplazma membránon akroszómális membrán egyesítjük. A tartalom a akroszómájú ezután kiengedik, kötődik a zona pellucida, akkor a sperma behatol a tojáshéj elvesztése nélkül tevékenységüket.
A helyszínen található, amely a héj és a tojás zona pellucida, a spermium csatlakozik receptorai receptorok, amelyek székhelye a héj a tojást. Hozzájárul az agykérgi reakció, ami visszafordíthatatlan folyamatokat zona pellucida, ami miatt megközelíthetetlen más spermiumok behatolását. Néhány órával később, a két ivarsejt egyesítik a genetikai anyag, és ott van a zigóta. A kromoszómák kezdenie feldolgozni az első hasítás.
Egy nap elteltével, az oocitákat egy jól tele friss tenyészközeghez, hogy meghatározzuk, hogy a megtermékenyítés történt.
Miután nem lesz hozzá sperma pronukleusz megjelenni (ez történik 10-16 óra elteltével). Újabb 6-8 óra eltűnnek nyom nélkül. Fontos észrevenni őket, mert ez az ő megjelenése arra utal, hogy a tojás megtermékenyítés került sor. Ha van egy pronukleusz, vagy kettőnél több, akkor beszél a fejlesztési folyamatban IVF rendellenes megtermékenyítés.