Diagnózis cryptospo borjak tartalom platform
Szövetségi állam felsőoktatási intézmény Professional Education „Moszkvai Állami Egyetem Állatorvos és biotechnológia
NAME K. I. Skryabina "
M. Sh Akbal, NV Esaulova, OE Davydova
SA Shemyakova, D. N. Shemyakov
Diagnózis cryptospo CALVES
M. Sh Akbal, NV Esaulova, OE Davydov SA Shemyakova, D. N. Shemyakov. Diagnózis cryptospo borjú: iránymutatás. M. FGOUVPO „MGAVMiB őket. „20c.
Módszerek vannak leírva diagnosztizálására cryptosporidiosis borjak adott epizootology, tünetek és laboratóriumi vizsgálatok a modern technikák.
Célja a hallgatók a kari állatgyógyászat, állatorvosi és biológiai kar állat-egészségügyi szakértők és a profilt.
Értékelő: és. kb. Head. Klinikai fertőző betegségek és a fiatal tanár
Jóváhagyta az ülésen az oktatási-módszertani jutalék UPF FGOUVPO „MGAVMiB őket. „Kelt 01.01.01, a jegyzőkönyvet.
Cryptosporidiosis - akut vagy szubakut betegségben áramló fiatal állatok paraziták okozta a nemzetség Cryptosporodium családi Cryptosporidiidae, leválás Coccidiida, osztály Coccidea írja Sporozoa (6).
Emlősökben, két faj okozhat cryptosporidiosis - C. parvum és C. muris (4). Cryptosporidium fajok nem egy szűk specifikus a házigazdák. Oociszták borjak sikeresen fertőzött bárányok, kecskék, patkányok, egerek, éves 3-5 napig (Heine, Boch, 1981). Cryptosporidiosis diagnosztizáltak 12 ember, akik közvetlen kapcsolatban állnak a borjú járvány során cryptospo lett (egy olyan betegség nyilvánul meg hasmenés és görcsök a has) (Reese, 1982).
A természet a fertőzés forrása vad és synanthropic rágcsálók, kutyák, macskák, madarak, akik cryptospo jelentkezik semmilyen tünet a betegség (14). A borjak cryptosporidiosis jellemzi léziók a gyomor-bél traktus, a klinikai tüneteit a betegség rögzítettük főleg a kor 2-20 nap. A szükséges feltétele a fejlesztési súlyos formáinak cryptosporidiosis eltolódása immunológiai indexek. Cryptosporidiosisról is meg kell jegyezni, mint egy opportunista betegség, jelentősen bonyolítja az alapvető - vírusos és bakteriális fertőzések.
Jelenleg kifejlesztett diagnosztikai módszerek cryptospo állatok, de nincs irodalom, amely általánossá az adatokat, és azt javasolta, hogy az állatorvosok a leginkább megfizethető és hatékony módszerek laboratóriumi diagnosztika.
Fejlődési biológia a kórokozó
Parazita a belekben az emlősök Cryptosporidium parvum egy parazita gomoksennym (kifejlesztett megváltoztatása nélkül a hosts).
A külső környezet a belek fertőzött állatok kórokozó formájában szabadul fel az invazív oociszták, oociszta szerkezete emlékeztet a jól ismert parazita protozoák - Amery. Cryptosporidium oociszta eltér ez lényegesen kisebb méretű (átlagos - 4,5 mikron), és fekvő szabadon benne nem zárt sporocisztát, 4 sporozoiták. Cryptosporidium oociszták általában lekerekített, maradék test.
Fertőző oociszták kiosztott beteg állatok vagy hordozót a test egy egészséges állatban alimentáris módon. A vékonybélben a héj törött, felszabadítva 4 féregszerű sporozoita, hogy bejuttatjuk a zóna között a bélbolyhok hámsejtek. ezek nem hatolnak be a sejtek citoplazmájában, továbbfejlesztése zajlik a felszínen a kefeszegély a hámsejtek (mikrovillusok zóna) (4). Egy úgynevezett parazitofor vakuólába: Cryptosporidium érintkezésben vannak sejtekben tövében mikrovilli; mikrovillusok ezek kapcsolódnak, „összeragadnak”, azok membránja fuzionál, korlátozza a parazita A bélből. Közeli bélbolyhok lelapul sorvadás. A része citoplazmájában érintett sejtek kialakult hajtogatott struktúrák - etetés organellum.
