A bakteriofág titrálásának módszere graciával

(sűrű tápközegben)

A tápanyag agart Petri-csészékbe öntjük és termosztátban szárítjuk. Készítsen elő egy félfolyadékot tápláló agart 3-4 ml-t egy kémcsőben, és vízfürdőbe olvad. A baktériumfág tízszeres hígításait a nátrium-klorid izotóniás oldatában. Ezután 0,5 ml mindegyik hígításból bakteriofág összekeverünk azonos térfogatú leves tenyészetből a napi érzékeny baktériumok és bakteriofágok ezt a keveréket öntjük egy kémcsőbe egy félig folyékony agart 45 ° C hőmérsékleten. A kapott elegyet gyorsan öntjük a felületre az első réteg agar a Petri-csészében, ahol megszilárdul, mint egy vékony réteg. A második agarréteg megszilárdulása után a lemezeket 37 ° C-on 24 órán át inkubáljuk. Keverékek bakteriofág kultúra agar és félig folyékony teszik hígításait fág 10 2 -10 10 céltól függően fág titer.

A bakteriofág által nem fertőzött baktériumok szaporodnak, és a tápanyag agar felszínén folyamatosan növekvő gyepet képeznek. Minden bakteriofág-fertőzött baktérium lerázza és felszabadítja az intakt baktériumsejtekbe beültetett bakteriofág utódait, és az egész ciklus megismétlődik. A folyamatos bakteriális gyepen végzett sejtlízis eredményeként "steril" foltok vagy negatív bakteriofág kolóniák jelennek meg. Ezeknek a foltoknak a száma megfelel a vetőmag keverékben lévő fágrészecskék számának. A bakteriofág kezdeti szuszpenziójában lévő 1 ml-es spotképző egységeket titernek nevezzük.

A fagotipizálás módszere nagy jelentőséggel bír epidemiológiai vizsgálatokban, mivel lehetővé teszi a betegségek kórokozói terjedésének forrásának és módjának azonosítását. Az izolált tiszta tenyészet fágjának meghatározását standard diagnosztikai bakteriofágok készletével végezzük. A tenyészet kultúráját a lízis okozta fág típus határozza meg.

A fág-tipizálása baktériumkultúra vizsgálták napi beoltjuk „pázsiton” a felszínen a tápanyag agaron petri csészében, kemencében szárítottuk, osztva az alján a poharat a terek és pipettázzuk egy csepp megfelelő bakteriofág-hígítási tesztet van feltüntetve az ampulla. Az egyik téren a baktériumfágot nem vezetik be a tenyészet növekedésének szabályozására. A csészét 37 ° C-on 18-20 órán keresztül inkubáljuk, majd a reakció eredményét kiértékeljük. A pozitív eredményt a fágok lízise reakció - lízisét a tenyészet a helyszínen a bakteriofág ( „negatív” kolónia) jelenlétében a növekedés a kontrollokban, arra utal jogkövetést bakteriofág és tartozékok alapuló fagolizabelnosti a megfelelő nézet.

Kábítószer a gyakorlatban használt bakteriofágok húsleves tenyészet szűrletet releváns mikrobák lizált fág tartalmazó élő fág részecskéket, valamint a bakteriális antigének felszabaduló baktériumsejtek által lízis. A kapott készítmény - a folyékony bakteriofágnak - olyan teljesen átlátszó folyadéknak kell lennie, amelynek sárga színe nagyobb vagy kisebb. A hatóanyagot sterilitás (vetési módszer), ártalmatlanság és lítikus aktivitás (titer) tesztelésére használják.

A diagnosztikai bakteriofágok mind folyékony, mind száraz formában állnak rendelkezésre, ampullákban. A munka megkezdése előtt a száraz bakteriofágot hígítjuk.

Terápiás és profilaktikus célokra a bakteriofágok tabletták formájában állnak rendelkezésre saválló bevonattal, folyékony vagy kúppal. A tablettázott száraz bakteriofág stabilabb, ha tárolt és kényelmesen használható. Egy száraz bakteriofág tabletta megfelel
20-25 ml folyékony készítményt. A száraz és folyékony készítmény élettartama 1 év. A folyékony bakteriofágot a
+2 - +10 0 C, száraz - legfeljebb +1 0 C, de tárolható a hűtőszekrényben és negatív hőmérsékleten.

