Új módszerek a csirkékhez társuló fertőzések diagnosztizálásában
S. Fedotov, M. Chernykh, E. Kapitonov, Altai Állami Egyetem
Az utóbbi években a feltételesen patogén mikroorganizmusok egyesületei által okozott fertőzések arányának növekedése nőtt. Jellemzőjük a kifejezett klinikai polimorfizmus társított egyidejű hatása több szerek, amely bonyolítja a értelmezése a laboratóriumi eredmények, mivel minden egyes komponense a kevert tenyészetek számos funkciók, amelyek kombinációjának meghatározása patogén potenciális kórokozók általában.
A madár jó egészségi állapotához tiszta víz szükséges. A víztisztításhoz lemezszűrőket kell használni. Az ilyen típusú vízkezelés fő előnye a szűrés legmagasabb minősége a tisztítási arányok széles körében, lemez- és hálószűrő elemekkel
Megállapítást nyert, hogy ezek a betegségek megakadályozzák a fertőző folyamatot okozó fő etiológiai ágens kimutatását, és megnehezítik az etiotróp anti-fertőző terápia végrehajtását. Továbbá maguknak a mikrobiális szövetségeknek a struktúráját még nem teljesen megfejtették, egyes konstitutív mikroorganizmusok szerepe közvetlen vagy közvetett befolyással a madár organizmusra nem mutattak ki eléggé.
Ugyanakkor a mikroorganizmusok egyesületeinek kialakulásának és a kórokozó tulajdonságaik megnyilvánulásának egyik mechanizmusaként a bakteriális kölcsönhatásokat nem vizsgálták kellőképpen a diagnosztikai módszerek tökéletlenségével kapcsolatban.
Elemezve a biokémiai változások a vérben a klinikailag beteg madarak, az adatok post mortem boncolás és az eredményeket a morfológiai vizsgálatok, akkor feltételezhetjük, hogy a természet a patológiás változások tüsző szerkezet arra utal, citotoxikus hatást a fertőző ágens. Egyre nagyobb follikuláris limfocita infiltráció és tekalnoy kagyló számának növelésével a vér sejtek és szövetek basophilek.
A follikulitis patológiás és anatómiai tüneteivel járó csirkékben a petefészket staphylococcusokkal, E. coli-val, streptococcusokkal és proteusszal fertőzötték megfigyelés alatt. Az ilyen madarak maximális számát az aktív tojásrakás idején állapítják meg. A mikroflóra túlnyomórészt társulások formájában volt, míg a magas fokú virulenciájú organizmusok, mint a Staphylococcus aureus és az Escherichia hemolitikus törzsek, kiemelkedőbbek voltak.
Így a 150-250 napos csirkék petefészek-follikulusai közül a staphylococcusok gyakrabban észlelhetők, mint más mikroorganizmusok - 56 esetben (63,64%). Beleértve az E. coli-val - 14-ben (15,92%); E. coli és streptococcus - 8 (9,09%); streptococcus - 1-ben (1,14%); egy proteumból - 7 (7,95%); proteomával és E. coli-val - 4 (4,55%) és 22 (25,0%) - monokultúrák formájában.
A magas vetésfokozat az E. coli-t (az esetek 42,05% -át) jellemezte, különösen staphylococcusokkal (az esetek 15,92% -ában). Az Escherichia coli és streptococcus szövetségéből származó tenyészetet tartalmazó madarak száma 3 (3,41%) volt. 2 esetben (2,27%) egy prosztata, 8 (9,09%) staphylococcus és streptococcus esetén 10 (11,36%) monokultúrában.
A legtöbb esetben, Streptococcus és Proteus tartalmát follikulusok, mint a tiszta tenyészeteket izoláltuk kadaver anyag csak a felnőtt csirkék, és a Staphylococcus és E. coli vittük mind hullák és vágott baromfi.
A reproduktív szervek mikrobiológiai diagnózisát klinikailag egészséges csirkében, staphylococcusokban, enterococcusokban stb. Nem vetették le. A petefészek tüszők különböző méretű kör alakúak voltak. Tartalma sárga, a közepes sűrűség konzisztenciája.
petefészek betegségek baromfi Polimikrobiális, a vezető szerepet tartozik opportunista patogének, főleg társulásai fakultatív anaerob és anaerob mikroflóra. Adatainkat a Batra C.L. Singh V. Crewal C.S. SodhiS.S. (1982).
Mikrobiológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a baromfitenyésztésben a következő fajok Staphylococcus törzseinek terjedését lehet felismerni: St. aureus (72,7%), St. saprophyticus (13,6%) és St.epidermidis (13,6%). A további tipizálásban a St. aureus különböző biológiai változatokat mutatott ki. Így biovars hominis, gallinae és A / B izolálták a csirkékből a petefészek folliculitis klinikájával. Ezenkívül a Pavlovsky baromfitenyésztő C / D biovarot vetett, és a Molodezhnaya-on. Mindazonáltal pozitív korreláció volt a staphylococcusok biológiai változatai között. aureus, izolálva mind a baromfi gazdaságokban (r = 0,79).
78 enteropatogén tenyészet szerológiai tipizálásának eredményeként 87% -uk serovarokként lett osztályozva: 01, 02, 078, 09, 055, OIII és OI4I. Ezzel egyidejűleg a 02-es szerotípusok 65,5% -át, a 078-I 3,3-at, a 01 -11,6% -ot, a 09-et, az OIII-t, az OI4I-t - az E. coli egy kultúrájával, 055-tel - 2 kultúrával osztályoztuk. Így a legelterjedtebb és virulens laboratóriumi állatok az Escherichia serovars 01, 02, 078 kultúrái voltak.
Streptococcusok három csoportját azonosították a vizsgálat során: b-hemolitikus (Str. Hemolyticus), ami vörösvérsejtek hemolízisét okozta; a-zöld (STR. viridans), ami a hemometamorfózis zöld zónáját képezi a kolóniák körül; nemhemolítikus y-streptococcusok (Str. anhemolyticus), amelyek nem változtatnak eritrocitákon és nem okoznak vér agar hemolízisét. A csirkebetegség dinamikájában izolált 32 streptokokta kultúrából 14 egér patkány volt a fehér egerek esetében, ami 39,64%.
Az érintett tüszőkből izolált Protea nemzetségből származó baktériumok morfológiai és kulturális-biokémiai tulajdonságainak tanulmányozása. Proteus bomló glükóz (K + H +) és a szacharóz, tulajdonított formájában mirabilnogo (Proteus mirabilis), és bomló glükóz (K + H +), szacharóz és maltóz - vulgáris (Proteus vulgaris). A mikrobák ennek a csoportnak volt jellemző nagyfokú patogenitási 14 (57,33%), a 27 kultúrák megjelent patogén fehér egerek.
Összefoglalva a mikrobiológiai vizsgálatok eredményeit, megjegyezzük, hogy az érintett petefészkből izolált staphylococcusok, melyeket St. aureus, St. saprophyticus és St. Epidermidis és E. coli szerotípusok 01, 02, 078 szerovarral. A Streptococci és a Protei vulgaris kevésbé volt megfigyelhető.
Az eredményeket a Dán Madártani Intézet (Bisgaard M. Dam A. 1981) tanulmányai is megerősítik. Azonosítottak egy vegyes mikroflóra a hatással csirke nemiszervek 16 esetben (11%), míg a nem-specifikus növekedési - Talált 3. Körülbelül 19 különböző csoportok az Escherichia coli, a leggyakrabban előforduló szerotípus 02.
Az embriók mikrobiológiai vizsgálatánál (1 minta - 5 embrió 21 napos korban) 1 hét E. coli mintát detektáltunk; 1 3 - St. aureus és E. coli; 6 - St. aureus; 6 - St. aureus, Citrobacter frendi és E. coli; 9 - Citrobacter frendi és E. coli.
Szokásosan alkalmazott módszerek a taxonómiai azonosítását patogén mikroorganizmusok baromfi altaji szélén alapján a használata különböző kemotaxonómiai tesztek, mint például a specifikus enzimatikus aktivitása, a lebontási képessége cukrok vagy fenntartani a növekedés az adalékanyagok a szelektív tápközegre.
Az ilyen vizsgálatok körülményeinek egységesítésének nehézsége, valamint a számos mikroorganizmusban rejlő természetes fenotípusos változékonyság téves azonosítást eredményezhet.
A bakteriológusok nagymértékben függnek a morfológiai és biokémiai kritériumoktól a kóros anyagtól és a környezeti objektumokkal szemben izolált mikroorganizmusok meghatározásánál.
