Szabályokat tartalmazza adagolók
A folyadék hőmérséklete kiadagolt és az adagoló meg kell egyeznie
- Állítsa be a kívánt folyadék térfogata a kezelőgomb (nem telepíthető térfogat értéke meghaladja az adagoló tartomány)
- Wear sapkát és nedvesítse meg a beadás előtt 3-5 alkalommal folyékony, ami lesz kiválasztva.
- Nyomja a hüvelykujját a kezelőgomb az első állomás.
- Alacsonyabb adagolási tip mélységben 2-3 ml oldatot, és lassan kioldógombot (közben meg az kiadagoló függőleges helyzetben tartják)
- Vegye ki a megoldás a hegyét az adagoló cső megnyomásával a művelet gombot, amíg a stop hüvelykujj (adagolt folyadék megérinteni a cső fala a csúcs, megelőzve ezzel a fröcskölést és habzó folyékony dózis)
- Távolítsuk el a csúcsát a hüvelykujjával nyomja le a hegy kinyomó
- Az adagolás befejezése után az adagoló telepítve a állvány
- Állítsa be a kívánt folyadék térfogata a kezelőgomb (nem telepíthető térfogat értéke meghaladja az adagoló tartomány)
- Wear sapkát és nedvesítse meg a beadás előtt 3-5 alkalommal folyékony, ami lesz kiválasztva.
- Nyomja a hüvelykujját a kezelőgomb ütközésig.
- Alacsonyabb adagolási tip mélységben 2-3 ml oldatot, és lassan kioldógombot (közben meg az kiadagoló függőleges helyzetben tartják)
- Vegye ki a megoldás a hegyét az adagoló cső megnyomásával a kezelőgomb, hogy az első ütköző hüvelykujj (adagolt folyadék megérinteni a cső fala a csúcs, megelőzve ezzel a fröcskölést és habzó folyékony dózis)
- Távolítsuk el a csúcsát a hüvelykujjával nyomja le a hegy kinyomó
- Az adagolás befejezése után az adagoló telepítve a állvány
1 liter = 1000 ml
1 mól mmol = 1000
1 mmol = 1000 pmol
Minőségi vizsgálatok protein (szín)
Ezek a reakciók kimutatására használt fehérjék és meghatározzuk az aminosav-összetétel a különböző biológiai folyadékok, nevezetesen:
- Mennyiségének meghatározása a plazma fehérjét
- Meghatározása aminosavak a vérben és a vizeletben
- Azonosítani öröklött vagy szerzett metabolikus rendellenességek az újszülöttek
A szín reakciók:
- Biuret reakció. A minőségi válaszolt a peptid kötést. Ez a reakció az egyetemes minden fehérjék, azért, mert nyit jelenlétében legalább 2 a peptid kötéseket a fehérje. A biuret reakció alapján képes a peptidkötések lúgos közegben képezve a réz-szulfát CuSO4 színű komplex vegyület, amelynek színe hosszától függ a polipeptid-lánc. A fehérje-oldatot (natív) ad kékeslila színű.
- Ksantoproteinovaya reakciót. A minőségi válasz ciklikus aminosavak tartalmazott a fehérje. Amikor adunk a fehérje oldathoz, tömény salétromsav HNO3 és melegítjük a sárga szín jelenik meg, amelyek jelenlétében alkáli bejut narancs. Ennek lényege, reakció, hogy van egy sárga szín miatt nitrált benzolgyűrű alkotnak nitro, jelenlétében kicsapódik ciklusos aminosavak a fehérje.
- Reakció Nogier. Ez kvalitatív reakciója kéntartalmú aminosavak a fehérje (cisztein, cisztin, metionin). Ennek lényege, reakció, hogy az aminosavakat tartalmazó szulfhidrilcsoportok -SH, majd lúgos hidrolízis után a képződő nátrium-szulfid Na2S, amely sókat képeznek egy ólom ólom-szulfid PbS kicsapódni fekete vagy barna. Ez a reakció két szakaszban: az első szakaszban hasítás SH-csoportok az aminosav, és az átmenet a szerves kénvegyületek szervetlen; egy második lépésben a kvalitatív kimutatására a kén-ionok az oldatban.
- Ninhidrin reakció. Ez a válasz jellemző az aminocsoportokra -NH2 az alfa-helyzetű, és jelenléte miatt az alfa-aminosavak a fehérjemolekula. Amikor a fehérje melegítjük vizes Ninhidrin bekövetkezik amino bomlás szén-dioxid és az ammónia, a megfelelő aminosav-aldehid és a redukált ninhidrin, amelyet ezt követően kondenzációs az ő okislonnoy és ammóniával reagáltatva a színes termék képződése, azaz a. E. páralecsapódás átöblítjük ninhidrinnel amino lila kék vagy piros-lila színű. Ez a termék az úgynevezett diketogidrindilidena-diketogidrindamina (DIDA). Ez a reakció széles körben használják a biokémiai laboratóriumokban számszerűsítésére az aminosavak biológiai folyadékokban (vér, vizelet, agy-gerincvelői folyadékban, stb), valamint a kvantitatív meghatározására fehérjék és peptidek.
