A módszer a transzplantáció a szervek és szövetek
A módszer alkalmazható a gyógyászatban, különösen a transzplantáció, és fenntartja a befogadó szervezet immunrendszere, mind átültetés előtt és után, valamint transzplantációs rövidebb idő alatt. A címzett előkezelést úgy végzik, majd a tényleges átviteli szervek és szövetek. Az előkezelési lépés a recipiens izolált eritrocitákat, amely majd betöltött hisztokompatibilitási antigének az első osztályú, a donorból származó, a recipiens parenterálisan betöltve eritrociták és az aktuális használati transzplantációs ugyanazon donortól származó. 1. táblázat.
A találmány tárgya az immunológia területén, és lehet használni, mint a transzplantáció az emberi szervek és szövetek, és a jövőben a rákos betegek kezelésében.
Ismeretes, hogy a hagyományos transzplantáció, még egy előkezelés, vezethet a következő szövődmények: 1) átültetett szerv (amely abban az esetben a létfontosságú szervek elhalásához vezethet a recipiens); 2) változás a immunológiai állapotát a beteg, mert a reakciók - graft versus host vagy host-versus-graft, ami viszont azt eredményezi, hogy a különböző komplikációk megjelenését a másodlagos fertőzések, és amellyel a test nem tud megbirkózni; 3) toxikus sokk szervek (szív, máj és vese) a recipiens, és a transzplantáció magát eredményeként a „orvosi graft védelem” annak érdekében, hogy a fékezési kilökődés.
Ismertek eljárások a transzplantációhoz a hasnyálmirigy szigetecskék cukorbetegség, ahol a cél a gátlási allogén szövet kilökődése recipiens (humán) készített oldatához hozzáadjuk az emberi antithymocyta globulin, például: \ Hu Y.-F. Gu Z. F. Zhang H. D. et al. „Lslet transzplantációs betegeknél I. típusú diabétesz Kínában.” ( "Diabetes" 1989 Vol. 38, Suppl. 1, p. 316).
A hátránya, hogy megsérti a immunológiai felismerése a címzett, a rövid hatástartamú ilyen „védelem” az átültetett szövetek és rendellenességek a véralvadási rendszer.
Minden beteg kivételével egy gyermek kapott karbantartási kemoterápia és / vagy radioterápia infúzió allogén csontvelő (kb 6-7 nappal a transzplantáció előtt) a kilökődés elleni megelőző előkezelést. A donorok 3 beteget fenotípusosan illesztett valamennyi HLA-A, B, Dr, Dw lókuszok lókuszokat, 9 más donorok voltak kevésbé kompatibilisek a recipiens és egyértelműen kiválasztott csak egy lókusz HLA-A, vagy B, és Dw lókuszok. A transzplantáció után minden betegnél reakció profilaxis graft - versus-host betegség, amely magában foglalta így metotrexát és prednizon kombinálva ciklosporin-A (6 beteg), antitimocita globulin (5 beteg) vagy anti-CD5 immuntoxin az A-lánc ricin (1 beteg).
Ezt a módszert általunk választott, mint egy prototípus, és a következő hátrányai.
1. A szükséges illetékek hisztokompatibilisek donor legalább egy lókusz HLA.
2. Az használata kemo- és / vagy radioterápia, mint egy „előkezelés” befogadók 6-7 nappal a transzplantáció előtt, ami további vereség vérsejtek és gasztrointesztinális sejtek.
3. Az erős immunszuppresszáns, megzavarhatják a sejtosztódás, például a ciklosporin A, metotrexát, és mások.
4. eltávolítása immunsejtek (T-sorozat), antitimocita globulin vagy anti-CD5 immuntoxin az A-lánc ricin címzettnek. Ez manipuláció vezet zavar a sejt-sejt kölcsönhatások és gyengíti a szervezet fertőzés elleni védelem.
5. Nagyon alacsony időtartama „élet” a gyermekek (kb 2 év) után egy ilyen nehéz és veszélyes a gyermek teste eljárásokat.
