Tápkörnyezet
Tápanyag közegosztályozás
Összeállításakor a táptalaj a mikroorganizmusok számára szükséges figyelembe venni, hogy szükségük van az elemeket. A készítmény táptalajok két csoportra oszthatók: a természetes (természetes) és szintetikus. Gyakran úgynevezett természetes környezetben, amely olyan termékeket, állati vagy növényi eredetű, komplex határozatlan kémiai összetétele. Alapján az ilyen média különböző részein a zöld növények, állati szövetek, maláta, élesztő, zöldségek, trágya, talaj, víz a tengerek, tavak és ásványi források. Legtöbbjük használt kivonat formájában vagy infúzió. A természetes környezetben jól fejlett, számos mikroorganizmus, mivel ilyen környezetben általában szükséges valamennyi összetevő a növekedés és fejlődés. Azonban közepes meghatározatlan összetételű kevés haszna tanulmányozására fiziológiai változás mikrobiális anyagokat, mivel azok nem teszik lehetővé, hogy vegye figyelembe a több fogyasztási közepes komponensek és másrészt, hogy melyik anyagok képződnek során a mikroorganizmusok növekedését. Ez annak a ténynek köszönhető, hogy az összetétele a természeti környezet nagyon bonyolult; Sőt, nem állandó, mivel jelentősen függ a nyersanyagok és az előállítására szolgáló eljárás média. Ez jelentősen befolyásolja a mikroorganizmusok növekedését. Természetes meghatározatlan közeget elsősorban fenntartani mikroorganizmus-kultúrák, felhalmozódása a biomassza és diagnosztikai célokra. Közül nem definiált közegek például az úgynevezett, félszintetikus közepes. Összetételükben együtt vegyületek ismert kémiai természete anyagokat tartalmazó meghatározatlan összetételű. Szintetikus környezet - ezekben a környezetekben, amelyek csak bizonyos kémiailag tiszta vegyületek veszik pontosan a jelzett koncentrációkban. Szintetikus környezetet kell elő desztillált vízben. A fejlesztés a szintetikus környezetben, amely biztosítja a normális növekedés a vizsgált szervezet, illetve a maximális bioszintézis bármely termék élettartama, akkor tudnia kell, hogy a jellemzői az anyagcsere, a szervezet és annak szükségességét áramforrások. A jelenleg rendelkezésre álló mikrobiológusok van elegendő mennyiségű szintetikus média, nem rosszabb minőségű komplex környezetét ismeretlen összetételű. Szintetikus környezetben viszonylag nagy az elemek, de lehet elég egyszerű az összetétele. Szintetikus környezet leginkább alkalmas metabolikus tanulmányok a mikroorganizmusok. Ismerve a pontos összetétele és száma a média tagjai alkatrészek, akkor megvizsgálja, hogy a fogyasztás és alakításával csere termékeket. SN Vinogradskii gyakorlat mikrobiológia bevezetett elektív (szelektív) táptalajon bizonyos csoportok a mikroorganizmusok. Ezek a média nyújt kedvezményes fejlesztési egyetlen faj vagy csoport a kapcsolódó mikroorganizmusok, és kevésbé alkalmasak, vagy nem alkalmas a fejlesztési mások. Ismerve a fiziológiai jellemzőket a megfelelő csoport a mikrobák, tudjuk választani a tenyésztési körülmények (a tápoldat összetétele, aktív savasság, levegőztetést biztosító körülmények között, a hőmérséklet, stb) alatt, amely a mikroorganizmusok fejleszteni csak ebben a csoportban. Ez lehetővé teszi a különböző biológiai folyamatok a laboratóriumi és a termelés előzetes sterilizálást a közeg. Ezek a táptalajok főleg a mikroorganizmusok izolálása a természetes élőhelyek, a dúsított tenyészetből. A koncepció a „szelekciós táptalaj” tágabb fogalom a „választható körülmények között.” Tápkörnyezet használt különböző konzisztenciájú: folyékony, szilárd, félig szilárd anyag formájában. Szilárd táptalajt rögzítéséhez használt baktériumok száma izolált őket tiszta kultúrában és egyéb célokra. Az ilyen közeg készül a folyékony hozzáadásával 1,5-2,5% agar-agar vagy zselatin 10-15%. A készítmény a félig folyékony közeg bevezetésre agar-agar mennyiségben 0,1-0,2%. Előzetes megbeszélés alapján a közeg van