Parazitofor vacuolumok vannak kialakítva 24 órán belül a fertőzés után. Bennük van a aszexuális reprodukció a kórokozó - schizogoniát (több hasadási) trophozoiták (képződését lekerekített sporozoiták, hogy elkezdték a takarmány). Schizogoniát jelentkezik 72 órán belül, generált számos schizonták letétbe a kefeszegély más sejtek. Miután a kialakulását a 2. generációs schizonta bekövetkezik gametogony - a szexuális folyamat. Alakult hímivarsejtek (microgamete) egyesülő a nők (macrogametes) a kefeszegély. Zigóta képződik, amely beleesik a bélüregbe, hegek tulajdonába kerül oociszta. Az oociszta spóraképződést (4 belsejében kialakított sporozoita) és a kimeneti már invazív, hogy a külső környezet. Mintegy 80% -a peték látszanak a bélből a széklettel és a vastag bőrt. A fennmaradó 20% a oociszták van egy vékony membrán, és továbbra is a bélben, ami autoinvaziya és szubakut betegség (12).
Prepatentny kórokozó periódus elteltével (idő eltelt attól a pillanattól kezdve a fertőzés az első kiosztási oociszták) borjakban 3-7 nap, szabadalmi (tömeg allokáció oocisztákat) - 8-12 nap. Ennek során a betegség az egész vékonybél (különösen az éhbélben és a csípőbélben) kialakított extenzív részek atrófia és hámlás az epithelium.
A betegség gyakran alakul legyengült immunhiányos állatokban, valamint a gazdaságok, kedvezőtlen streptococcosis, ehsherihioza, vírusos fertőzések (3; 11). Mértéke invázió (EI) borjak elérheti 6-68% mortalitás - 17-50% (1; 7).
Súlyosbodása a járványügyi helyzettől cryptospo az elmúlt években valószínűleg új technológia bevezetésével tartalommal, amelyben az állatokat Aránylag kis területen, és az állatállomány létesítményeket üzemeltetnek nagy terhelés (9). Ez hozzájárul a gyors terjedését a betegség a gazdaságokban kiválasztódását a székletből a betegek borjak már sporulálódott (fertőző) oociszták, jelentős ellenállás a külső környezet (karbantartott életképességét akár 16 hónapon át hőmérséklet-változások, fertőtlenítés hagyományos eszközökkel), és a nagy intenzitású kisülőlámpák (1 g-ban a betegek székletből egy borjú tartalmazhat több mint 1 Mill. oocisztákat) (12).
Fertőzött az első nap az élet, borjak hordozói Cryptospirodium 8 hónapos korban. A fertőzési források néha szolgálni felnőtt tehenek, a személyzet, a macskák, kutyák, rovarok (12). A szennyezés forrása élelmiszer, víz, berendezések, és így tovább. N. Szennyezett kórokozók.
Fertőtlenítéséhez Telyatnikov ajánlott 10% -os formalin-oldatot, vagy 5% -os ammónia-oldatot. amely halálát okozza oocysták 18 órán át. Azt is meg kell harcolni a patkányok mind a nagy fuvarozók és terjesztői fertőzés a gazdaságokban.
Patogenezise és klinikai jellemzői
Cryptosporidium általában lokalizálódik a vékonybélben, legalábbis - a gyomor nyálkahártya, kazuisztika - a légcsőben, kötőhártya a szem. Jelentős változások figyelhetők meg a terminális ileum és a jejunum. Van sorvadás a bélbolyhok kráter alakú mélyedések a hám. Érintett bélbolyhok összecsomósodása, elveszíti kehelysejtek (1; 12). Ennek következtében ez, van felszívódási zavar. Mechanikus megsemmisítése a bélbolyhok paraziták vezet nekrózis. Tartalom bélnedv a gázbuborékok (13).
A kapcsolódási hely a parazita nem microvilli, a szívó felülete a bél jelentősen csökken, jelentősen csökkent, és abszorpciós kapacitása, amely a fő oka a hasmenés. Enzimaktivitás is változik, zavart bél emésztés megy végbe bűzös fehérje bomlása a bélben. Fejleszt intoxikáció másodlagos jellege a szervezet.
Az első jelei a betegség figyelhetők meg az első nap az élet borjak, akkor a betegség előrehaladtával egyre erősebb hasmenés, depresszió, étvágytalanság, gyengeség. Állati ürülék sárga vagy fehér-szürkés, könnyező miatt felszívódási zavar, a bűzös szag - megsértése miatt az emésztő enzim. Gyakran látható csíkok a vér és darab nyálkahártya. A fejlesztés a betegség lehet szüntetni tenezmus fekália flow spontán. A testhőmérséklet során a betegség általában nem emelt, és súlyos - csökken.
A vér is van, eosinophilia, leukopenia, lymphopenia. csökkentette a szérum teljes fehérje és gamma-globulin, glükóz (1; 2).