A cél a javasolt módszer - leküzdeni a fentiekben említett hátrányok. A cél érjük el, hogy egy, transzplantálás módja a szervek és szövetek keresztül recipiens előkezelés majd a tényleges átadása érintett szervekben és szövetekben a lépésben előkezelése a címzett izolált eritrocitákat, amely majd betöltött hisztokompatibilitási antigének az első osztályú, a donorból származó, parenterálisan adjuk be a címzett, ezek a betöltött vörösvértestek, és az aktuális használati transzplantációs ugyanazon donortól származó.
A javasolt módszer, a transzplantáció sikerét a szervek és szövetek érjük megőrizve a befogadó szervezet immunrendszere, mind átültetés előtt és után, ez teljesen biztonságos előkezelésére (a klinikailag validált) és a hiányzó szükség gondos kiválasztásával donor.
A javasolt módszer a következő.
1. előkezelés, amikor a címzett vesszük a vénából vért (emberekben körülbelül 5-10 ml). Osztja vörösvértestek. Egyidejűleg átültetett donor szövet vagy szerv izoláljuk a szokásos módon, az oldható hisztokompatibilitási 1. osztályú antigének, például úgy, hogy az eljárás Strominzhera (Strominger JL / szerkezete termékek a fő hisztokompatibilitási komplex ember és egér / Prog. Immunol. N 4, p. 541-554 1980), ami majd a „terhelt” vörösvértesteket címzett. (Vannak különböző módon, hogy „terhelés” sejtek idegen antigéneket - például a „kombinált” ox vörösvértestek és monoklonális antitest / Berthold F. Schumacher R. Schneider A. et AQUAGEOLÓG eltávolítása neuroblasztóma sejtek a csontvelőből közvetlen monoklonális antitest rozetta képzéssel technika / Bone Marrow Transplantation 4, 273-278, 1989). Akkor az ilyen „terhelt” vörösvérsejteket ki a beteg számára, hogy az immunrendszer nem csak a vörös vérsejtek, hanem az összes elfogott a antigének (beleértve az oldható antigének hisztokompatibilitási 1 donor osztály) lesz érzékelhető, mint „saját”, mert most nem fog menni által endoszomális útvonal közös valamennyi elhullott exogén antigének, és lesz érzékelhető, mint egy „hazai” endogén antigének ellen, amelyek nem termelnek antitesteket.
2. a rendeltetésszerű szövet vagy sejt transzplantáció származó rokon donortól. Ezt az eljárást hajtottuk végre hagyományos technikák szerint kipufogógáz 7 nap után az előkezelés.
A javasolt módszer lehetővé teszi az akadályok hisztokompatibilitási nem csak a genetikailag közeli rokon organizmusok, miközben a mentelmi a címzett, amint ez a kísérlet, hanem végre a klinikán xenotranszplantációs hasnyáimirigysziget felnőtt nyúl olyan betegeknél, akiknek súlyos formája a cukorbetegség. Feltehetően, ez lehet az oka, hogy az a tény, hogy miután az előkezelés hisztokompatibilitási antigének leendő donor expresszálódnak nem antigénjeivel hisztokompatibilitási Class II jellemző minden exogén kapott „idegen” antigének, és megkerülje az endoszomális útvonalon az immunsejtekben, és kifejezhető " azok „belső antigének, hisztokompatibilitási első osztályú komplex. Ez vezethet a későbbi megtapadását az átültetett szerv vagy szövet.
1. példa megvalósítása allogén egér hibridóma PPI 31 (amely passzáltuk kizárólag egerekben Balb / c) egereket - hibridek F1 (CBA C57 BL / 6).
A Male F1 (CBA C57 BL / 6J) vérvétel végeztük. A szokásos módon azonosított frakció vörösvérsejtek. A végső térfogat - 1,5 ml. Izolált oldható antigének hisztokompatibilitási osztályú 1 Balb / c egerekben és eritrocitákat töltünk a férfi F1 (CBA C57 BL / 6J). Az elegyhez ezután hozzáadunk 9 ml táptalajt és 199 összes intraperitoneálisan (i / p) 1 ml 10 egerek F1 (CBA C57 BL / 6J).
7 nap múlva az így kezelt hibridek F1 (CBA C57 BL / 6J) intraperitoneálisan adtuk be 15 Mill. 31 PPI hibridóma sejteket (passiruemyh kizárólag egereken a vonal Balb / c) térfogatban 3,5 ml.
