Típusú tenyésztett sejtek
Típusú tenyésztett sejtekben. Folyamatos sejtvonalak
Bizonyos típusú sejtek osztódnak in vitro csak néhány alkalommal, mások túlélni akár száz sejtvonal; vannak olyan sejtek, amelyek szaporodnak a végtelenségig. Ezek a különbségek, amelyek jellege nem teljesen világos, szálljon felosztva tenyésztett sejtek három fő típusba.
Elsődleges sejttenyészetekben. A sejteket csak vett az állatot, és átvittük a kultúra, képviseli a különböző típusú; a legtöbb ilyen sejtek képesek nagyon korlátozott növekedési in vitro - látszólag nem több, mint 5-10 megosztottságot. Azonban ezek a sejtek szaporodni tudnak sok vírus, azonban primer tenyészeteket majomveséből származik, humán embrionális vese, humán amnion, csirke embriókat és egér embriók, azokat széles körben használják a laboratóriumi vizsgálatok és a vakcina előállítására.
Diploid sejt-törzsek. Ez az egyik fajta sejtek, amelyek képesek alávetni in vitro 100 hadosztály, miközben az eredeti hiba diploid kromoszóma (Hayflick, 1965). Diploid törzse származó fibroblasztokat humán embriókat általánosan használt diagnosztikai virológia és vakcina előállítására, és szintén alkalmazták kísérleti vizsgálatokban. Meg kell jegyezni, hogy bizonyos funkciókat a virális genom végrehajtását csak olyan sejtekben, amelyek megtartják a normális szintre a differenciálás.
Folyamatos sejtvonalak. Ez az egyik típusú sejt; amelyek képesek szaporodni végtelenségig in vitro. Az ilyen „halhatatlan” vonal általában tumorokból származnak vagy transzformált diploid sejt-törzsek. gyakran elveszítik hasonlítottak azokra a sejtekre, akitől, mint egy hosszan tartó művelés alá számos egymást követő mutációk. A leggyakoribb indikációja Ezen változások dedifferenciálódása, t. E. Az eltűnése a morfológiai és biokémiai jellemzők, mely sejtek rendelkeznek in vivo. Például, a mikroszkóp alatt, lehetetlen különbséget tenni egy sor hámsejtek ektodermális eredetű és eptodermalnogo és fibroblaszt vonal mezodermális eredetűek. A sejteket transzplantáltunk gyakran aneuploid vonalak és képes tumorokat, ha a transzplantált állatok.
Folyamatos sejtvonal HEp-2. HeLa és KB Letöltés most, ami a kezdetektől az emberi rákos megbetegedések, sok támogatja a reprodukció a vírusok. Ezek a vonalak, és a vonalak származó egér szöveti sejtek (L929, RTM) és a hörcsög (BHK-21), széles körben alkalmazták kísérleti virológia; jelenleg ismert számos folytonos sejtvonalak sejtekből származó különböző állatok. Az American Type Culture Collection tárolt fagyasztott állapotban, sok vizsgált sejtvonal hiányában exogén vírusok és mycoplasma.
A nagy előnye a folyamatos sejtvonalak, mint perrichnymi sejttenyészetekben, hogy ezek a vírusok a végtelenségig átültetésével sejtek rendszeres időközönként. Továbbá, sejtek életképesek maradnak sok éven át, amikor alacsony hőmérsékleten tárolnak (-70 - 196 ° C), mint szuszpenzió glicerin vagy dimetil-szulfoxidban. Mivel a cellák a sorozatos passzálás elkerülhetetlenül változik a laborban általában tároljuk alacsony hőmérsékleten nagy számú ampullák sejtek és azokat használni vetőmag előállítására tételek követelményeit kielégítő a kísérlet.
Néhány folyamatos sejtvonalakat alkalmazkodott a növekedéshez szuszpenziós tenyészetben, ún, t. E. Egyetlen sejtszuszpenziót, amely állandóan keverjük forgó mágnessel. Az ilyen kultúrákban különösen hasznosak a biokémiai vizsgálat a vírus szaporodását és ipari vakcina előállítására.
A molekuláris biológia, a halhatatlanná tett sejt tenyészetet használják nagy sikerrel a tanulmány makromolekuláris folyamatokat. Gyakran szuszpenziós tenyészeteket alkalmazunk, amely egy nagy és homogén sejtpopulációt szinkronizálható megfertőzni egy vírus, majd gyorsan, hogy a szükséges mintákat. A nőnek nagy mennyiségű képes sejtek egyre csak egyrétegű vagy vírusok inkább proliferálódnak be egyrétegű sejttenyészetekben, használt nagyszabású „spinner” kultúrákat, amelyben a sejtek kapcsolódnak, mint egy egyrétegű, hogy a belső felülete hengeres edények, lassan forog egy vízszintes helyzetben.