Meningococcus és gonokokkusz fertőzések tematikus mikrobiológiai diagnosztizálása
Téma: Meningococcus és gonokokkusz fertőzések mikrobiológiai diagnózisa.
Cél: A meningococcusok, gonkokok és a makroorganizmusokkal való kölcsönhatásuk sajátosságai alapján igazolható az általuk okozott betegségek mikrobiológiai diagnózisa, megelőzése és terápiája.
1. A meningococcusok és a gonokokok biológiájának jellemzői, meghatározva szerepüket az emberi fertőző patológiában.
2. Meningococcus és gonokokkusz fertőzések kialakulásának pathogenesise.
3. Meningococcus és gonokokkusz fertőzések mikrobiológiai diagnózisának anyaga és módszerei.
4. Meningococcus, gonokokkusz fertőzések specifikus profilaxisa és terápiája.
1. Ahhoz, hogy képes legyen mikroszkópos elkészíteni a CSF-ből származó készítményeket, húgycsőhurut és értelmezni a kapott eredményeket.
2. A meningococcus szérummal és a CSF-rel a latex agglutinációs reakció eredményeinek figyelembevétele, értékelése és értékelése.
3. Készítse elő a rögzített keneteket a tiszta kultúrákból, mikroszkópolja őket és értelmezze az eredményeket.
4. Figyelembe venni és értékelni a biokémiai tulajdonságok vizsgálatának eredményét és a vizsgált kultúrák antibiotikumának meghatározását.
5. A vizsgált növényekhez tartozó fajok meghatározása.
1. A meningokócok, gonokokok osztályozása és morfobiológiai tulajdonságai.
2. A meningokócok és a gonokokok virulenciájának tényezői.
3. Ökológia, epidemiológia jellemzői, meningococcus és gonokokkusz fertőzések patogenezise.
4. Meningococcus, gonokokkusz fertőzések mikrobiológiai diagnózisának anyaga és módszerei.
5. A meningococcus fertőzések konkrét megelőzése.
6. A gonokokkusz fertőzések specifikus terápiája.
A leckében végzett feladatok (OIRS):
1. Kísérletezzen egy CSF klinikai vizsgálatot a betegség klinikai diagnózisa esetén:
1.1. A kapott termék metilén-kékkel festett CSF-pellettel történő mikronizálásához a kapott eredményt értékeljük.
1.2. A CSF és a meningococcus szérummal végzett latex agglutinációs reakció eredményeinek figyelembe vétele és értékelése.
1.3. A kapott eredmények alapján következtetést vonjon le.
2. Bakteriológiai vizsgálat a nasopharyngealis kibocsátásról a meningococcus transzport létrehozása céljából:
2.1. Olvassa el a nyálkahártya visszanyerésére használt tampont (demonstráció).
2.2. Értékelje a nyálka vetés eredményeit a hátsó garatfalról a szérum agarra ristomicinnel.
2.3. Készítsük elő a hatóanyagot az alanyból izolált agar tenyészetből, Gram-foltot és mikroszkópiát.
2.4. Annak érdekében, hogy figyelembe vegyék és értékeljék a vizsgált tenyészet beoltásának eredményeit a normál tápanyag agaron, 2 tubus szérum agart (37 ° C, 22 ° C), "motley sorozat".
2.5. Határozza meg a tenyészet antibiotikumát.
2.6. Szerezze be a jegyzőkönyvben kapott eredményeket, és vonja le a következtetést; töltsön ki egy üres irányt és egy válaszformát a tartályból. laboratórium.
3. A betegnek a gonorrhoea gyanúja által előidézett húgycsőhurutból történő előkészítésére. Következtetés.
4. A DSC eredményeinek figyelembevétele és értékelése a betegnek a krónikus gonorrhea gyanúja esetén. Következtetés.
5. Olvassa el és írja le a protokoll biológiai: kémiai meningococcus vakcina + C meningococcus agglutinációs diagnosztikai szérum meningococcus latexagglutinációt, gonococcusos vakcina gonoallergen, rámutatva, hogy azok, hogy mit és hogyan kell alkalmazni.
6. Tesztmunkák: kórokozók.
Módszertani utasítások a kutatási feladat teljesítéséhez:
I. Olyan CSF-vizsgálatot kell végezni, amely az agyhártyagyulladás klinikai diagnózisára alkalmas beteg, amelyre:
· Mikroszkópos vizsgálatot végzünk a kémiai metil-kékkel festett CSF-pelletből, értékeljük a kapott eredményt.
A purulens meningitis egyik kórokozója a meningococcus. A kimutatásukhoz a CSF használatát lumbál punkcióval nyerik. Javasoljuk, hogy az anyagot azonnal a beteg kórházba való belépése és a terápia megkezdése előtt vigye.
