Módszerei szövettani vizsgálatok a sejtek és szövetek

A szövettani és fejlődéstani kutatások elválaszthatatlanul összekapcsolódik, és ez a módszer. Leggyakrabban ezekben a vizsgálatokban használt fénymikroszkóp. Szintén hagyományos fénymikroszkóp a Szövet- és Fejlődéstani mikroszkópok különleges célokra:
  • fáziskontraszt;
  • interferenciát;
  • mikroszkóp sötétlátótér hűtővel;
  • lumineszcens vagy fluoreszcens;
  • polarizáció.
    Fáziskontraszt és interferencia mikroszkópok hűtővel sötét mezőket, hogy tanulmányozza festetlen sejtek és szövetek. Fluoreszcens mikroszkópok használják, hogy tanulmányozzák a természetes és mesterséges lumineszcencia a sejtek és szövetek. Polarizációs mikroszkópok vannak kialakítva, hogy tanulmányozza a ultrastruktúráját sejteket egy legitim, szabályos szerkezet. Elektronikus és raszteres tanulmányozására használható ultrastruktúráját sejteket. Sztereoscan mikroszkópok így háromdimenziós képet a kutatás tárgyát.

    Meglehetősen gyakori módszer szövettani vizsgálata során az egész, osztatlan tárgyakat, és maguk a teljes gyógyszerek. A teljes hatóanyag lehet elkülöníteni a vér, nyirok, a csírasejtek, korai fejlődési szakaszában embriók, vékony film növényi és állati szövetekben.

    A tanulmány a tárgyak többsége fényében a sugárzott fény szükséges, hogy azok a vékony, világos és kontrasztos. Annak érdekében, hogy egy vékony tárgyat meg kell vágjuk vékony lemezek, amelyek az úgynevezett szövettani metszeteken. Ahhoz, hogy a tárgy megmarad in vivo struktúra lehetséges, hogy fix, és annak érdekében, hogy ez a kontraszt, használja ezt a módszert.

    Módszer rögzített és megfestett állandó preparátumokat

    Ez a módszer az elsődleges, vagy klasszikus. A gyártási létesítmény tanulmányait progruzhat megtartani folyadékokat, amely denaturálja és stabilizálja a fehérjéket és egyes vegyület szerkezetét meg kell vizsgálni. A leggyakoribb fixáló formalin. Ő varr fehérjék metilén hidak, ami a denaturáció. Miután rögzítő és mosás vízzel a vizsgálat tárgya lehet vágjuk vékony lemezek, fagyasztás előtti ez egy speciális fagyasztó mikrotom # 151 eszköz, amely felhasználásával előállított szövettani metszeteken. Befagyasztására egy tárgy gyakran használják folyékony szén-dioxid, vagy elektrozamorazhivayuschuyu telepítést. Azonban, ezzel a módszerrel a feldolgozás készített anyag elég vastag szövettani metszeteket. Gyártására vékonyabb szeleteket 2 mikron vastag, a tárgy a kutatás szükséges impregnálására az anyagot, amely tenné sűrűbb. Az ilyen anyagok a paraffin, a zselatin és celloidin. Object Fixálás és mosás után merítjük szekvenciálisan növekvő koncentrációjú alkohol # 151 50-100 fokos annak víztelenítési és impregnált zselatinnal, viasszal vagy celloidin. Az impregnálás után és tömítése az objektum lehet vágni egy mikrotoma.
    Szövettani metszeteket azután megfestettük speciálisan kiválasztott festékek, amelyek többsége szelektív megfestésére a szerkezeti elemek a sejtek és szövetek. Minden színezékek három csoportba sorolhatók:
  • lúgos. vagy nukleáris. Ezek a sejtek festett nucleus, és néhány más szerkezetű, savas reakció, mint például az endoplazmatikus retikulum. Egy példa alkálifém festékek lehetnek az Hematoxylin, kármin, szafranin;
  • savanyú. vagy citoplazma amely megfesti a sejtek citoplazmájában. A leggyakoribb savas színezék eozinnal, pikrinsav, sav fuchsine, indigókármin;
  • Speciális # 151 szelektíven festett szerkezeti elemek a sejtek vagy specifikus kémiai anyag jellegét. A leggyakoribb színezékek különleges célokra a szudán III, osmielovaya sav, színező zsírok és zsírszerű anyagok; orsein, elasztin festéssel.
    Festés után szövettani metszeteket gyorsan dehidratáltuk alkoholokban, megvilágítsa xilolban vagy toluolban, átvisszük egy csúszda, öntsünk egy vékony réteg kanadai balzsam vagy polisztirol és borított fedőlemezt. Balsam, polisztirol és az üveg van ugyanaz a törésmutatója, és a fénysugarak szétszórva minimálisan, áthaladva a gyógyszer.