Szubakut miatt autoinvaziya vékonyfalú oocisztákat maradék a belekben, egy hosszú karakter törlődik a klinikai tünetek és eredményeket a növekedés visszamaradása, hiányt súlygyarapodás és végül -, hogy csökkentsék a reproduktív és produktív tulajdonságait állatok (5).
Betegek állatok az érintett bélben megfigyelt folyamatos vagy foltos hurutos gyulladás a nyálkahártya, a duzzanat és elvékonyodása, a torlódások, fibrin lerakódások és a nyálka, epiteliális hámlás, vérzés. A szövettani mintákat készítünk szakaszok a vékonybél betegek borjak lerövidítése látható, laposabbá bélbolyhok és mikrovillusok atrófia hiányzik, vagy jelentősen csökken glycocalyx. Vakuolizált citoplazmájában enterociták megfigyelt intra - és extracelluláris ödéma, a nyálkahártya és a nyálkahártya alatti réteg a bélfal neutrofilek által és makrofágok, diapedetic vérzése sérült vérerek. Vékonybél mirigy ráncos, és tele van a celluláris törmelék (1, 5).
Bélfodor nyirokcsomók megnagyobbodott, néha véreres, a világos - lédús. Van egy közvetlen összefüggés súlyosságának kóros elváltozásokat a károsodás mértékét Cryptospirodium sejteket.
Hangsúlyozni kell, hogy hasonló változások lehetnek az egyéb okok miatt bélrendszeri bántalmak; cryptosporidiosis megfelelő patogenezise kevéssé ismert (1).
Laboratóriumi diagnózis cryptospo
A diagnózis a cryptosporidiosis létesíthet végzett laboratóriumi vizsgálatok alapján a székletben (in vivo) és a kórbonctani anyag (posztmortem) a járványos, klinikai és patológiai adatokat.
Hogy tanulmányozza a laborban útmutató:
Friss székletmintákat tömege körülbelül 10 g, a végbél, vett 10-20 állatok betegség gyanúját vizsgált minták napján kiválasztása;
patmateriala mintákat holttestekből - kaparékból és kenetet a fertőzött bél helyek vagy részek a vékonybél, ami szükséges, hogy vizsgálja nem később, mint 6 órával halála után az állat.
Előállítása kenetek friss széklet. Egy bevont csúsztatható üveg sovány csepp széklettel, sóoldattal hígítjuk csepp, terjeszteni egy vékony réteg (nyomás nélkül!). A kapott kenet szobahőmérsékleten szárítjuk.
A használata flotációs módszerek. A mintát 3 g széklet helyezünk egy főzőpohárba 50 ml, öntött kis mennyiségű telített vizes nátrium-klorid-oldattal (400 g 1 liter forró vízzel, az oldat sűrűsége 1,18 g / ml), vagy cink-szulfátot (400 g 1 liter vízben, az oldat sűrűsége 1,24 g / ml) vagy egy keverék Pavlaseka (cink-klorid - 220 g nátrium-kloridot - 210 gramm vizet - 800 ml). Óvatosan keverjük rudat adunk üveg élek, szűrjük át egy szitán, és hagyjuk állni 15-20 percig. Ezután, a fém hurkot eltávolítjuk 15-20 csepp a felületi filmet visszük át üveglemezre teszik kenetet, és levegőn szárítjuk.
A centrifugálás alkalmazásának együtt flotációs. A mintát 3 g széklet helyezünk egy 50 ml-es főzőpohárba, adjunk hozzá 15 ml vizet, keverjük, átszűrjük egy fém szitán, öntünk egy centrifugacsőbe és centrifugáljuk, fordulat / perc 1-2 percig. A felülúszót dekantáljuk, a maradékhoz adunk egyik flotációs megoldások fent azonosított, összekeverjük, és újra centrifugáljuk azonos módban. Fém hurok eltávolítjuk 15-20 csepp a felületi filmet visszük át üveglemezre teszik kenetet, és levegőn szárítjuk.
Fixálása kenetet. On szárítjuk kenet alkalmaznak néhány csepp etil (metil) és rögzített alkoholban 10-15 percig, amíg a teljes az alkohol lepárlása. Ezután kenetet festettük az alábbi módszerek.
Színező kenet Ziehl-Nielsen. Ahhoz, hogy előkészítse a Ziehl-oldat egy habarcs készítő bázikus fukszin - 2r hozzá 2-3 csepp glicerin eldörzsöljük alaposan kevertük, miközben fokozatosan etil-alkohol hozzáadása 96 ° - 12 ml, karbolsav - 5 g, desztillált víz - 100 ml. Az oldatot beleöntöttük egy üveg egy szűk dugóval, és elhelyeztük egy nap egy termosztáttal 37 ° C-on, és szűrőpapíron átszűrjük.
