Diagnosztikai módszerek vírusos fertőzések
Diagnosztikai módszerek
Vírusos fertőzések.
Az influenza vírus. SARS
Surikov EV - MD dots.kafedry
mikrobiológiai, immunológiai és virológiai,
módszertani irányok
Kimutatása a vírus, illetve annak összetevői
közvetlenül a klinikai anyagból,
venni a beteg (gyors diagnózis);
Vírusizolálás klinikai mintákból
és azonosítását;
Szerodiagnosztizálására vírusos fertőzések;
A választott módszer a laboratóriumi diagnosztika
Attól függ, hogy:
A betegség természete;
Az állítólagos kórokozó;
Az időszak a betegség;
Követelmények összegyűjtése, tárolása és szállítása
vizsgálati anyag
Optimális időzítése mintavételi anyag;
Válogatás a minta függ a betegség patogenezisében;
Szükséges vért veszünk az akut stádiumban a betegség;
Kiválasztása függ a minta előzetes klinikai diagnózis;
Mintákat veszünk aszeptikus körülmények között steril fiolákba
csavaros kupakkal;
A mintákat tároljuk a hideg és nedves (nem fagyasztott); képes
stabilizáló használt táptalaj (Hanks' közepes és a másik.);
Szállítást végzik, a lehető legrövidebb idő alatt. Ha az idő
nyilvánított több mint 30-40 perc, és nem egyszer kerül sor
tanulmány, mintákat -80 ° C-on száraz jég vagy
folyékony nitrogénbe helyeztük át -180 ° C-on;
A mintákat jelzett, és kiadott egy társ
dokumentum;
Diagnosztikai módszerek vírusos fertőzések
1.
2.
3.
4.
Citológiai (gyors diagnózis);
virológiai
szerológiai
A molekuláris genetikai
Módszerek a gyors diagnózis
Rapid módszerek;
felgyorsult
módszerek;
A gyors diagnosztikai módszerek a virális
fertőzések
Malospetsificheskie
♦ Taurus
• Paschen
• Aragão
Taurus Babes-Negri
♦ intracelluláris zárványok
• nukleáris (pl. Alatt adenovírus fertőzések)
• citoplazmatikus (pl. Babes-Negri)
♦ azonosítása virion minták
• EM (ad belül választ 1 óra);
• EIM (válaszok 2-3 óra);
Alkalmas Rota, Adeno, gepadna, Paranix,
ortomixovírus és mtsai.
A gyors diagnosztikai módszerek a virális
fertőzések
nagyon specifikus
Kimutatása a vírus minták AG: RIF,
IFA, IHA, RIA, kicsapásos reakciónak
gél (2 és 24 óra);
Kimutatása korai antivirális antitestek IgM:
Phragmites, Rong, ELISA, RIA, stb.;
Kimutatása virális enzimek tésztát MG;
Azonosítás NC: PCR;
RIF betegesen
anyag
Rapid módszerek
Kimutatása a vírus sejttenyészetben AG keresztül
Miután 24 tárolására.
módszerek retrospektív
Virológiai módszer;
szerodiagnosztizálására;
virológiai módszer
szakaszból áll:
Termesztés (felhalmozás) a vírus;
Feltüntetése (érzékelés) a vírus;
Gépelés (a vírus azonosítása);
A módszer a virológiai
csibeembrió
5-7 napos, de legalább - 10-11 napos
A fő módja a fertőzés:
jelzése:
chorio-allantois membrán
a chorio-allantois-üregébe
üregébe sziktömlőjébe
üregébe az amnion
a szervezetben az embrió
magzati halál
morfológiai változásait embrió / bőr
WGA folyadékkal csirkeembrió üregek
azonosító:
RN (beleértve a HAI)
RSK
A módszer a virológiai
sejttenyészetekben
Gyakran - átültetett egyrétegű
jelzése:
CPE (citopatikus hatás vírusok - bármely
változtatni sejtréteg, beleértve tarfoltképző
és színes minta)
haemadsorbing aktivitást monoréteg (RGAds)
RIF (= azonosító)
azonosító:
RN (beleértve RTGAds)
RSK
RIF
influenzavírus
ortomiksovirusov -
Gr. ortoszilikátort - jobb,
myxa - nyálka
Ortomiksovirusov: osztályozás
orthomyxoviridae
influenza-
Influenza A vírus
influenza vírus
Influenza C vírus
Ortomiksovirusov: jellemző
család
spirál szimmetria típus
citoplazma zárványok
rendelkezésre álló nukleáris replikációs szakaszok
Ortomiksovirusov: a legfőbb módja
megművelés
csirke embrionális
magzatburok
húgytömiőfoiyadékba
kijelző
RGA
azonosító
RSK
HIT
Orthomyxovirusok: virion szerkezete
mag (nukleokapszid)
RNS-t (A és C - 8 C - 7)
szerkezeti fehérjét
(Nukleokapszid) - A, B vagy C.