    Eljárás in vivo vagy vitális festéssel sejtek és szövetek

    Kísérleti állatok a véráramban vagy injektáljuk a hasüregbe színezékek, majd megvizsgálták azok lokalizációja a sejtekben és szövetekben. Ezért ezt a módszert, a szerkezet vizsgált élő sejtekben, és vizsgáljuk meg anyagcsere-folyamatokat. A leggyakoribb vitális festékkel tripánkék, semleges vörös, Nile kék, használnak nagy hígításokban # 151 1. 1000 vagy több.

    Eljárás ideiglenes készítmények

    Az előnye, hogy az ideiglenes alkalmazottak az állandó a sebesség a termelés és a lehetőséget, hogy tartsa élő sejtek és szövetek. Ideiglenes készítmények készült kenetet, kenet, vékony filmeket, vagy osztott objektumok nyújtás a falak üreges szervek. Tárgyak tekintve egy csepp vizet vagy sóoldatot, vagy ömlesztett formában, vagy színezés őket gyenge megoldások alapvető színezékek.

    szövettenyésztő módszer

    Ez nagyon fontos a tanulmány embrionális hisztogenezisében és regenerálására szövet-transzplantáció. Széles körben használják a szövettani és fejlődéstani. A lényege ennek a módszernek az, hogy az egyes sejtek az egyes szövetek izolált steril körülmények között tenyésztjük egy tápközegben, amely sok komponens, amelyek szükségesek a celluláris aktivitást. A sejteket egy meleg vérű állatnak egy inkubátorban testhőmérséklet, és a hideg vérű # 151 szobahőmérsékleten. időről időre a sejteket átoltottuk friss közepes és éveken át használt a kísérlethez.

    Használt kísérletek sejtek, szövetek és embriók Szövet- és Fejlődéstani. Egy ilyen típusú mikro-műveletek lehet például izolált egyetlen sejt, szövet eltávolítása a sejtmagból, az atommag át az egyik cellából a másikba, vagy mozgatni néhány embrió sejtek osztódnak blasztomerek széttöredezik tojást. Mindezek kísérleteket végeznek olyan eszközt használ úgynevezett mikromanipulátorhoz. A szerkezet ezen eszköz tartalmaz egy mikroszkóp, a rendszer a karok különböző fokú folyamatosan kontroll. Ahhoz, hogy csatlakozzon a karokat miniatűr eszközök: üveg kapilláris, tűk, horgok.

    Talált egy anyag radioaktív izotópokkal. Ezt a módszert nevezik hisztokémiai vagy citokémiai kutatási módszer.

    Módszer elektronmikroszkópos vizsgálat

    A tanulmány a gyógyszerek segítségével az elektronmikroszkóp. Az elektronmikroszkópos fénynyaláb helyett a gerenda mozgó elektronok vákuumban helyett az optikai részek # 151 mágneses mezők, elektronok helyett szemek esik a fluoreszcens képernyő vagy egy fotográfiai lemez. A közvetlen növekedése elektronmikroszkóp eléri a 600 ezer. Times.

    Kapcsolódó cikkek