Bizonyos esetekben a patogén mikroorganizmusok azonosítása és osztályozása nem felel meg az állatgyógyászati gyakorlat követelményeinek. Ennek oka számos körülmény; alapvető: a fenotípusos tünetek nem kielégítő kifejeződése, különösen a baktériumok patogenitási tényezői a termesztés különböző körülményei között; a nem művelt baktériumok létezése; képességét több mint 20 féle kórokozó baktériumok bemegy a nyugalmi állapotban jellemzi jelentősen csökkentette a metabolikus aktivitás és ideiglenes elvesztése képes reprodukálni; genetikai úton elvégzésére állandó változás antigén determinánsok a fogadó szervezet, amely egyrészt segíti a kórokozó túlélni macroorganism, induló hatása az immunválasz a gazda, és a másik - vezet a hiba diagnosztikai laboratóriumban seroimmunologicheskih módszerekkel.
El kell ismerni, hogy a laboratóriumi gyakorlatban természetes korlátozások vannak a fenotípusos módszerek alkalmazása során a kapcsolódó fertőzések kórokozóinak ellenálló képességének értékelésére.
Az antibiotikumokkal szembeni érzékenységet meghatározó diszodifizáló módszer az Altai Terület állat-egészségügyi laboratóriumainak domináns gyakorlata.
Fő előnye az egyszerűség a teljesítményben és a gazdasági elérhetőségben. Mostanáig a legtöbb laboratórium számára továbbra is előnyös.
Azonban, annak hátrányai nyilvánvalóak: a módszert a meghatározáshoz használt antibiotikum érzékenysége korlátozott számú mikroorganizmusok; hogy nem alkalmas, ha a mikroba nem képez a felületen agar tápközegben vagy a homogén sűrűségű bizonyos pázsit vagy gyep után kialakult 24-órás inkubálás a baktériumok és gombák - 48 óra után.
A módszer megvalósításához a tápközegek szűk tartománya gyakran megfelelő, gyakran nem tervezik az igényes mikroorganizmusok növekedését. A mikrobiális növekedés gátlási zónája nem mindig felel meg az antimikrobiális ágenseknek való valódi érzékenységének stb.
Ezenkívül a kemotaxonómiás vizsgálatok eredményei torzulhatnak az antimikrobiális szerek aktivitásának csökkenése miatt a mikroorganizmusok hosszú távú tenyésztése során, ezért nem indokolják az érzékenységüket.
A bemutatott példákból nyilvánvaló, hogy a baromfitermékek modern bakteriológiai laboratóriumainak arzenáljába olyan módszerekre van szükség, amelyek lehetővé teszik a kórokozó mikroorganizmusok azonosítását, osztályozását és differenciálását formától vagy állapotuktól függetlenül.
A társult fertőzések kórokozóira jellemző fajok meghatározására szolgáló hagyományos módszerek mellett figyelmet kell fordítani a genomiális jellemzőikre is. Ez különösen fontos azoknál a mikroorganizmusoknál, amelyek adaptációs változásokon mennek keresztül a kedvezőtlen környezeti tényezők hatására, antibakteriális terápiával, beteg baromfival és baromfitermékekkel érintkezve.
A mikroorganizmusok jelzésének módszereinek kombinálniuk kell a sebességet, a specificitást, a multiplex funkcióját, meg kell felelniük a laboratóriumi munka jelenlegi fejlettségi szintjének.
Ezek közé tartozik jelenleg az PCR és szekvenálása az érzékenység és a specificitás, amely meghaladja az összes meglévő eddig kemotaxonómiai módszerekkel, mivel gének azonosítására (nukleinsavak) patogének, nem antigének és antitestek.
A PCT diagnosztika azonosítani a fertőzés forrása kandalló, izolálása és vizsgálata a fertőző betegségek (összefüggő fertőzések) során egyaránt járványos és mezhepizootichesky időszak lehetővé teszi, hogy figyelemmel kíséri a változás a genetikai mikroorganizmusok struktúrák megjósolni az új változatok és hozzon létre megfelelő védelmet és diagnosztikai eszközök gyógyszerek. Ezen túlmenően lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a jelen szer során az úgynevezett „szerológiai ablak”, vagyis az intervallum között a pillanat a fertőzés és a test megjelenésének antitestek elegendő mennyiségekben kimutatására.
A PCR módszer számos előnnyel rendelkezik a kemotaxonómiai módszerekkel szemben. A mai napig a sikeres alkalmazáshoz szükséges anyagi alap eléggé fejlett. Minden összetevője (műszerek, DNS extrakciós készletek, enzimek stb.) Széles körben forgalmazott és elérhető áron. Végrehajtása lehetővé teszi a társuló fertőzések által okozott betegségek hatékonyabb kezelését és megelőzését.