osztva választható és differenciáldiagnosztikája. Szabadon választható kedvezményes fejlesztési környezetek egy vagy fiziológiás egész csoport a mikroorganizmusok. Például, az elsőbbségi elosztása negatív baktériumok elegendő hozzáadni a tápközegben trifenil-metán színezék (kristályibolya, malachitzöld, és így tovább. D.). Izolálása stafilokkok közepes adhatunk nátrium-klorid koncentrációban 7,5%. Ebben a koncentrációban, a növekedés más baktériumok gátolt. Szabadon választható használt táptalaj az első szakaszban izolálását baktérium tiszta tenyészetét, azaz. E. előállítását szakaszos tenyészet. Differenciál-diagnosztikai média használt gyors azonosítására közeli rokon fajok a mikrobák, meghatározó faj, a klinikai bakteriológiai és mások. Az elv a differenciál-diagnosztikai média azon a tényen alapul, hogy a különböző típusú baktériumok különböznek biokémiai aktivitás, és különböző készlet enzimek lebontják szubsztrátok tartalmazza a tápközeg. A szerkezet a differenciál-diagnosztikai tápközeg a következőket tartalmazza: a) a fő tenyésztő tápközeg, amely a baktériumok szaporodását; b) egy specifikus kémiai szubsztrát, melynek aránya az diagnosztikus e mikroorganizmust; c) színét mutató, a színváltozás jelzi a biokémiai reakció, és a fenti enzim jelenlétében rendszer a teszt-mikroorganizmus. Például Endo agar megkülönböztetni klónok laktózfermentálási származó klónok, amelyek nem rendelkeznek ezzel a tulajdonsággal. A fő összetevői a közeg tápláló (pepton) agar, és a fő szénhidrát Fuxin, fehérített szulfit (Schiff-reagens). Az eredeti táptalajt színezett rózsaszín. Mikroorganizmusok nem laktózfermentálási igy színtelen telepeket képez. Amikor a fermentációs laktóz hogy acetaldehid utóbbi reagál szulfit és fejlődő vörös színe a mindenkori telepek. Közepes eozinnal és metilénkék (Levin közepes), mint mutatók tartalmaz eozin és a metilénkék, és kezdetben színes, fekete és kék. A sejteket végző fermentáció forma telepeket, festett fekete, fémes csillogású színek és a telepek nem rendelkezik ezzel a tulajdonsággal, színtelen. Hasonló színváltozás fordulhat elő, mert a festékek jelen vannak a környezetben nem olyan külön kapcsolat, hanem a komplexek formájában táptalaj anyagokkal. Alacsony pH, ezek a komplexek kicsapjuk, a kiindulási festékanyagok oldódnak ezek a feltételek, a magas pH színtelen festék komplexek, mivel metilénkéket vesz egy kék színű. Ez a környezet lehetővé teszi számunkra, hogy különbséget a baktériumok az Escherichia nemzetség baktériumai a nemzetség Proteus.
Összetétele táptalaj.
A tudás sokfélesége mikroorganizmusok köszönhetjük két esetben. Egyes mikroorganizmusok viszonylag hosszú ideig felkeltette annak a ténynek köszönhető, hogy alkotnak telepeket, vagy klaszterek, illetve okoz jelentős környezeti változásokat. Sok ilyen, könnyen kimutatható érzékeny mikroorganizmusok által közvetlen odaítélése; l utal LNO könnyű felvenni feltételeket, amelyek biztosítják növekedésüket. Vannak azonban sok más mikroorganizmusok (különböző fiziológiai típus), rendelkezésre bocsátott vizsgálati csak miután Vinogradsky Beyeripk fejlett technika és a dúsítást kultúrákban. És elvben és gyakorlatban a módszer nagyon egyszerű. Kiválasztásával a számos tényező (a energiaforrások a szén és nitrogén; elektron akceptor; fény, hőmérséklet, .. PH, stb), hogy hozzon létre bizonyos feltételek és beoltjuk egy kevert populációja az a közeg, amely, például a talajban vagy iszap. Ebben a környezetben, a legtöbb jól alkalmazkodott az ital fajtáját mikroorganizmusok növekszik és kiszorítja az összes többi kísérő szervezetekre. Többszöri passzálással a folyékony közegben az azonos összetételű, és szűrés ugyanazon a szilárd táptalajon könnyen azonosíthatók felhalmozott törzs. Gyakori reseeding a folyékony közeg egy folyadék megakadályozza a növekedés a rokon mikroorganizmusok, amely használja a