A belső bakteriofág a testben marad
5-7 nap. Rendszerint a bakteriofág befogadását nem kísérik semmilyen reakció vagy szövődmény. A felvételhez nincs ellenjavallat.

A bakteriofágok öntözés, öblítés, liofilizáció, tamponok formájában is alkalmazhatók. A bakteriofágok injektálható formái injekciózhatók steril üregekbe - hasi, pleurális, ízületi és a hólyagba. Gyulladásos bakteriofágok felszabadulása a rektális beadáshoz.

Adja meg az antibiotikumok meghatározását. Az antibiotikumok fő csoportjai, a termelési módtól függően: természetes, félszintetikus, szintetikus. Nevezze meg a kemoterápia elméletét kifejlesztő tudós nevét. Milyen tulajdonságokat határoz meg a kemoterápiás gyógyszer kiválasztásakor? Mi a kemoterápiás index, írja meg a képletét, mi legyen az? Jelölje meg az első antiszpikasztikus készítményeket; Az első antibakteriális gyógyszer és annak a tudósnak a neve, aki megkapta. Adjuk meg az orosz tudósok nevét, akik először fedezték fel a zöld penész antibakteriális tulajdonságait. Nevezze meg a Penicillium penészgomba antibakteriális tulajdonságait vizsgáló tudós nevét, és kísérletet tett a penicillin izolálására. A tudósok, akik először kaptak penicillin készítményeket. Az antibiotikumok gyártói - példákat adnak. Az antibiotikumok származási, kémiai összetétel szerinti osztályozása a hatás spektrumával. Az antibiotikumok hatásmechanizmusa: célok (különböző csoportok antibiotikumainak alkalmazása). Tevékenység típusa - baktericid és bakteriosztatikus; hogyan lehet őket in vitro tesztben meghatározni? Vírusellenes antibiotikumok, működésük mechanizmusa. Az antibiotikumok sterilitás, ártalmatlanság, aktivitás ellenőrzése. Módszerek antibiotikumok aktivitásának meghatározására. Melyik egységben mérik az antibiotikumok aktivitását? Az antibiotikumok tárolásának feltételei. Nevezze meg és írja le az esetleges mellékhatásokat az antibiotikum terápiával. Adja meg a "mikrobiológiai gyógyszerrezisztencia" fogalmát. A gyógyszerrezisztencia típusai. Természetes és megszerzett (elsődleges és másodlagos). A gyógyszerrezisztencia genetikai mechanizmusai: kromoszómális és plazmid. A gyógyszerrezisztencia fenotípusos mechanizmusai - név és jellemzés. Az antibiotikumok racionális használata - névmódok. Nevezze meg az antibiotikumokat elpusztító enzimek gátlóit. Ismertesse a mikrobák antibiotikumokra való érzékenységének meghatározására szolgáló módszereket.

Adjuk meg azokat a tudósokat, akik felfedezték a bakteriofág jelenségét. A bakteriofág természete - amelyhez az élőlények királysága tartozik? A leggyakrabban előforduló szerkezet - milyen vegyi összetevőket tartalmaz; dimenziók - milyen mértékegységekben mérik a bakteriofágok nagyságát? Ismertesse a virulens bakteriofág és a baktériumsejtek közötti kölcsönhatást. Hogyan lehet kimutatni egy bakteriofág baktériumok hatását folyékony és sűrű tápközegben? Hogyan néz ki a pozitív eredmény? Mi a bakteriofág titer? Hogyan definiálják és jelölik? Mi az enyhe bakteriofág. Ismertesse az enyhe bakteriofág és a bakteriális sejt kölcsönhatását. Bakteriofágok alkalmazása a gyakorlati orvoslásban, milyen tulajdonságon alapul? A bakteriofágok gyógyszerei, milyen követelményeknek kell megfelelniük? Tárolási feltételek. Adjunk példákat baktériumfágokra, amelyeket a kezeléshez, a diagnózishoz, a fág tipizálásához használunk.

A feladat: a vegyész raktárában a tífusz bakteriofág előkészítése: 10 -7 és 10 -9 titer. Ezen gyógyszerek közül melyik lesz aktívabb? Miért?