Szerológiai reakciók használt diagnosztizálásában-tic vírusos fertőzések
A szérumban a fájdalom-Nogo elleni antitestek rev-a diagnózis felállításához a betegség. Szerológia is használják, hogy azonosítsa a mikro-CWA antigének különböző bioaktív ve társadalmak, csoportok a vér, szövetek és a tumor antigéneket, immunkomplex-receptorok-sejt-árok és mtsai.
Amikor kiválasztunk egy mikroba páciensből származó pro vezető kórokozó azonosítás tanulmányozásával annak antigén tulajdonságokkal immunszérumot alkalmazva diagnosztikai, t. E. hiperimmunizált állati szérumok tartalmazó specifikus en Cím. Ez az úgynevezett szerológiai azonosítás mikroorganizmusok.
In Microbiology and Immunology széles körben használják agglutinációs reakció Preetz-pitatsii, semlegesítési reakciókat magában foglaló komplement-em, jelzett ellenanyagok alkalmazásával, és antigének (radioimmunologiches Cue, enzim-immunassay, immunfluoreszcens technikákkal). Ezek a reakciók kitűnnek kimutatható hatása, és formulálási szakmában, azonban minden Ba-Vanir hogy reakcióba az antigént, az antitest és kimutatására használt mind antigének és antitestek. Immunreakciók, amelyek jellemzik a nagy chuvstvitelnos Tew és specificitás.
Jellemzők antitest kölcsönhatás en-Tigeneh reakciók alapján diagnosztikai laboratóriumok. Reakció az in vitro do antigén és az antitest tartalmaz SPE-lag és a nem specifikus fázis. A spec-lag fázis gyors-spec cal kötő antitest aktív centrum egy antigéndetermináns. Ezután jön a nemspecifikus fázisban - lassabb, CO-Thoraya nyilvánul látható fizikai jelenségek, mint például a kialakulását pehely (agglutináció jelenség), vagy a csapadékot formájában egy felhő. Ez a fázis bizonyos feltételei (elektrolitok Opti-MAL pH).
Kötődése antigén determinánsok (epitópok) az aktív központ Fab-fragmensek anti-testek miatt van der Waals erők, hidrogénkötések és hidrofób inter-akció. A szilárdság és a szám svyazavshe Gosia antigén-antitest függő affin-Ness, aviditással antitestek és vegyérték.
Ahhoz, hogy egy kérdés a gyors diagnózis:
1. Diagnosztikai támadható a kultúrához a tiszta formában izolált.
2. Speciálisan felszerelt laboratóriumok (engedéllyel kell rendelkeznie)
3. betartása szigorú szabályok, mint például: egy elszigetelt szobában, a szükséges speciális védőöltözet, kötelező teljes higiénikus helyiségek munka után az ügynök, fertőtlenítés kutatók munka után.
Módszerek eksperss diagnózist.
1.Bakteriologiya - kombinált politrop táptalajok gyors vizsgálat morph tinktor, Biochem. tulajdonságait. Használata enzimoindikatornoy szalag elektrofizikai módszerrel, impregnáltunk különböző in-te (glyukazo, laktóz, stb)
2.Fagodiagnostika.
3.Serodiagnostika - módszer Mancini raektsiya kicsapás a gélben Ascoli, PA, PHA.
4. Mikroszkóp - közvetlen és folyamatos RIF.
a gyors diagnosztikai módszerek, ha:
Kolera - m.Z.Ermolevoy, p-CIÓ immobilizáció kolera diagnosztikai szérum RIF.
Tularemia - RA az üveg, PHA
Pestis - fágtipizálás eljárás szénhidrát papír korongokat, PHA.
Sib.yazva - Ascoli módszer, RIF, PHA.
A természet növekedés. ezek három diffúz (Fakultatív anaerobok), tengerfenéken élő (obligát anaerobok) és a felület (obligát aerob.)
Izolálása tiszta tenyészetét anaerob baktériumok
A laboratóriumi gyakorlatban sokszor dolgozni anaerob mikroorganizmusok. Ők inkább szeszélyes a táptalaj mint aerobic, gyakran speciális növekedési kiegészítők, leállítása is szükséges oxigént a saját termesztés, időtartamának növelése hosszuk. Mert velük dolgozni bonyolultabb van szükség, mert jelentős figyelmet bakteriológus és laboratóriumi technikusok.