hulladék termékek, vagy akár autolízissel primer tenyésztett sejtek és nőnek rajtuk keresztül. Kiváló anyag beoltás mintái azokon a helyeken, ahol már van egy „természetes gyarapodás”. Így, mikroorganizmusok alkalmazásával lehet izolálni a szén-monoxid, a szennyvíz-gáz növények; mikroorganizmusok segítségével a hemoglobin - szennyvízből vágóhidakról és baktériumok oxidálják szénhidrogének - olaj kőzetek, a talaj szennyezett olaj, és az olaj a olajteknő. A módszer a dúsítás kultúrák lehetővé teszi, hogy bármely kombinációját mikroorganizmusok táplálkozására, feltéve természetesen, hogy a kívánt típust nem létezik a természetben. Magasan specializált mikroorganizmusok különösen könnyű létrehozni választható feltételekkel. Így, az ásványi tápközeg, amely nem tartalmaz kötött nitrogén, a fény szigorúan szelektív a „kék-zöld alga, rögzítéséről N2. Ha ugyanazt a kiegészített közeget szerves energiaforrás és a szén, majd a sötétben, aerob körülmények között fog kifejleszteni Azotobacter, és a kizárás hozzáférés levegő -. Clostridium szeretné korlátozni csak a minimális követelményeket teljesítő, a mikroorganizmus, amelyek szeretnék kiosztani sikerült a dúsítási kultúrák Ha például szeretné elkülöníteni a baktériumok, amelyek képesek oxidálni metán vagy. odorod nitrát vagy szulfát, mint hidrogén-akceptor, meg kell vigyázni az oxigén kizárásával, vagy fog dominálni aerob formában, oxidáló metán vagy hidrogénatom. A szelekció is használhatja az rezisztencia vagy tolerancia mikroorganizmusok a savak és bázisok, magas hőmérsékletű tüzet sugárzást. Gyakran valamint egy „pozitív” szelekciót úgy hajtjuk végre, és a „negatív” - segítségével szelektív inhibitorok. Egy tápfolyadék egy azid aerob körülmények között szaporodó, például a tejsav baktériumok és a növekedés a más aerob mikroorganizmusok szuppresszálva. Azid, cianid és H2S szelektív hatással pas aerob organizmusok légzési bevonásával citokrómok. Az orvosi diagnosztika szelektívek szuppresszió detektálására Corynebacterium diphtheriae (a használata táptalaj tartalmazó tellurit) és patogén Enterobacteriaceae (agar tápközeg hozzáadott bizmut). Az inokulum lehet jelen különböző törzsei azonos típusú metabolizmus, eltérő egymástól csak kis mértékben, például csak az optimális pH-érték vagy a növekedési sebesség. Ha szakaszos tenyészet, hogy az ilyen anyagok, a domináns lesz a legnagyobb igazítani a feltételeket és a leggyorsabban növekvő törzs, az összes többi elnyomja, és nem lehet őket megkülönböztetni. Ezért abban az esetben, ha akarják, hogy biztosítsák a maximális számú törzsek nőnek bizonyos körülmények között, szabadon választható, ültetés kell végezni közvetlenül a csészében. A szilárd szelekciós tápközegben törzsek, hogy a feltételek kedvezőek, formában telepeket. Egy kellően nagy távolságot a telepeket, a verseny a tápanyagok nem kerülhet sor; törzsek lassabban nőttek, nem elnyomta gyorsabban növekszik, úgy, hogy mindkét hozzárendelhetők külön-külön. Ez az áttekintés táblázat összevont adatok beérkezését dúsítási mikroorganizmus-kultúrák különböző típusú anyagcserét. Tiszta mikroorganizmus tenyészet (az utolsó izolációs lépésben) általában úgy állítják képest (vagy) egy sűrű tápközegben. Az eljárás azzal kezdődik, a szétválasztása populációk különálló sejtek sejtek. A követelmény az, hogy a sejtek nőnek ki kolónia elszigetelt maradt más sejtekből vagy telepeket. Aerob baktériumok kinyerhetők módszerével Koch - szitáljuk a szuszpenzió felülete a közeg az ételek, vagy, könnyebben, elkenődés egy csepp platina kacs agar táptalajon. Anaerob baktériumok szuszpendálunk olvadt agart 45 ° C hőmérsékleten, és az inkubálást végeztük nélkül hozzáférést a levegő. Gondos szétválasztása egy telep, felszuszpendálását folyadék és újraalkalmazásával kenet vagy agar hígítási lehetővé teszi, hogy megkapjuk a tiszta tenyészeteket a legtöbb mikroorganizmus.