Ap №9

Ufa, BSAU, Department of Infectious Diseases,

zoogigieny és vetsanekspertizy

Laboratóriumi munka № 9

A biokémiai tulajdonságai mikroorganizmusok

A cél a képzés. Hogy tanulmányozza a biokémiai differenciálódását mikroorganizmusok. Megkülönböztetése Escherichia és Salmonella tartalmazó tápközegben szénhidrátok és poliolok (szín számát, Endo közepes). A magatartás kémiai és mikroszkópos vizsgálata kultúra és megtanulják a fő képviselői a ammonifikáció folyamatot.

Berendezés és anyagok: Kultúra ammonifying mikroorganizmusok a BCH, az IPA és NRM (Bac.Mycoides, Bac.Mesentericus, Bac.Subtilis, Pfeiffer fukszint, csúszdák és fedél szemüveg, mikroszkópok, égők, meccsek, haszonnövények kulturE.Colli, S.dublinna BCH és IPA, valamint a média szénhidrátot tartalmazó és a többértékű alkoholokat (laktóz, szacharóz, glükóz, mannit, dulcit, stb), Crop ezek a kultúrák közepes Endo petri csészében, cédrusolaj táblázatokban: biokémiai differenciálódás enterobaktériumok - mikrobák bélben Salmonella csoportok. , ammonifying mikroorganizmusok.

Életfolyamatait mikroorganizmusok szorosan kapcsolódik az enzimaktivitást. Minden típusú baktériumok jellemezve, bizonyos enzimek, amely lehetővé teszi, hogy megkülönböztessék őket alapuló más jellemzői és tulajdonságai.

Biokémiai differenciálódás általában igénybe, ha a mikroorganizmusok számos közös jellemzői: nehéz kimutatható növekedés táptalajon sejtek morfológiailag hasonlóak egymáshoz, stb ilyen hasonlóság figyelhető között Escherichia és Salmonella ... Amikor mellett differenciálódásukhoz képességét erjedése cukrot véve gördülő tej, és így gázok, és egyéb tulajdonságait. Tej laktózt tartalmaz, amely erjedésnek E. coli. Ennek eredménye egy sav okai koagulációs a termék. Ha ültetés a tejben a kórokozó Salmonella sav nem képződik.

Biokémiai tulajdonságok - a mikroorganizmusok azon képességét az intézkedés alapján azok enzim hasítja a szerves vegyület.

Megkülönböztetni szacharolitikus, fehérje- és hemolitikus tulajdonságok.

Szacharolitikus mikroorganizmusok tulajdonságai - a mikroorganizmusok azon képességét az intézkedés alapján annak enzimek lebontják cukrok (szénhidrátok).

Enzimek képződött mikrobák képesek hasítani egy cukor (szénhidrát és többértékű alkoholok), hogy aldehidek és savak. Vége termékek fermentációs - szén-dioxid (CO2) és a hidrogén. Egyéb enzimek eltérően reagálnak ugyanazon cukrok. Ez a tulajdonság használt biokémiai differenciálódását mikroorganizmusok.

Szacharolitikus mikrobiális tulajdonságai vizsgálták folyékony, szilárd és félig folyékony táptalajok.

Szacharolitikus tulajdonságok folyékony tápközegben. Hiss kimutatható média (Media cukrokkal), amelyek egy-cukor keverék és az indikátort pepton vízben. A cukrok például laktózt, glükózt, mannitot, maltózt, szacharózt, arabinózt, dulcitot és hasonlók. Ahogy használt mutatók neutrálvörös lakmusz, bíbor elsődleges és t. D. A média lehet folyadék, míg a kis Ulenguta merülő csöveknél csapdázására gáz az a cső alján „gazovki” felborult (célja) egy zárt vége felfelé. Alakult a fermentációs folyamat gáz kiszorítja a környezet része és felhalmozódik a felső rész „gazovki”.

Szacharolitikus tulajdonságok félszilárd táptalajon szénhidrát és a BP mutatója (keverék cián és rozolovoy vizes sav) is megfigyelhető különbség oszlopon agart és felhalmozódása kis buborékok a belső környezet és a felszínén, és a színváltozást. Ha a mutató nem változik semleges (színtelen), savas közegben tart egy kék szín lúgos - piros. Az azonos színű festett és agar. Tiszta tenyészeteket olyan táptalajra szélesztjük, és inkubáltuk egy meghatározott hőmérsékleten (a kórokozó - 37 0 C-on annak érdekében, hogy a szaprofita - 25-30 0 C).

Szacharolitikus ingatlan a sűrű tápanyag médiumok. Biokémiai differenciálás végzik a közép- és Endo. Endo agar tartalmaz a szénhidrát laktóz és elszíneződött világos magenta, ami színtelen lúgos közegben, és a savas környezetben visszanyeri színét (piros).

