Előkészítése és megfestése vér kenet leukocytaszámot - alapján a szövettani
Oldal 48 68
A morfológiai analízise vérsejtek és a leukocita számlálást vérkenet készítünk. Megfelelően tenni, és jól festett kenetben elengedhetetlen feltétele megbízható eredményeket kapni a tanulmány a morfológiai jellemzői a vérsejtek és a leukocita számlálást. Vérkenet kell felelnie az alábbi követelményeknek: 1) kezdődik 1 cm-re az elején és végén a dia a parttól 2-3 cm-re annak átellenes szélén, a teljes lökethossz fednie kell a 1 / 2-3 / 4 üveg; 2) lehet egyenletes vastagságú helyett hullámos, vastagabb jó kenet csak kezdetben, majd fokozatosan elkeskenyedik, és végződik egy pályán ( „kefe típusú”); 3) A vér réteg nem éri el a széleit az üveg, közte és a szélén az üveg mindig egy néhány milliméter helyet.
Strokes meghaladó 3/4 a hossza a dia, nagyon vastag. Ezek a vastag vörös vérsejtek, vannak egymáshoz szorítva, és a forma egy érme oszlopok, amely megakadályozza a megfigyeléseink szerint a morfológiájuk. Ecsetvonások rövidebb Vi dia túl vékony: fehérvérsejtek nagyon ritkák, és deformált. Ha nincs szabad kenet a szélén a tárgylemez (ami akkor történik, amikor egy nagy átmérőjű üveg őrlésére), a nagy sejtek kerülnek át a szélén a stroke, ami egyenetlenül van szétoszlatva.
A hullám-szerű eloszlása kenet vérsejtek is rossz - vastag metszeteket tartalmaz több limfociták, vékony - több monocita és szegmentált sejtek.
Technika kenet előkészítése. A diák, amely biztosítja, hogy a vér kenetek, jól kell zsírtalanítani és mossuk. Erre a célra, ezek oldatba helyezzük a kálium-bikromát (keverék K2Sg2O7 + erős H2 SO4) 24 órán át (a Chrompick kell kezelni nagyon óvatosan, mert lehet locsolni égési ruhák, harisnya). Ezután az üveget mossuk folyó vízzel 24 órán keresztül, majd szárazra töröltük, és helyezzük egy korsó reakcióelegyet éter spirt-. azokat felhasználás előtt szárítottuk. A csepp vér megérintette a dia úgy, hogy ne érjen az ujját. Egy csepp vér az üveg áthalad. Kenet volt az értéke 1 / 2-3 / 4 a dia, a cseppek átmérője legyen 2-5 mm. Az üveg slide venni a bal kéz hüvelykujj, mutató és középső ujját, hogy egy csepp vér volt a tetején. Vágott üveg, amely biztosítja, hogy a stroke, leadott egy 30-45 ° -os szögben a parttól 1-2 mm előtt a csepp, fogta hüvelyk- és mutatóujjával a jobb keze. Cut üveg csúszott vissza úgy, hogy megérintette egy csepp vér csepp és szétterítik a sarokban a talaj és a csúszda (hátracsapódásához is segít eltávolítani a felesleges vér, ha a csepp volt túl nagy). Aztán gyors előre kézmozdulat, hogy a kenet. Szükséges, hogy a készítmény egy kenetet hüvelyk- és mutatóujjával a jobb keze megcsúszott a szélén a dia, és megteremtse a szükséges támogatást a rá kiszabott egyenletes rétegben a vér. Vágott üveg legyen keskenyebb, mint a cél, hogy csúszik élek mentesek voltak a stroke.
Ha a talaj üveg ugyanolyan széles, mint a tárgy, a sarkok letört a csiszolatos lerövidítése 1-2 mm. Vágott üveg lehet helyettesíteni a fedelet.
Előállítása jó vérfoltot, bár nem nehéz, szükséges egy bizonyos készség. Emlékeztetni kell arra, hogy ez rossz főtt szélütés vezet súlyos hibák a kutatási eredményeket. A minőség a kenet bizonyos mértékig „igazolás” dolgozik egy laboratóriumban.
A festési vérkenetek. Az ilyen módon előállított szárított vér foltok, majd metanollal fixáljuk (3-5 perc) és abszolút etanolt (100%) (10-15 perc), vagy acetonban (5 perc). A legjobb eredményeket mindig rögzítéséről kenetek metil-alkohol *. A rögzítő folyadék denaturált fehérjéket, miközben megtartják az élettartama szerkezete és rögzített keneteket üveglemezekre. Rögzítetlen kenetek könnyen lemosható.
* Ne feledje, hogy a metanol egy erős méreg, és az aceton gyúlékony és robbanásveszélyes folyadék, ezért nem tudják elhagyni a munkahelyet (használat előtt és után), ételek egyértelműen fel kell tüntetni, és tárolja az oldatot biztonságosnak kell lennie.