Lab „Chemistry fehérjék”
Célkitűzés: szerkezetének tanulmányozására fehérjék. Színes válasz kimutatására fehérjék és aminosavak
Vizsgálati anyag: 1% tojásfehérje-oldatot
A vizsgálati anyagok előkészítése: tyúktojás fehérje átszűrünk, majd desztillált vízzel hígítjuk 1:10
Felszerelés: vízfürdő termosztát
Laboratóriumi üvegáru: olyan állványt, kémcsöveket droppers.
Tapasztalat №1. Biuret reakció a peptidkötés.
Az elv a reakció: az alapja reakciók a képességét, a peptidkötések lúgos közegben a komplex vegyületet képez, a réz-szulfát, kék-ibolya színű.
Reagensek: 1% -os réz-szulfát-oldattal, 10% -os nátrium-hidroxid-oldattal
Eljárás: A kémcsőben hozzá öt csepp tojás fehérje oldatot, majd 1 csepp egy réz-szulfát-oldattal, 3 csepp (felesleg) nátrium-hidroxid-oldatot, és keverjük össze. A csövek tartalmát szerez a kék-lila szín
Feladat: Bemutatni a tapasztalata a munka formájában egy rajzot, és levonni.
Tapasztalat №2. Ksantoproteinovaya válasz ciklikus aminosavak
reakció elve: nitrálásával a benzolgyűrű gyűrűs aminosavak a fehérje salétromsav melegítés, hogy létrehozzák a nitrovegyületek, amelyek esik a sárga csapadékot.
Reagensek: Salétromsav hígított
Proceedings: egy ampulla hozzá öt csepp tojás fehérje oldatot, majd adjunk hozzá három csepp salétromsavat és melegítjük vízfürdőn. Jelenik meg, sárga csapadék képződik.
Feladat: Képzeld kísérleteket végző egy mintát, és levonni. Írja a reakció nitrálás a tirozin.
Tapasztalat №3. Nogier reakció a kéntartalmú aminosavak
Az elv reakciók: aminosavak tartalmazó szulfhidrilcsoportot -SH, majd lúgos hidrolízis után melegítés és a képződő nátrium-szulfid Na2S, amely sókat képeznek egy ólom ólom-szulfid PbS kicsapódni fekete vagy barna.
Reagensek: 5% ólom-acetát-oldattal, 30% -os nátrium-hidroxid-oldatot
Eljárás: A kémcsőben hozzá öt csepp tojás fehérje oldat, 1 csepp ólom-acetát-oldat, 5 csepp nátrium-hidroxid-oldatot, és az elegyet vízfürdőn. Miután erőteljes forráspontú jelenik fekete vagy barna csapadék.
Feladat: Képzeld, hogy egy kísérlet formájában rajz és levonni. Írja az egyenletet előforduló reakciók a cisztein.
Lab. A téma a „Chemistry of fehérjék”
Célkitűzés: A tanulmány tulajdonságainak fehérjék. csapadékos reakciók
Fehérjék az oldatban tárolt natív (természetes) állapotban miatt a rezisztencia faktorok, nevezetesen, a töltés a fehérje molekula és a jelenléte hidrát (vizes) héj körül. A leválasztási reakció alapul töltés eltávolítása a fehérje molekula és a víz eltávolítását héj körül.
Tapasztalat №1. Kicsapva „kisózás” fehérjék
A módszer elvét. A reverzibilis A fehérjék kicsapása, hogy törlése lerakódás tényezők, protein kicsapódott ismét feloldjuk vízben, és megszerezni natív tulajdonságait, amely megerősíti a biuret reakció.
Kisózás végezzük útján koncentrált oldatok semleges sók, alkáli- és alkáliföldfémsók. Elvesztése különböző fehérjék a csapadékot függ a molekulatömeg és a méret a molekulák a töltésüket.
A kisózás elsősorban a pellet csepp nagy és sűrű fehérjemolekula (globulinok), alacsonyabb sókoncentráció, kisózással és albuminok koncentráltabb sóoldatok.
Vizsgálati anyag: hígítatlan tojásfehérje.
Reagensek: telített nátrium-klorid-oldattal, por nátrium-klorid, 1% réz-szulfát-oldattal, 10% -os nátrium-hidroxid-oldattal.
Proceedings: öntsük egy kémcsőbe 30 csepp hígítatlan tojásfehérje, és adjunk hozzá 30 telített nátrium-klorid-oldattal cseppek. Egy csapadék képződik. 5 perc elteltével, majd a csapadékot leszűrjük. Üvegbottal, hogy eltávolítsuk a csapadékot a szűrőn az injekciós üvegbe, hogy oldjuk fel, hozzátéve, öt csepp desztillált vizet, és biuret reakció. A csövet tartalmazó szüredékhez porított nátrium-klorid-oldattal, amíg a teljes telítettség, azaz amíg leáll só oldódás. Egy csapadék képződik. A csapadékot szűrjük, hogy eltávolítsuk a szűrő, vízben oldjuk, és tartsa vele biuret reakció.