enzimek
superkapsid
M fehérje
bilipidny réteg
tüskék (glikoproteinek - gp)
hemagglutinin (H) - indukciós
virusneytraliziruyuschih Ig,
adszorpció
neuraminidáz (N) - rés
bimbózó
Szerotípus influenza A vírus
(A WHO szerint a besorolás 1980)
képlet
időszak
keringés
megjegyzés
H1N1
1918 - 1957
1947-ig - H0N1
H2N2
1957 - 1968
ázsiai
H3N2
1968
Hong Kong
H1N1
1977
orosz
Ortomiksovirusov: antigéncsuszamlás
és annak következményei
antigén
sodródás
(1 - 2 év)
műszak
(10 - 15 év)
?
A
(És H és N)
az
(H)
pontmutációk a gén
C
(Nem)
felhalmozódás
sodródás
rekombináció két
egy teljes csere gént
felhalmozódás
változás gp
altípus változás gp
Érzékenység tényezők
A külső környezet a vírus az influenza A
56 ° C-on
UV-sugarak
fertőtlenítőszerek
mosószerek
Megkülönböztető jellemzői a vírus
Az influenza
1.
2.
3.
4.
Ez 7 RNS-fragmenseket
nem neuraminidáz (egy típusú tüskék)
csapok felületén vannak elhelyezve,
virion nem véletlenszerűen, de szigorú
hatszögletű orientáció
adszorpció a sejt egy másik
típusú receptorhoz
Influenza: epidemiológia és a természet
morbiditás
klinika
emberek
tünetmentes
aeroszol
járvány
A
járvány
az
helyi
vaku
C
szórványos
morbiditás
Influenza: patogenezis
légúti hám
vér
allergia
mámor
nodulus
endothelium
kapillárisok
vérzés a belső
testületek
limfociták
immunhiányos
bakteriális szövődmények
Influenza: az immunrendszer
intenzív és hosszan tartó, de
szűken specifikus
humorális
sejtes
IFN
NK
Ig
makrofágok
IgA
T
- helyi
semlegesítik az anti-H
anti-N -
terjedését
k
Influenza: immun és kemoprofilaxis
immunizálás
vakcina
él
halott
vegyi
immunglobulin
IFN
kemoprofilaxis
rimantadine
influenza A
kezdeti szakaszban
Virológiai diagnosztika influenza
1.
2.
3.
gyors diagnosztika
RIF: Ag a hám
Virológiai Módszer (korai)
nasopharyngeal mosás
csirke embrionális
RGA - Display
RAC - típus
HI - altípus
antitest módszerrel
antitest "párosított sera" (c / o 8-14 nap), - RAC, HAI
Által terjesztett vírusok VOZDUSHNOKAPELNYM (SARS)
SARS
a. Paramyxoviridae
n / a Paramyxovirinae
o. Respirovirus (VPGCH -1, -3)
o. Rubulavírus (VPGCH -2, -4A, 4b)
n / a Pneumovirinae
o. Pneumovírus (RS - vírus);
a. Coronaviridaeval
o. Koronavírus (több mint 10 faj)
a. Reoviridae
o. Orthoreovirus (3 srotipa)
a. Picomaviridae
o. Rhinovirus (2 féle, 100 szerovariánsok)
o. Enterovírus (coxsackie vírus és echovírus);
a. Adenoviridae
o. Mastadenovírus (80 faj)
a. Paramyxoviridae
n / a Paramyxovirinae
o. Rubulavírus (vírus
mumpsz);
o. Morbillivirusok (kanyaró vírus);
a. Togaviridae
o. Rubivirusok (rubeola vírus)
megnyilvánulásai SARS
SARS
felső osztály
légúti
Nátha (Reno és koronavírusok)
pharyngitis (korona, Paranix,
adenovírusok)
alsó osztály
légúti
Bronchitis és bronchiolitis
(RS -virusy)
tüdőgyulladás (influenza
parainfluenza)
morfológia
• Nagy shell
vírusok (150-300 nm)
• Spirál típusa
szimmetria
• A nukleokapszid
csavart egy spirális
• egyszálú
több részből
mínusz - RNS
Paramyxovírusok: jellemző
glikoproteinek (superkapsida tüskék):
- HN - és neuraminidáz
hemagglutinációs aktivitás
- F - membránfúziót (symplasts,
syncytinum), hemolízis
Replikáció végezzük teljes egészében
citoplazma
képezhet
citoplazma zárványok
Fehérjék és glikoproteinek
• hemagglutinin
neuraminidáz (at VPGCH és
mumpsz vírus, a RS -
nem)
• glikoprotein F (Fusion -
egyesülés)
• M-protein
• Fehérjék polimeráz
komplex (L, P)
Parainfluenzavírusból: ingatlanok
5 szerotípus (domináló
VPGCH-3)
hemagglutinizáló
tevékenység
CPP
Ez függ a szerotípus
Parainfluenza: patogenezis
nasopharyngeal hám
vér
tüdőgyulladás
(Gyerekek egy év)
ARI
Parainfluenza: immunitás
típus-specifikus
rövid
(beszerezhető
újrafertőződés azonos
szerotípus)
parainfluenza:
virológiai diagnosztizálására
1. Gyors diagnózis
Ag sejtjeiben az orrjáratok (IFA, ELISA)
2. virológiai módszer
nasopharyngeal mosás
▼
biocytoculture
▼
RGAds, CPP
▼
RSK, HI, RN
3. A szerológiai
antitest "párosított sera" (HI, DGC, RN)
Pneumovírus: tulajdonságok
azzal jellemezve, szincítiumképződéssel
teljes hiánya:
-
-
felszíni glikoproteinek:
-
-
hemagglutinációs és haemadsorbing
tevékenység
neuraminidázaktivitást
G - adszorpció
F - membrán fúzió (penetráció) és a
szincítiumképződéssel
2-es szerotípus (PH)
Légúti óriássejtes vírus:
járványtan
• Ez a patológiai a alsóbb
légúti gyermekek 3 éves korig.