Kontrollként kezeletlen hím F1 (CBA C57 BL / 6J) és a hagyományos erre a hibridóma nőstények BAlB-ot / c. Azt is injektáltunk 15 Mill. Hybridoma 31 PPI / B-sejtek térfogatban 3,5 ml.
10 nap elteltével (a szokásos módon) az összes nőstény Balb / c ascites kifejlesztett és elkezdtek meghalni (pozitív kontroll). Minden előkezelt hím F1 (CBA C57 BL / 6J) hasvízkór kezdtek megjelenni csak 20 nap után a kísérlet megkezdése (kísérleti csoport), teszteljük a laboratóriumban AY Baryshnikov (Cancer Research Center), ahol azt mutatja, hogy valóban ez a hibridómasejteket PPI 31. és dolgoznak a hígítás 1: 10.000. A kontroll egerek, az azonos (negatív kontroll) nem figyelhető meg semmilyen rendellenességet a belső szervek a teljes megfigyelési időszak (7 hónap). (A bemutatott adatok a táblázatban).
2. példa végrehajtása xenogén transzplantációs humán hasnyálmirigy szigetecskék felnőtt nyúl.
Elvégzett munka alapján NIIT és RI Kutatóintézet (Transzplantációs és mesterséges szervek) a betegek egy súlyos formája a cukorbetegség.
A beteg a könyökvénából vénából vért vettünk - 8 ml. Izolált vörösvérsejtek. A különösen nyúl (minden beteg - a) izolált oldható antigének hisztokompatibilitási 1. osztályú. Kombinálva vörösvértestek (végső térfogat elegyét körülbelül 6 ml). És az ilyen „terhelt” vörösvértestek térfogata 6 ml (körülbelül 50 millió vörösvérsejt) védték novocain oldatot a rectus abdominis izmokat. Ez a bevezetés nem okozott szövődmények (véralvadást véralvadásgátló, vese, szív, máj, stb), és nem voltak allergiás tünetei. 7 nap után a beteg hasnyálmirigy transzplantáció már korábban végzett módszerrel NN prokultivirovannyh Skaletsky (szövettenyésztő laboratóriumi és TRI IO) 2 napig.
3. példa: A beteg L. 45 éves. A diabetes mellitus diagnózisát, súlyos károsodott májfunkció, angiopátia felső és alsó végtagok. Ő szenved cukorbetegségben 25 éve. A történelemben - kóma. Transzplantációs hasnyáimirigysziget nem végeztek.
A beteg a könyökvénából vénából vért vettünk - 8 ml. Izolált vörösvérsejtek. A különösen nyúl (minden beteg - a) izolált oldható antigének hisztokompatibilitási 1. osztályú. Kombinálva vörösvértestek (végső térfogat elegyét körülbelül 6 ml). És az ilyen „terhelt” vörösvértestek térfogata 6 ml (körülbelül 50 millió vörösvérsejt) védték novocain oldatot a rectus abdominis izmokat. Ez a bevezetés nem okozott szövődmények (véralvadást véralvadásgátló, vese, szív, máj, és így tovább. D.) És nem allergiás tünetei. 7 nap után ez a beteg hasnyálmirigy transzplantáció már korábban végzett módszerrel NN prokultivirovannyh Skaletsky (szövettenyésztő laboratóriumi és TRI IO) 2 napig.
2 hónappal a transzplantáció után a hatékonyság értékelték pozitívan. A páciens neuropátia, 50% -kal csökkent, hogy szükség van az exogén inzulin. Jelentős javulást a máj működését. A beteg működteti a jelenleg (visszautasította „nyitott kórházi lap”).
A fenti adatok azt mutatják, hogy a módszer sokoldalú, alkalmas mind allogén és xenogén transzplantációk és immunológiailag teljesen biztonságos.
A módszer a transzplantáció a szervek és szövetek keresztül recipiens előkezelés majd a tényleges átadása érintett szervekben és szövetekben, azzal jellemezve, hogy az előkezelési lépésben a címzett izoláljuk eritrocitákat, amely majd betöltött hisztokompatibilitási antigének az első osztályú, a donorból származó, parenterálisan adagolhatjuk a betegnek a betöltött eritrociták és lépésben a tényleges transzplantáció ugyanazt donor.