1. Mi a reverzibilis fehérjekicsapássai?
2. Határozza meg, mely proteint kicsap az első helyen?
3. Mi történt a tojásfehérje a folyamat kisózási?
4. Mi a reakció azt mutatja, hogy a fehérje nem vesztette el eredeti tulajdonságait kisózás, ezt a reakciót, és ez határozza meg a fehérjét?
5. amely fémsó használt oldatok a kisózási?
6. Mivel néhány tényező a stabilitás a fehérjék vannak tárolva a természetes állapotban?
Tapasztalat №2 «visszafordíthatatlan csapadék forralás során”
A módszer elvét. Irreverzibilis A fehérjék kicsapása, hogy törlése lerakódása tényezők proteinek elvesztik natív tulajdonságai miatt mély megsértése fehérje szerkezete (szekunder és tercier), azaz a fehérjék denaturálása következik be.
A legteljesebb és gyors kicsapódás figyelhető meg az izoelektromos pont, azaz a pH-értékét a közeg, ahol a teljes felelős a fehérjemolekula nulla.
Fölé hevítve 50-60º fehérje hődenaturációs lép fel, ami az, hogy telepíteni a polipeptid-lánc és a pusztítás hidratációs héj. Ebben az esetben a fehérje oldat zavarossá válik.
Csirke fehérje savas tulajdonságokkal, van egy negatív töltés, és lerakódik a gyengén savas közeg (izoelektromos pontja pH = 4,8).
A erősen savas és erősen lúgos közegben denaturált fehérje nem csapódik, mint egy erős savas közeggel fehérje szerez egy pozitív töltést egy erősen lúgos közegben, és egy negatív töltés a fehérje növekszik.
Vizsgálati anyag: 1% tojásfehérje-oldatot
Felszerelés: vízfürdőben, állvány kémcsövek droppers.
Reagensek: 10% -os nátrium-hidroxid-oldattal, 1% és 10% ecetsav oldattal
Proceedings: Az állvány telepítése négy cső számozott túlfeszültség és valamennyi cső 10 csepp 1% -os tojásfehérje. Ezután, egy vízfürdőben: az első csövet forrásig melegítjük, a második cső adjunk hozzá egy csepp 1% -os ecetsav oldattal, és forrásig melegítjük egy harmadik csőbe adjunk hozzá egy csepp 10% -os ecetsav oldattal, és forrásig melegítjük egy negyedik csőben adjunk hozzá egy csepp 10 % -os nátrium-hidroxid-oldatot és az elegyet felforraljuk. Elemzése a tartalmát az összes csövek melegítés után. (Első és második cső - fehérjét fodros a harmadik és a negyedik - nem.)
Feladat: Határozza meg, milyen vitro fehérje kicsapódni, és amelyben a csövek a fehérje-kicsapódást figyeltünk meg. Magyarázza és levonni.
Tapasztalat №3. Irreverzibilis fehérje kicsapás nehézfémek sói
módszer elve: Proteins kölcsönhatásban sói ólom, réz, higany, ezüst denaturáltuk és kicsapódnak. Ennek alapján a folyamat a fém adszorpció a fehérje molekulák oldhatatlan komplexet.
A feleslegben bizonyos sóit (réz-szulfát), feloldjuk a képződött csapadékot figyelhető meg. Ez annak a ténynek köszönhető, hogy a felület a denaturált fehérje egy felhalmozódása a fémionok és a megjelenése pozitív töltést a fehérjemolekula. A feleslegben ezüstsó, higany fehérje oldódás következik be.
Vizsgálati anyag: 1% tojásfehérje-oldatot
Reagensek: 10% réz-szulfát-oldattal, 5% ólom-acetát-oldattal, 5% ezüst-nitrát oldatot.
Proceedings: a állványra rögzített három cső, számozott és minden egyes csőbe túlfeszültség öt csepp 1% tojásfehérje protein oldatot. Ezután az első cső, 1 csepp egy réz-szulfát-oldattal, egy második cső, 1 csepp az oldathoz ólom-acetát 1 csepp harmadik ezüst-nitrát oldat.
Nézze meg a csapadék a csövekben. Ezután, a kapott csapadékot, adjunk hozzá: egy első 10 cső csepp réz-szulfát, a második cső 10 csepp ólom-acetát-oldatot, a harmadik 10 cső csepp ezüst-nitrát. Figyeljük, hogy mi történik csövekben csapadék feloldódásáig (oldható csak az első).
Feladat: Határozza meg, minden olyan intézkedés, hogy felesleges mennyiségű fémsók bekövetkezik üledék oldódás. Magyarázza és levonni.