A differenciál agar alapja a listeria (casting medium) (ottaviani; aloa medium)
** A kompozíciót ellenőrizni és a szükséges paraméterekhez hozzák
előállítás:
Keverjünk össze 36,0 g por 460 ml desztillált vízben. Forraljuk fel a részecskék teljes feloldódását. Sterilizáljuk autoklávban 1,1 atmoszféra (121 ° C) 15 percen keresztül. Lehűtjük 45-50 ° C-on, és aszeptikusan adjuk hozzá a tartalmát egy injekciós üveg koncentráló adalékanyag L.mono (FD214), a tartalmát 1 ampulla oldott szelektív kiegészítő L.mono I (FD212), és a tartalmát 1 üveg szelektív kiegészítő L.mono II (FD213 ). Keverjük össze, és öntsük a steril Petri ételeket.
FIGYELEM: a lítium-klorid mérgező, ezért ajánlatos elkerülni a kontaktust és a gőzök belégzését; Ha a bőrére kerül, azonnal öblítse ki a reagenst bő vízzel.
Az eredmény elve és értékelése:
Ez az agar az Ottoviani és Agosti (2, 3) alapja a Listeria monocytogenes élelmiszerek és állati takarmányok szelektív elkülönítése és azonosítása; az ISO bizottság elfogadja és jóváhagyja.
Hús-pepton, kazein-hidrolizátum, nátrium-piruvátot és élesztőkivonatot nitrogénforrás tápanyagok és vitaminok szükséges a mikroorganizmusok növekedését. A glükóz egy fermentálható szubsztrát. A nátrium-klorid optimális ozmotikus nyomást tart fenn, és a foszfát a közepes puffer tulajdonságokat biztosítja. A lítium-klorid és egy részét FD212 és FD213 adalékanyagok gátolja a növekedést a szelektív komponenseket kísérő mikroflóra, amely növekedés a Listeria. Ez utóbbi a kromogén szubsztrátum hidrolízisének eredményeként zöld telepeket képez. A differenciálódás Listeria monocytogenes más Listeria alapuló aktivitásának kimutatására a foszfatidil-inozitol-specifikus foszfolipáz C aktivitás (PIPLC). A foszfolipáz C enzim hidrolizálja a tisztított szubsztrátot (FD214) a közeghez. Ennek eredményeként a telepeket a Listeria monocytogenes körül kialakult felhő környezetben található.
Minőségellenőrzés:
A por megjelenése:
Homogén laza könnyű bézs por.
A kész anyag sűrűsége:
1,5% -os agar gél sűrűségnek megfelelő táptalajt kapunk.
A kész anyag színe és átlátszósága:
Az elkészített táptalaj világos sárga színű, opálozik, amikor Petri-csészékben gélt képeznek.
A táptalaj savanyúsága:
25 ° C-on a vizes oldat (7,2 tömeg%) pH-értéke 7,2 ± 0,2.
Kultúra tulajdonságai:
A referencia törzsek növekedési jellemzői 24-48 óra után 35-37 ° C-on
(L.mono - FD212 és FD213 szelektív adalékanyagok és L.mono - FD214 dúsító adalék hozzáadása után végzett inkubálással).