A keményítő savas hidrolízise
A Lugol oldat keményítője kék foltot ad (jóddal való reakció). Amikor a keményítőt sósav jelenlétében forraljuk, ennek következményes hidrolízise megy végbe, amit jóddal való reakcióval lehet megjegyezni.
Készítsen állványt több csővel (5-8 darab). Az első kémcsőben adjunk hozzá 2-3 ml keményítőoldatot, adjunk hozzá 1 csepp Lugol oldatot, kék szín jelenik meg.
A lombikban öntsünk 20 ml keményítőoldatot, adjunk hozzá 16-18 csepp koncentrált sósavat és elektromos tűzhelyre (alkohollámpa) melegítsük. A rajt után óvatosan forraljuk, megállás nélkül a forráspont keveréket percenként, kivenni a lombikot pipettázunk 1 ml oldatot és a kopás egymás után a csöveket vízzel hozzáadásával 1 csepp Lugol-oldat. Figyelembe kell venni a tesztcsövekben lévő oldatok színváltozását. Az ibolyaszínű festés amilodextrinek, vörösbarna eritrodextrinek, sárga-aro-dextrinek és maltóz jelenlétét jelzi. Ha sárga színű a kémcsőben, hagyja abba a forralást. Az utolsó kémcsőben lévő oldattal Trommer reakciót végezzen. A kapott eredmények alapján megállapítást nyer.
A cellulóz savas hidrolízise.
A rost egy poliszacharid, de ellentétben a keményítővel, ahol a jód kék festés nem, a szerkezetének köszönhető.
A kérődzők és a monogasztrikus állatok emésztőrendszerében a rostot a bendő mikroorganizmusai és az intesztinális folyamatok puffolása során illékony zsírsavakra osztják fel.
Egy kémcsőbe adjunk hozzá egy darab gyapotot és 3: 1 arányú kénsavoldatot. A gyapot feloldása után (15-20 perc elteltével) a keveréket lombikba helyezzük, és felforraljuk. Rendszeresen (5 perces időközönként), hogy megszerezzék a mintát 1-2 ml-es csőben, semlegesítse azt 40% -os NaOH-oldatot, hogy lúgos reakciót kifejezve (kontroll által lakmuszpapír) és hozzáadunk 1-2 CuSO 4 csepp (1% -os oldat) melegítjük. A sárgásvörös vagy narancsvörös színű megjelenés jelzi a hidrolízis megszüntetését. A kapott eredmények alapján megállapítást nyer.
- Az enzimatikus reakciók jellemzői.
- Az enzimek hatásmechanizmusa.
- Alkalmazás az enzimkészítmények gyakorlatában.
A laboratóriumi munka száma 2.
"Kvalitatív reakciók a dehidrogenázokra"
1.1 Célkitűzés: a tej és az izomdehidrogenázok hatásának tanulmányozása.
1.2 Reagensek: tej vagy kefir, izomtörmelék (0,5 g izom, 3-4 ml sóoldat habarcsba dörzsölve); 0,4% formaldehid oldat, metilénkék, borostyánkősav (3% nátrium-hidroxid oldattal semlegesítve könnyű lúgos reakcióra a lakmuszon).
2.3 Berendezések - tripod tesztcsövekkel, vízfürdővel, hőmérőkkel, elektromos főzőlapokkal vagy szeszes italokkal.
1. kísérlet - a tej aldehid-oxidáz (xantin-oxidáz) hatása.
A tejben olyan enzim található, amely felgyorsítja a különböző aldehidek (formaldehid, acetaldehid stb.) Dehidrogénezését. Ha a dehidrogénezési reakciót gáz halmazállapotú oxigén jelenlétében végezzük, akkor a hidrogént oxigénre visszük át, hogy hidrogén-peroxidot képezzünk. Metilén kék jelenlétében akceptorként szolgál, amelyen az aldehid oxidáz hidrogént szállít az oxidált hordozótól.
Öntsünk két csövet 4-5 ml tej vagy kefir, tartalmát egy cső forralni, és hűvös. Adjunk hozzá 8-10 csepp formaldehid oldatot minden csőhöz és 1-2 csepp metilénkék, keverjük össze és helyezzük vízfürdőbe 37-40 ° C-on. Egy idő után egy metilén kék elszíneződik egy kémcsőben, és a másikban nem történik elszíneződés (főtt).
Jegyezd fel a kísérlet eredményeit és a következtetéseket a 2. táblázatban.
2. tapasztalat - a szukcinát-dehidrogenáz izom működésének megfigyelése.
A szukcinát-dehidrogenáz oxidálja a borostyánkősavat (szukcinát) fumársavnak (fumarát). Metilénkék jelenlétében az utóbbit színtelen leukóvegyületre redukáljuk.
Két tesztcsőben adjunk hozzá 3-4 ml-t. és egyben 6-8 csepp semlegesített borostyánkősavoldatot adjon hozzá. Ezután adjunk hozzá két csepp metilén-kék oldatot mindkét kémcsőhöz, rázzuk fel őket és 37-40 ° C-os hőmérsékletű fürdőbe tesszük. Egy idő után a metánkék színének elszíneződése a borostyánkősav-mérőcsőben, a második tesztcsőben a szín marad. Írjon meg egy tapasztalatcsomagot, magyarázza meg eredményeit és vonjon le következtetéseket. Az adatokat a 2. táblázatban kell megadni.
2. táblázat A dehidrogenázok hatásának eredménye.