• Maximális súlyos betegségek elszámolni
korosztály 6 hét - 6 hónap (bronchiolitis, tüdőgyulladás)
• Az ismételt fertőzések elveszti
erőszakosság
• A fő út - pin, aerogén
Patogenézisében az RSV-fertőzés (légúti óriássejtes
vírusfertőzés)
aeroszol útvonal
ARI (felnőtt)
hám a nyálkahártya a felső
légúti
tüdőgyulladás (gyermek)
immunszuppresszió
immunkomplex
bakteriális szövődmények
immunpatológiájának
Koronavírus: osztályozás
Coronaviridaeval
férfi
állatok és madarak
SARS
(SARS)
enterális
légző
(Kiemelten fertőző)
etimológia
SARS - súlyos akut
légzési distressz szindróma
(SARS - súlyos akut légzőszervi
szindróma)
Koronavírus Properties
• slozhnoorganizovannyh
mérete 100-150 nm
• Spirál típusa szimmetria
• glikoproteinek E2 - és peplomernek
E1 - transzmembrán
• egyszálú
plusz a nem-szegmentált RNS
• 4 szerocsoportok (PH) - Nem
cross immunitás
• Gyakorlatilag művelt
koronavírus
szerepe az emberi patológia
légző
b / tüneti
ARI
hörghurut
tüdőgyulladás (gyermek 2
év)
SARS (SARS)
enterális
gyomor- és bélhurut (a gyerekek)
Diagnózis a SARS okozta
koronavírusokat
• Gyors diagnózis: (RIF kimutatására a magas vérnyomás
VAR epiteliális sejtek)
• A szerológiai (RSK, HI, RN néző
szerodiagnosztizálására)
• Molecular Genetics (PCR), hogy meghatározzuk
jelenlétében virális RNS
Adenovírus: az összetétele a család
Adenoviridae
• Aviadenovirus - madárinfluenza-vírusok
• Mastadenovirus - emlősvírusokból
• szerotípus (HI)
adenovírus:
általános jellemzői
• Egyszerű DNS virionokat marketing
• 252 kapszomer
• a 12 csúcsa a ikozaéder - rost
(Menet)
• antigének:
• csoport-specifikus
(Nukleokapszid) - RAC
• típusspecifikus
(= Hemagglutinin menet) -
HAI, RN
Adenovírus-fertőzés: patogenézisében
elsődleges reprodukció
nyálkahártya epiteliális sejtek
• légúti
• bél
kötőhártya
limfoid szövet
• mandulák
• mesenterialis nyirokcsomók
▼
vér
▼
vaszkuláris endotélium
▼
exudatív gyulladás a nyálkahártyák
▼
fibrines film, nekrózis
Adenovírus-fertőzés: klinikai formái
• ARI
• kötőhártya láz
• tüdőgyulladás (gyerekek, idősek)
• (kerato-) kötőhártya-gyulladás
• gastroenteritis
• ritka adenovírus vereség
• meningoencephalitis
• vérzéses hólyaggyulladás
Adenovírus-fertőzés: vizsgálat
placentán fertőzés
méhen belüli betegség
magzati anomáliák
halálos tüdőgyulladás újszülötteket
Az adenovírus fertőzések: virológia
diagnosztika
1.
2.
3.
Kimutatása Ag a légúti hám (RIF).
vírusizolálást
váladék az orr, a garat, a kötőhártya, bélsár
▼
biocytoculture
▼
RSK
▼
PH, HI
Kimutatása emelkedés az antitest-titer (RSK, HI, RN)
Köszönöm
figyelem