Freeze festett keneteken 20 percig karbololajból fuchsin oldatban, mossuk folyó víz, enyhén szárított, és az alkalmazott üveg 7-10% kénsav oldatot 30-60 másodpercig a fehérítés. Mossuk, majd folyó vízzel, és kenet dokrashivayut 5% malachitzöld oldattal 1-2 percig.
Színező kenetet safranin a Kuster. Készítsünk külön 3% safranint oldattal és 5,6% -os kálium-hidroxid desztillált vízben. Alkalmazása előtt a munkaoldatot: 5 csepp frissen vett safranint oldatot, és összekeverjük 1,5 ml kálium-hidroxid-oldatot.
A rögzített kenet megfestettük Safranin munkaoldat 5 percig, vízzel mossuk, aktív szénnel 0,5% kénsav-oldattal 15 másodpercig, vízzel mossuk, 5% -os nátrium-dokrashivayut malachitzöld 10% etanolban 10-15 másodpercig, vízzel mossuk mossuk és levegőn szárítjuk.
Színező elkenődik Romanovsky-Giemsa. Munka színezék oldatot készítünk a mértéke 1-3 csepp festék kész 1 ml vízben (pH = 7,0-7,2). Az egyik preparátumot 3,4 ml hígított festék.
Rögzített festett keneteken 20-30 percig, ami után azokat desztillált vízzel mossuk és szárítjuk.
A szín eredményeket. Szárított kenetet megtekintésekor nagy nagyítású mikroszkóppal immerziós objektívet.
- Ziehl-Nielsen - Cryptosporidium oociszták sav-lekerekített, 4-5 mm-es, élénk piros színű különböző árnyalatai; azok egyértelműen megkülönböztethetők a közös kenet zöld háttér.
- a Kuster - oocisztákat festett halvány rózsaszín.
- Romanovsky-Giemsa - lekerekített oocisztákat nem festett vagy festett gyengén, bennük látható a periférián a sporozoiták hosszúkás enyhén ívelt, halványkék egy piros gyöngy.
Értékelése intenzitását fertőzés átlagosan 10 látóterével mikroszkóp:
+ - alacsony (1-3 oociták);
++ - átlagos (legfeljebb 25 oociszta);
+++ - magas (több mint 25 oocisztákat).
Post mortem diagnózis cryptospo bizonyos nehézségek: kapcsolatban a kis méret a peték, a hasonlóság a külső keneteket zsírcseppecskéket, vörösvérsejtek, stb, valamint a gyors autolízisét .. Kötelező követelmény - a megelőzés a fagyasztás és felolvasztás patmateriala. Kenetek és scrapings etanollal fixáltuk, és megfestettük szerinti Ziehl-Neelsen, majd nézve a mikroszkóp nagynagyítású segítségével egy merülő lencse (5; 13).
A tanulmány kenetet Cryptosporidium peték meg kell különböztetni az egyéb kórokozók, bélgyulladást okoznak a fiatal. Oocisztákat ejmery kenetet - különböző formában, jóval nagyobb Cryptosporodium megkülönböztethetők belül négy sporociszta mindegyike két sporozoiták. Bélféreg tojás - nagy, ovális, kerek vagy bochonkovidnoe, a héj egy összetett struktúra (1).
Mivel a viszonylag nem specifikus klinikai tüneteit bélhurut kriptosporidioznom etiológiájú meg kell különböztetni a bélgyulladás fertőző jellegű, hogy meghatározza a vezető szerepet a kórokozók megjelenését. (20predlozhen módszer indikatív kimutatására vezető kórokozó enteritis Gram-festett kenetek a bélnyálkahártya borjak (1. táblázat).
Differenciáldiagnosztika cryptospo kenetek a bél nyálkahártyáját.
Tekintettel a látómező a mikroszkóp a tanulmány a kenetet
5. Átmeneti módszertani útmutató a laboratóriumi vizsgálatokat állatokon cryptospo (jóváhagyta az Állami Állatorvosi Magyarország 6.9.88 ..) - M. 1988.
8. Pashkin és kor dinamikája cryptosporidiosis borjak telepeken a Leningrád régió // Coll. Tudo. Tr. LVI. - L. 1989 - száma 000. - pp 77-81.
9. Guty borjak // állatgyógyászatban. - szám 1989 8. - pp 46-48.
10. A és mtsai. Megoszlása cryptosporidiosis borjak állattartó telepeken // Leningrád régió C. Scientific. Tr. LVI. - 1989 - № 000. - S.82-85.