Védelme fontos anyag, amely tartalmaz anaerob kórokozók toxikus hatástól légköri oxigén. Mivel anyagot a zsebébe gennyes fertőzés ajánlott take során szúrt egy fecskendő segítségével, az idő közötti befogó anyag és a vetési azt a táptalajt kell a lehető legrövidebb.
Ami a tenyésztést anaerob baktériumok speciális táptalajok, amelyek nem tartalmaznak oxigént, és egy alacsony oxidációs redukciós potenciálja (-20 -150 mV), hogy a beadott készítmény indikátorok - resazurin, metilénkék és hasonlók, amelyek reagálnak a változás e potenciál. Amikor újra növekedést, színtelen formában mutatók színe megváltozik: resazurin festékek szerdán rózsaszín, és a metilénkék - kék. Az ilyen változások bizonyítják a képtelenség, hogy használni a médiát a termesztésére anaerob baktériumok.
Csökkenti Redox bevezetése közegben nem kevesebb, mint 0,05% agar, amely, növelve annak viszkozitását csökkenti az oxigénellátás. Ez viszont, akkor is biztosítani tudjuk a friss (nem később, mint két óra a gyártás után), és redukálható táptalajok.
Meg kell jegyezni, hogy az adott típusú fermentációs anyagcseréje anaerob baktériumok, szükség több gazdag tápanyagok és vitaminok médiában. A legtöbb általánosan használt kardio agyban és a májban kivonatok, szója és élesztőkivonatok, gidrolitichny emésztett kazein, pepton, tripton. Ez kötelező hozzáadása növekedési faktorok, mint például a Tween-80, hemin, menadion, vagy hemolizált teljes vér.
Izolálása tiszta mikroorganizmus-kultúrák aerobnih több szintből áll.
Az első napon (fázis 1 tanulmány volt) egy steril tartályban (injekciós üveg, lombik, egy palack) figyelembe kórbonctani anyag. Tanulmányában a megjelenés, állag, szín, szag és egyéb tünetek, kenetet készítünk, festett és mikroszkóp alatt vizsgáltuk. Bizonyos esetekben (akut gonorrhoea, pestis) ezen a ponton, akkor tegye a korábbi diagnózist, és emellett, hogy vegye fel a környezetet, amelyben az anyag lesz kiemelt. Beletelt hajtjuk bakteriológiai hurok (gyakrabban) egy olyan eljárás, Drigalski spatula, gyapot-géz tampon. A csészék zárt, fejjel lefelé, jelentkezzen speciális ceruzát és helyezzük termosztát optimális hőmérsékleten (37 ° C) 18-48 év. A cél a fázis - a izolált telepeket kapjunk a mikroorganizmusok.
Néha azonban a célja halom anyaga oltjuk folyékony tápközegben.
Gyanús telepeket készített festett keneteken Gram számára, hogy tanulmányozza morfológiai és színező tulajdonságai kórokozók, baktériumok feltárása mozog a „lógó” vagy „zúzott” csepp. Ezek a jellemzők különösen nagy diagnosztikus értékű jellemzésében bizonyos típusú mikroorganizmusok.
A maradványai a telepek gondosan tanulmányozták, hogy ne érjen a többiek, felületéről eltávolítjuk a tápközegben, és szélesztettük ferde agáron, vagy Petri-csészében tápközeggel ágazatokban, így a tiszta tenyészet. A csövek vagy csészék, termények inkubátorba helyeztük egy optimális hőmérsékletén 18-24 órán keresztül.
Folyékony táptalajon is képes növekedni baktériumok különböző módon, bár a növekedési jellemzőit mutatja szegényebb, mint sűrű.
Baktérium okozhat diffúz elhomályosítja közepes színnel így nem lehet megváltoztatni vagy szerez színű pigment. Ez a növekedés szerkezetében a legtöbbször a legtöbb fakultatív anaerob mikroorganizmusok.
Néha a kialakulását üledék az a cső alján. Ez lehet kroshkoobraznym homogén, nyálkás és mások. A fent maradhat tiszta vagy zavarossá válik. Ha a pigment mikrobák nem képez csapadékot siruvato-bily vagy sárgás színű. Hasonlóképpen rangsoroljuk nőnek, általában anaerob baktériumok.
Parietális növekedési nyilvánul pehely, szemcse kapcsolhatók a belső falak a cső. Szerda így átlátható marad.
