A hibridóma technológiával, egy eljárás a monoklonális antitestek előállítására
Hibridóma - egy hibrid sejtvonal, beszerzése a fúziós kétféle sejt: a termelési képes antitestek B-limfociták lépéből nyert az immunizált állat (általában egy egeret), és mielóma rákos sejteket. A sejtfúziót úgy hajtjuk végre, membrán zavaró szer, például polietilén-glikol vagy Sonday vírus. Mivel mielóma rákos sejtek „halhatatlan”, amely képes megosztani egy nagy mennyiségű időt, az egyesülés után, és a kapcsolódó hibridóma szelekció a monoklonális antitestek előállítására irányuló hosszú ideig fenn lehet tartani az antigénnel szemben.
A legígéretesebb terület a hibridóma technológia. A fuzionált sejtek (hibridómák) vannak kialakítva fúziójával sejteket különböző genetikai programokat, például differenciált normál és transzformált sejtekben. Példa nagy eredménye e technológia hibridóma kapott fúziós normál limfociták és mielóma-sejtek. Ezek a hibrid sejtek képesek szintetizálni specifikus antitestek, valamint a korlátlan növekedés a tenyésztés során. Szemben a hagyományos technikák megszerzése antitest, hibridóma-technológia az első alkalommal lehetséges monoklonális ellenanyagok (antitestek leszármazottai egyetlen sejt). A monoklonális antitestek nagyon specifikusak, ezek ellen irányulnak egyetlen antigén determináns. Előfordulhat, hogy több elleni monoklonális antitestek a különböző antigén determinánsok, beleértve a komplex makromolekulák. A monoklonális antitest az ipari méretű nemrég kapott. Mint ismeretes, a normál immunrendszer képes reagálni a külföldi ügynökök (antigének), hogy akár egy millió különböző faj antitestek, és a malignus sejtek szintetizálja csak egyféle antitest. Myelomasejtek gyorsan szaporodnak. Ezért származó tenyészetekben egyetlen myeloma sejtek tartható fenn sokáig. Azonban, ez lehetetlen, hogy a mielóma sejtek antitesteket termelnek egy specifikus antigénnel szemben. Ezt a problémát úgy oldották 1975 Cesar Milstein. Az alkalmazottak a Medical Research Laboratory of Molecular Biology Cambridge, az ötlet az egyesülés egér myeloma-sejtek B-limfociták lépéből immunizált egér egy specifikus antigénnel vagy hogyan. Egyesülésével létrejött hibrid sejtek megszerezni a tulajdonságait mindkét szülői sejtek: a halhatatlanság és az a képesség, hogy szekretálnak hatalmas mennyiségű egy bizonyos típusú antitest (4.5 ábra.). Ezek a munkák voltak nagy jelentőségű, és új korszakot nyitott a kísérleti immunológia.
1980-ban, Carlo M. Croce és munkatársai (USA) sikerült létrehozni egy stabil, termelő antigének intraspecifikus humán hibridómák fúziójával B limfocitákat myeloma páciens perifériás limfociták betegből származó szubakut panencephalitis. Alapvető lépések megszerzésének hibridóma technológia következő. Immunizált egerek antigénnel, majd lépet izoláljuk lépsejteket fuzionálunk jelenlétében polietilénglikol egy hibás
tumorsejtek (általában deficiens enzimek iparvágány nukleotid bioszintézis - hipoxantin vagy tiamin). Továbbá egy szelektív táptalajra, amely lehetővé teszi, hogy reprodukálja csak a hibrid sejtek végzik kiválasztása. A táptalajhoz növekvő hibridómák jelenlétére vizsgált antitestek. A pozitív tenyészeteket szelektáltuk és klónoztuk. A klónokat hogy állatokba injektálva tumorképződés,
antitestet termelő vagy növekvő őket kultúra. Egér aszcitesz folyadék tartalmazhat legfeljebb 10-30 mg / ml monoklonális ellenanyag. A hibridómákat tárolható fagyasztott állapotban, és bármikor a beadott dózis állatkísérletekben klón a sor, amelyből a sejteket kapott fúziós. Jelenleg a bankok által létrehozott monoklonális antitestek. A használt antitestek a különböző diagnosztikai és terápiás célokra, beleértve a rákellenes kezelést (4.1 táblázat). Egy hatékony módja, hogy használja a monoklonális antitestek terápia való kötődése citotoxikus mérgek. Konjugált antitestekkel toxinokat, nyomon követésére és elpusztítani a rákos sejteket macroorganism meghatározott jellegét.
Így munka előkészítése új monoklonális antitestek létrehozásához ezek alapján a gyógyszerek és a diagnosztika nagyon ígéretesek. Ők hozzák az orvosi gyakorlat, hogy egy új szintre. Hibridóma technológia már áttörést a fejlesztés gyógyszerek a rosszindulatú tumorok kezelésére, vírusos, autoimmun, és sok más betegség. Terápia AI hatásos, nagyon specifikus, azaz a Célja csak bizonyos kóros mechanizmus okozza a betegséget, és ezért viszonylag biztonságos. Már ma 20% -ban alakult biopharmaceuticals termékei hibridómatechnológia. Összesen a világ különböző fejlettségű több mint 350 tartalmú gyógyszerek MA, 70 amelyek a klinikai vizsgálatok során.