Amikor a fermentációs laktóz mikrobák sav képződik, kinyerjük fukszin, hogy a színek a vörös telepeket. E. coli (Escherichia) hasítja a laktóz és a közeg oxidálódik. A savas környezetben helyreáll, és a bíbor E. coli kolóniákat Endo közepes festett téglavörös színű, fémes árnyalat. A telepek színe Salmonella baktériumok nem változik, mivel azok nem laktózfermentálási.

Proteolitikus mikrobiális tulajdonságai - a mikroorganizmusok azon képességét az intézkedés alapján azok enzim hasítja fehérjék (fehérje). Fehérjék hasítja mikroorganizmusok alkotnak termék gáz: ammónia, hidrogén-szulfid és indol.

Meghatározása az ammónia. Ammónia (rothasztó termék fehérje lebontás) kimutatjuk a változás rózsaszín lakmuszpapír, amelyek jelenlétében az anyag kék. A vetés csövet, a cső fala és a dugó van rögzítve a tenyészet rózsaszín lakmuszpapír, amelyek jelenlétében az ammónia reagál a gőzével és képződött alkálifém lakmuszpapír kék színűvé válik. Szerint a kék az arca lakmuszpapír ítélik meg ammónia jelenlétében.

Meghatározása a hidrogén-szulfid. A hidrogén-szulfid (a végtermék a kéntartalmú aminosavak - cisztin, cisztein, metionin) lehet kimutatni segítségével szűrőpapír csíkokra mérési 1 cm x 15 cm-es, kezelt 5% -os vizes ólom-acetát és felett felfüggesztett kultúra vizsgált mikrobák. Ha a tartalom kénhidrogén blackens papírt, amely bekapcsolja ólom-acetát-kénsavban. A hidrogén-szulfid a fehérje média formák ammonifiers és más élőlények. Szerint a feketedés a szűrőpapír megítélni jelenlétében hidrogén-szulfid.

Meghatározása indol. Indol (reakciótermék a triptofán aminosav) kimutatjuk nélküli tápközegben szénhidrátok, különösen a glükóz, amely megakadályozza annak kialakulását. Indoloobrazovanie - egyik jellemzője típusának meghatározásában mikrobák, ezért használják a saját differenciálás. Számos módszer meghatározására indol (Ehrlich, Salkovskogo, Strogova et al.), De a legegyszerűbb és hozzáférhető tőlük - Morelli módszer: meghatározást végezzük szűrőpapír csíkokat áztatott telített forró 12% -os vizes oxálsav-oldattal, és kemencében szárítjuk . Papír felfüggesztett ugyanúgy, mint a meghatározása ammonifikáció termékeket. A tenyészetet három napig egy kemencében, majd meghatározzuk a kölcsönhatás a mikrobiális anyagcsere termékek és oxálsav. Pinkness alján a vizsgálati papír jelenlétét jelzi indol.

Meghatározása kataláz. A kataláz enzim bomlik hidrogén-peroxidot, hogy az oxigén és a víz. A fogalom meghatározására egy üveg csepp alkalmazása 2-3% hidrogén-peroxid-oldat és az azonos mennyiségű mikrobiológiai tenyészet. Jelenlétében ilyen típusú mikrobiális kataláz állni gázbuborékok (oxigén).

Hemolitikus tulajdonságok mikrobák képesség - a mikroorganizmusok hatására enzimjei lebontják hemoglobin.

Néhány baktériumfaj a létfontosságú folyamatában termelnek speciális anyagok lízis (oldó) hatása a vörösvértestek. Ezek az anyagok úgynevezett hemotoxin fehérje természetű. Meghatározásához hemolitikus kapacitás oltottuk tápközegben, amely 5% fibrinmentesített vérben (a vér egyre gyakrabban használnak IPA). Növesztve egy közepes vér rendelkező mikroorganizmusok hemolitikus tulajdonságok a telep körül kialakult átlátszó zóna (színtelen vagy színezett) meghatározására az eritrociták roncsolásával. A folyékony közeg hemolízis, amikor a közeg átlátszóvá válik (piros-lakk vér).

1 ismeri tesztek jellemzik a enzimatikus tulajdonságait baktériumok (szénhidrát fermentációs tápközegben Hiss, képződése indol, hidrogén-szulfid, kataláz tesztek).

2-kártya használata egy leírást a tulajdonságait a baktérium kultúra, a meghatározó a mikrobiális fajok priprinadlezhnost telepíteni.

Kérdések önismereti

1 meghatározására szolgáló módszereket tulajdonságok szacharolitikus organizmusok.

2 meghatározására szolgáló módszerek tulajdonságainak proteolitikus mikroorganizmusok.

3 meghatározási módszerei indol, hidrogén-szulfid, ammónia.

4 meghatározása hemolitikus mikroorganizmusok tulajdonságait.