Aerobnye baktériumok hajlamosak felszíni növekedési. Gyakran képződnek szelíd színtelen vagy kékes film, mint egy alig észrevehető plakk olyan felületre, amely eltűnik, ha rázza le, vagy rázza a közegben. A film lehet a nedvesség, zsír, van egy csomó, a nyálkahártya következetesség és be kell tartaniuk a hurok kiterjed rá. Azonban, a közös és sűrű, száraz, törékeny film, amelynek színe függ a pigment, amely mikroorganizmusok által termelt.
Ha szükséges, kenet készül, festett, mikroszkóp alatt megvizsgáltuk, és a mikroorganizmusok oltunk a hurok felületen sűrű tápközegben, hogy izolált telepeket kapjunk.
A harmadik napon (Phase 3 tanulmányok) tanulmányozza a természet egy tiszta tenyészete mikrobiális növekedés és az azonosító végzik.
Először is, figyeljen a jellemzői a mikroorganizmusok szaporodását a környezet, és a stroke, a festési technikát Gram annak érdekében, hogy ellenőrizze a tisztaságát kultúra. Ha a baktériumokat a mikroszkóp alatt figyelje az azonos típusú morfológiája, mérete és színező (a képességét, hogy festett) tulajdonságok, arra a következtetésre jutott, hogy a tenyészet tiszta. Egyes esetekben még a megjelenés és a funkciók azok növekedését lehet következtetni, szem előtt megalázottság. Típusának meghatározása baktériumok miatt morfológiai úgynevezett morfológiai azonosítása. Határozza meg, hogy milyen típusú kórokozó miatt kulturális funkciókat kultúrának nevezett azonosítása.
Ezek a vizsgálatok azonban nem elég ahhoz, hogy a végső következtetést, hogy milyen típusú a kiválasztott mikrobák. Mivel biokémiai tulajdonságainak a vizsgálatára a baktériumok. Ezek igen változatos.
Leggyakrabban tesztelt szacharolitikus, proteolitikus, peptoliticheskie, hemolitikus tulajdonságok, formáció dekarboxilázok enzimek oxidáz, kataláz, plazmokoagulazy, DNS-áz, fibrinolizin, nitrátok redukciójának nitrit-, és hasonlók. Erre vannak speciális táptalaj, amely beoltott mikroorganizmusokkal (Hiss színes szám, MPB, hengerelt savó, tej, stb.)
Típusának meghatározásában kórokozó miatt biokémiai tulajdonságainak nevezett biokémiai azonosítása.
termesztési technikák
És izolálása tiszta baktérium kultúrák
A sikeres termesztés, amellett, hogy jól megválasztott média és a helyességét a növény is szükséges optimális feltételek: hőmérséklet, páratartalom, levegőztetés (levegőellátás). Tenyésztése anaerobok nehezebb, mint aerobok, hogy eltávolítsuk a levegőt a táptalaj különböző módszerek alkalmazásával.
Egyedi kiválasztása baktériumfajok (tiszta tenyészete) a vizsgálati anyag tartalmú, mint általában, egy keveréke a különböző mikroorganizmusok egyik bármelyike lépéseinek bakteriológiai vizsgálat. Mikrobovpoluchayut tiszta tenyészetét az izolált baktérium telepeket.
Elosztása során tiszta tenyészetét a vér (hemokultúra) annak előre „növesztettük” folyékony közegben: 10-15 ml vért vett aszeptikusán inokuláltunk 100-150 ml folyékony közegben. Érték bevetett vér és táptalaj nem véletlenül 01:10 - így elért vér hígítása (hígítatlan vért káros hatással mikroorganizmusok).
Szakaszai izolálását baktérium tiszta tenyészetét
I. szakasz (natív anyag)
Mikroszkóp (hozzávetőleges elképzelést a mikroflóra).
Vetés szilárd táptalajon (megszerzése kolónia).
Stage II (izolált telepek)
Study telepek (baktériumkultúra tulajdonságok).
Mikroszkopikus vizsgálat mikrobák a megfestett kenetet
(Morfológiai tulajdonságok baktériumok).
Vetés ferde agar izolálása a tiszta tenyészet.
Stage III (tiszta tenyészet)
Meghatározása a kultúra, a morfológiai, biokémiai
és egyéb tulajdonságait, hogy azonosítsa a baktérium tenyészet
A baktériumok azonosítása
Azonosítása izolált baktériumtenyészetek végeztük tanulmányozásával morfológiája baktériumok, a kultúra, biokémiai és egyéb funkciók rejlő egyes típusú.