CSF - orvosi manipuláció - az aszepszis szabályainak megfelelően - végrehajtása. A tiszta CSF-et 3500 fordulat / perc sebességgel 5 percig centrifugáljuk a vizsgálat előtt, és a keneteket a csapadékból készítjük. A zavaros CSF-ből a keneteket centrifugálás nélkül állítjuk elő. A keneteket metilénkékkel és Gram-mal festettük. A Gram-negatív diplococcus béna-alakú, homorú oldallal és leukocitákkal szembeni észlelése a meningitis meningococcus etiológiáját jelzi.
· A CSF és a meningococcus szérum latex agglutinációjának megállapítása, értékelése és értékelése.
Az agyhártyagyulladás súlyos és gyorsan fejlődő betegség. Ezért fontos a diagnózis a korai stádiumban és gyorsan elkezdeni egy időben etiotróp kezelést. Ezek közül a módszerek, amellett, hogy a lumineszcens RIF immun szérum utal latex agglutináció kimutatása specifikus poliszacharid antigének N. meningitidis A, B, C, Y / W CSF. Nem szabad elfelejteni, hogy a CSF mikroszkópiája nem mindig teszi lehetővé a meningococcusok kimutatását.
A latex agglutinációs reakció beállításához a CSF-et 3 percig 100 ° C-on felmelegítjük és 5 percig centrifugáljuk. A felülúszó cseppje és a latex részecskéket tartalmazó reagens, amely a meningococcusok monoklonális antitestjeit tartalmazza, alkalmazzuk ... és összekeverjük egy speciális bot segítségével. Ezzel párhuzamosan a reakciót szándékosan pozitív kontrolltal végezzük, és a CSF és a latex részecskékkel való reakciót a nem immunizált nyúl IgG-ével végezzük.
Az eredmények kiértékelése után történik 10 perc agglutinációjával jelenség, úgy tűnik, hogy a szabad szemmel. Pozitív reakció - egyértelmű agglutináció, abban az esetben, agglutinációs egy ismert pozitív kontroll és a hiánya agglutinációs latex nélkül IgG immunizált nyúl, jelzi a specifikus antigének jelenlétére az N. meningitidis CSF és rámutat arra a etiológiai szerepét a fejlesztés a meningitis. A reakciót nem értelmezzük abban az esetben, ha az agglutinációt latexel végezzük negatív kontrollhoz. Ebben az esetben meg kell ismételnie a tesztet a CSF egy másik részével.
· Jegyezzék fel a mikroszkópos vizsgálat és a latex agglutináció eredményeit a jegyzőkönyvben és vonják le a következtetést; töltse ki az üres irányt és a válaszformát a tartályból. laboratórium.
II. Végezzen bakteriológiai vizsgálatot a nasopharyngealis kibocsátásról meningococcalis transzport létrehozására.
1 szakasz. A nasopharynxben a meningokócok kimutathatók nemcsak a betegeknél, hanem a hordozóknál is. A vizsgált anyagot üres gyomorra vagy 3-4 órával étkezés után kell bevenni az antimikrobiális kemoterápia megkezdése előtt. Ehhez használjon speciális nazofaringealus tampont, amely 45 fokos szögben ¾ hosszúságban hajlik. A tampont a lágy szájpadra vezetjük, és 2-3 alkalommal a nasopharynx hátsó falán végezzük, anélkül, hogy megérintjük a nyelv, a fogak és az arcuk nyálkahártyáját. A vizsgálandó anyagot azonnal el kell vetni, vagy a laboratóriumba kell vinni, legkésőbb 2 órán keresztül, a kipufogócsövet egy kémcsőbe helyezve úgy, hogy ne érintse meg a falakat. A vizsgálati anyagot és a terményeket hűtéstől és szárítástól védeni kell, mivel a meningococcus nagyon érzékeny e tényezőkre. Ezért a szállításhoz használjon speciális táskát fűtőtestekkel.
A "bar-with-pad" módszerrel történő inokulációt vérrel, szérummal vagy ascitikus folyadékot tartalmazó tápanyag agar lemezeken végezzük. Ezzel párhuzamosan ezt a táptalajt a ristomicin adagolásával együtt alkalmazzuk, ami késlelteti a szétválasztandó nasopharynxben lévő Gram-pozitív kókuszok sokszorozódását. A növényeket 37 ° C-on inkubáljuk, és a szén-dioxid koncentrációját (5-10%) 24-48 óra hosszat inkubáljuk.
2. stádium. Értékelje a vetés nyálkahártyájának eredményeit a hátsó garatfalról a szérum agarra ristomicinnel.
A meningococcusok olyan kicsi, kerek, átlátszó kolóniákat alkotnak, amelyek kékes színűek a továbbított fényben. A jellegzetes izolált telepeket átvittük a szérum agarra, hogy tiszta tenyészetet kapjunk és 18-24 órán át 37 ° C-on inkubáljuk.
3. lépés. Készítsük elő a hatóanyagot az alanyból izolált agar tenyészetből, szín szerint Gram, mikroszkópia segítségével.
A kultúrát három teszt azonosítja, amelyek lehetővé teszik, hogy a Neisseria nemzetséghez tartozzanak. Ez egy jellegzetes morfológia (polimorf diplo- és tetracocci), gram-negatív színezék és pozitív oxidáz reakció. Az oxidáz meghatározásához a vizsgált kultúrát speciális lemezekre alkalmazzuk. Ha egy pirospiros folt azonnal megtörténik, akkor a tenyészet oxidáz-pozitív. A nem patogén Neisseria azonosítására és differenciálódására, amely a felső légutakban állandóan él, egy tulajdonság komplexet használ (1. táblázat).
A Neisseria nemzetség egyes fajainak differenciált tulajdonságai
Jelmagyarázat: "+" - a törzsek 90% -a vagy több pozitív;
"-" - a törzsek legalább 90% -a negatív;
d - A törzsek 11-89% -a pozitív.
A meningokóci antibiotikum meghatározását diszkó-diffúziós módszerrel (DDM) végezzük.
4etap.Uchtite és aránya indító tenyészetével, hogy tanulmányozza a szokásos tápanyag agar 2 csövek a szérum agar (37 ° C, 22 ° C), „tarka sorozat”.
Az azonosított meningococcus tenyészetek egy szerocsoportot határoztak meg az RA-ban típus-specifikus szérummal (A, B, C, D, 29E, 135W, X, Y, Z).
A jegyzőkönyvben szereplő eredmények alapján meghatározhatja a kultúra tulajdonát képező fajokat, az antibiotikumokra való érzékenységét és a következtetést; töltse ki az üres irányt és a válaszformát a tartályból. laboratórium.
III. Mikroszkópos vizsgálatot végzünk egy Gram-festett gyógyszerrel a betegség gonorrhea gyanúja esetén. Határozzuk meg.
Amennyiben pozitív eredményt a készítményben mutatnak gonococcusok - Gram-negatív diplococcusok bab alakú belsejében leukociták. Ezt a mikroszkópos képet akut gonorrhoeában figyeljük meg antibiotikumok alkalmazása előtt. Krónikus gonorrhea mikroszkópos vizsgálat negatív, mivel gonococcusok atipikus formában, változó színű, és Gram előállítására mutatnak különböző idegen mikroflóra.
IV. Figyelembe kell venni és értékelni kell az RSK eredményeit a beteg szérumával, akinek feltételezett krónikus gonorrhoea van. Szerezd meg az eredményeket a jegyzőkönyvben, és tegyél véleményt (lásd 11. szekció).
V. Olvassa le és írja le a protokoll tartályban. szerek: kémiai meningococcus vakcina + C meningococcus agglutinációs diagnosztikai szérum meningococcus latexagglutinációt, gonococcusos vakcina gonoallergen, jelezve, hogy azok tartalmaznak, hogy mit és hogyan kell alkalmazni.
Kérdések az önkontrollhoz:
1. Meningococcus nasopharyngitis és kocsi diagnosztizálása érdekében a hátsó falról leválasztható nasopharynx gyűjtésére és szállítására vonatkozó szabályok.
2. Mutassa be a meningococcus fertőzések mikroszkópos diagnosztikai módszerének használatát.
3. Indokolja a meningococcus fertőzés patogenezisének ismeretét a mikrobiológiai diagnózis anyagának tájékozott választása érdekében.
4. Indokoljuk mikrobiológiai kiválasztási módszerek diagnosztikai meningococcus nasopharyngitis, meningococcaemia és a járvány agyhártyagyulladás.
5. Mi a célja az izolált kórokozó szerotipizálása meningococcus és gonokokkusz fertőzésekben?
6. Nevezze meg a meningococcus és a gonokokkusz fertőzések mikrobiológiai diagnózisának módszerét, amely lehetővé teszi az etotróp terápiás gyógyszerek kiválasztását.
7. Melyek a meningococcus fertőzések expressz diagnosztikájának módszerei? Mi a lényegük?
8. Mi a patogenikus Neisseria megkülönböztető tulajdonsága a nem patogénektől?
9. Milyen típusú vakcinát alkalmaznak a meningococcus fertőzések megelőzésére, a használatuk taktikájára?
10. Ismertesse az akut és krónikus gonorrhoea mikrobiológiai diagnózisának jellemzőit, igazolja a módszerek kiválasztását.
11. Gonovaccin hozzárendelése.
12. A provokációk (biológiai, élettani, táplálkozási stb.) Kinevezése gonokokkusz fertőzésekkel.
Mikrobiológiai előadások.